一种同时测定富马酸伏诺拉生中3种杂质的检测方法技术

本发明专利技术属于药物分析检测技术领域，具体涉及一种同时测定富马酸伏诺拉生中3种杂质的检测方法。该方法可以在一个色谱条件下同时测定富马酸伏诺拉生中吡啶

【技术实现步骤摘要】
一种同时测定富马酸伏诺拉生中3种杂质的检测方法


[0001]本专利技术属于药物分析检测
更具体地，涉及一种同时测定富马酸伏诺拉生中3种杂质的检测方法。

技术介绍

[0002]富马酸伏诺拉生(1
‑
[5
‑
(2
‑
氟苯基)
‑1‑
(吡啶
‑3‑
基磺酰基)
‑
1H
‑
吡咯
‑3‑
基]‑
N
‑
甲基甲胺单富马酸盐)是一种新型的质子泵抑制剂，主要用于治疗酸相关胃肠道疾病，如胃溃疡、胃食管反流症等。吡啶
‑3‑
磺酰氯是合成富马酸伏诺拉生的关键起始物料，也是一种强氧化剂，化学性质活泼，易水解生成吡啶
‑3‑
磺酸，同时，吡啶
‑3‑
磺酰氯还会与合成工艺中用到的甲醇、乙醇溶剂反应，生成潜在基因毒性杂质吡啶
‑3‑
磺酸甲酯和吡啶
‑3‑
磺酸乙酯；另一方面，富马酸伏诺拉生本身也可降解得到吡啶
‑3‑
磺酸。
[0003][0004]富马酸伏诺拉生制备过程中存在的吡啶
‑3‑
磺酸、吡啶
‑3‑
磺酸甲酯、吡啶
‑3‑
磺酸乙酯副产物杂质会被带入到成品中，无治疗作用或者影响药物的稳定性、疗效，甚至存在遗传毒性，直接引起DNA损伤，导致DNA突变，从而引发癌症，存在安全隐患。因此，迫切需要提供一种检测富马酸伏诺拉生中杂质的分析方法。但是，吡啶
‑3‑
磺酸沸点在330℃以上，超过绝大多数气相色谱柱的温度范围，因此不适合用气相色谱法(CG)来测定；并且，磺酸酯的反应活性较高，利用GC检测时磺酸酯会在进样口高温分解或者样品中的磺酸与醇类溶剂瞬间反应生成磺酸酯。而采用HPLC法测定时，样品中残留的磺酸易与测试中常用到的醇类溶剂发生反应，生成待测的磺酸酯，造成假阳性结果，影响测定结果的准确性；并且磺酸酯类杂质极性大，在色谱柱中保留弱，能容易被洗脱下来而导致杂质之间无法有效分离。如乐志艳等(乐志艳,肖敏,方潇颖.HPLC法测定富马酸沃诺拉赞原料药中吡啶
‑3‑
磺酸的含量[J].今日药学,2019,v.29(01):23
‑
26.)公开了一种HPLC法测定富马酸沃诺拉赞原料药中吡啶
‑3‑
磺酸的含量，在选定的色谱条件下，吡啶
‑3‑
磺酸与相邻色谱峰分离良好，峰面积呈现良好
的线性关系，精密度良好，灵敏度高，准确度好，但是该方法仅能检测吡啶
‑3‑
磺酸，吡啶
‑3‑
磺酸甲酯、吡啶
‑3‑
磺酸乙酯没有响应值，无法同时检测。

技术实现思路

[0005]本专利技术要解决的技术问题是克服现有技术无法用CG或HPLC同时测定富马酸伏诺拉生中吡啶
‑3‑
磺酸、吡啶
‑3‑
磺酸甲酯、吡啶
‑3‑
磺酸乙酯3种杂质方法的缺陷和不足，提供一种同时测定富马酸伏诺拉生中吡啶
‑3‑
磺酸、吡啶
‑3‑
磺酸甲酯、吡啶
‑3‑
磺酸乙酯3种杂质的检测方法。
[0006]本专利技术的目的是提供一种同时测定富马酸伏诺拉生中吡啶
‑3‑
磺酸、吡啶
‑3‑
磺酸甲酯、吡啶
‑3‑
磺酸乙酯3种杂质的检测方法。
[0007]本专利技术上述目的通过以下技术方案实现：
[0008]一种同时测定富马酸伏诺拉生中吡啶
‑3‑
磺酸、吡啶
‑3‑
磺酸甲酯、吡啶
‑3‑
磺酸乙酯3种杂质的检测方法，采用高效液相色谱法进行检测，
[0009]其中，所述吡啶
‑3‑
磺酸、吡啶
‑3‑
磺酸甲酯、吡啶
‑3‑
磺酸乙酯的结构如下所示：
[0010][0011]其中，高效液相色谱条件为：
[0012]采用十八烷基硅烷键合硅胶填充的色谱柱，在260nm检测波长，25～45℃柱温，0.8～1.2ml/min流速条件下，以0.02～0.05mol/L磷酸氢二钾溶液作为流动相A，以乙腈作为流动相B，在梯度洗脱条件下进行检测。
[0013]进一步地，所述梯度洗脱为0～4min，流动相A：98～98％；4～10min，流动相A：98～40％；10～20min，流动相A：40～40％；20～20.1min，流动相A：40～98％；20.1～25min，流动相A：98～98％。
[0014]优选地，所述反相C18色谱柱为Sepax HP
‑
C18 4.6mm
×
250mm，5μm。
[0015]优选地，所述富马酸伏诺拉生测定时，供试品溶液用2～5％乙腈溶液配制。
[0016]更优选地，所述富马酸伏诺拉生测定时，供试品溶液用5％乙腈溶液配制。
[0017]进一步地，所述供试品溶液中富马酸伏诺拉生浓度为0.5～4mg/ml。
[0018]优选地，所述磷酸氢二钾溶液用磷酸调节pH值为3.0～6.0。
[0019]更优选地，所述磷酸氢二钾溶液用磷酸调节pH值为6.0。
[0020]优选地，所述柱温为25～30℃；更优选地，所述柱温为30℃。
[0021]优选地，所述流速为0.8～1.0ml/min；更优选地，所述流速为1.0ml/min。
[0022]优选地，所述流动相A为0.05mol/L磷酸氢二钾溶液。
[0023]更进一步地，所述高效液相色谱条件中，进样量为50～100μm。
[0024]进一步地，所述检测方法中吡啶
‑3‑
磺酸甲酯、吡啶
‑3‑
磺酸乙酯的定量限为0.001～0.002％，检测限为0.0004～0.0007％；吡啶
‑3‑
磺酸定量限为0.08～0.10％，检测限为0.004～0.005％。
[0025]更进一步地，所述检测方法中，供试品溶液的制备方法为：取富马酸伏诺拉生适
量，用2～5％乙腈溶液溶解并稀释制成每1ml约含富马酸伏诺拉生0.5～4mg的溶液，作为供试品溶液。
[0026]进一步地，所述检测方法中，对照品溶液的制备方法为：取吡啶
‑3‑
磺酸甲酯、吡啶
‑3‑
磺酸乙酯、吡啶
‑3‑
磺酸对照品适量，用2～5％乙腈溶液制成每1ml中含吡啶
‑3‑
磺酸甲酯、吡啶
‑3‑
磺酸乙酯、吡啶
‑3‑
磺酸分别为0.014～0.112μg、0.014～0.112μg、0.375～3μg的溶液。
[0027]本专利技术具有以下有益效果：
[0028]本发本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种同时测定富马酸伏诺拉生中3种杂质的检测方法，其特征在于，采用高效液相色谱法进行检测，其中，所述3种杂质为吡啶
‑3‑
磺酸、吡啶
‑3‑
磺酸甲酯和吡啶
‑3‑
磺酸乙酯；所述高效液相色谱条件为：采用十八烷基硅烷键合硅胶填充的色谱柱，在260nm检测波长，25～45℃柱温，0.8～1.2ml/min流速条件下，以0.02～0.05mol/L磷酸氢二钾或磷酸二氢钾溶液作为流动相A，以乙腈作为流动相B，在梯度洗脱条件下进行检测。2.根据权利要求1所述检测方法，其特征在于，所述梯度洗脱为0～4min，流动相A：98～98％；4～10min，流动相A：98～40％；10～20min，流动相A：40～40％；20～20.1min，流动相A：40～98％；20.1～25min，流动相A：98～98％。3.根据权利要求1所述检测方法，其特征在于，所述反相C18色谱柱为Sepax HP
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C18 4.6mm
×
250...

【专利技术属性】
技术研发人员：左瑾蓉，宿亮，朱婧，王玲兰，龚翠云，
申请(专利权)人：湖南千金湘江药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：