一种藤黄酸层层自主装胶束的制备方法及其应用技术

本发明专利技术公开了一种藤黄酸层层自主装胶束的制备方法及其应用，称取10mg藤黄酸、称取2mg姜黄素、卵磷脂和SolutolHS15各200mg，转移至圆底烧瓶中，加入50mL无水乙醇超声至完全溶解；使用旋转蒸发器将溶剂旋干形成一层薄膜，再加入6mL蒸馏水超声30分钟，形成的均匀体系为藤黄酸胶束；依次慢慢滴加2mL鱼精蛋白溶液、2mL透明质酸溶液后分散均匀，0.45μm过滤，即得透明质酸

【技术实现步骤摘要】
一种藤黄酸层层自主装胶束的制备方法及其应用


[0001]本专利技术涉及一种藤黄酸胶束的制备，特别涉及一种藤黄酸层层层自主装胶束的制备方法及其应用。

技术介绍

[0002]藤黄为藤黄科植物藤黄(Garcinia hanburyiHookf.)的树干被割伤后流出的胶状树脂，干燥后呈黄棕色圆柱状或不规则块状物，质脆易碎，原产东南亚,我国部分地区如云南、广西、广东等地有引种栽培。藤黄中含有藤黄酸(Gambogic acid)、新藤黄酸(Neomogenic acid)、别藤黄酸(Allogambogic acid)等多种成分。在中医临床实践中,藤黄主要用于治疗痈疽肿毒、溃疡、湿疮、肿瘤、顽癣等病症。现代药理研究表明，藤黄酸对多种肿瘤细胞具有较强的抑制作用，并在有效剂量范围内毒副作用较小，对肿瘤细胞的抑制具有较高的选择性，而对正常动物造血系统和免疫功能没有影响。有研究表明纳米制剂能有效提高疗效，有望开发为新型抗肿瘤药物制剂。
[0003]聚合物胶束制剂作为药物载体的开发研究源于20世纪90年代，它是由两亲性聚合物在水溶液中自发形成的一种自组装结构。
[0004]目前，藤黄酸被广泛用于抗肿瘤，单独使用藤黄酸抗肿瘤仍存在一些不足，如果能够藤黄酸与自主装胶束结合，用于抗肿瘤将具有较大的前景。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于提供一种藤黄酸层层自主装胶束的制备方法及其应用，透明质酸
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鱼精蛋白
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藤黄酸胶束(HA
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PRM
‑<br/>GA
‑
M)比藤黄酸(GA)有更强的抗肿瘤能力，以解决上述
技术介绍
中提出的问题。
[0006]为实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：
[0007]一种藤黄酸层层自主装胶束的制备方法，包括如下步骤：
[0008]步骤1：称取10mg藤黄酸(GA)、称取2mg姜黄素、卵磷脂和Solutol HS 15各200mg，转移至圆底烧瓶中，加入50mL无水乙醇超声至完全溶解；
[0009]步骤2：使用旋转蒸发器将溶剂旋干形成一层薄膜，再加入6mL蒸馏水超声30分钟，形成的均匀体系为藤黄酸胶束(GA
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M)；
[0010]步骤3：依次慢慢滴加2mL鱼精蛋白溶液(5mg/mL)、2mL透明质酸溶液(6mg/mL)后分散均匀，0.45μm过滤，即得透明质酸
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鱼精蛋白
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藤黄酸胶束(HA
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PRM
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GA
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M)。
[0011]进一步地，藤黄酸胶束(GA
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M)和透明质酸
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鱼精蛋白
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藤黄酸胶束(HA
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PRM
‑
GA
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M)的粒径分布、zeta电位的测定步骤如下：利用0.45μm微孔过滤器对样品过滤，选择MalvernZetasizerNano
‑
ZS进行测定。
[0012]进一步地，透明质酸
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鱼精蛋白
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藤黄酸胶束(HA
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PRM
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GA
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M)的形态学评价采用透射电子显微镜进行，透明质酸
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鱼精蛋白
‑
藤黄酸胶束(HA
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PRM
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GA
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M)的包封率和载药量采用超滤离心法测定。
[0013]进一步地，胶束中藤黄酸的包封率和载药量选用超滤管和7000g离心力10min分离未包封的藤黄酸进行计算。
[0014]进一步地，胶束中的藤黄酸体外溶出行为采用透析袋法测定。
[0015]进一步地，将2mL HA
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PRM
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GA
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M转移到透析袋中，并将密封袋放置到100mL PBS溶液中，该溶液含有0.5％(v/v)吐温80，添加或不添加200单位/mL透明质酸酶。
[0016]进一步地，实验在37
±
0.2℃的恒温摇床中进行，并以100rpm持续振荡，在预定时间点，取适量的样品，并立即用等量的新鲜培养基代替，样品含量用高效液相色谱法测定。
[0017]进一步地，藤黄酸胶束(GA
‑
M)为采用薄膜水化法制备的同时包载藤黄酸与姜黄素的协同载药纳米胶束，两个药物成分比例为5:1。
[0018]本专利技术提供的另一种技术方案：藤黄酸层层自主装胶束的制备方法获得的藤黄酸层层自主装胶束在抗肿瘤中的应用，采用藤黄酸和姜黄素组合构建纳米胶束，在人肝癌细胞中表现出协同抗肿瘤作用。
[0019]与现有技术相比，本专利技术的有益效果是：本专利技术以藤黄酸(GA)、卵磷脂和Solutol HS 15溶剂为主料，通过减压旋干成薄膜，蒸馏水超声，形成藤黄酸胶束(GA
‑
M)，以藤黄酸胶束(GA
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M)为基料，在不断搅拌条件下，逐步添加鱼精蛋白溶液和透明质酸溶液，实现层层包载，过滤后获得透明质酸
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鱼精蛋白
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藤黄酸胶束(HA
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PRM
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GA
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M)，实验证实，透明质酸
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鱼精蛋白
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藤黄酸胶束(HA
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PRM
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GA
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M)比藤黄酸(GA)有更强的抗肿瘤能力。
附图说明
[0020]图1为本专利技术的胶束的粒子形貌和藤黄酸溶出行为示意图；
[0021]图2为本专利技术的GA
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M、HA
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PRM
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GA
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M对A549的迁移与侵袭能力示意图。
具体实施方式
[0022]下面将结合本专利技术实施例中的附图，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。
[0023]一种藤黄酸层层自主装胶束的制备方法，包括如下步骤：
[0024]步骤1：称取10mg藤黄酸(GA)、称取2mg姜黄素、卵磷脂和Solutol HS 15各200mg，转移至圆底烧瓶中，加入50mL无水乙醇超声至完全溶解；
[0025]步骤2：使用旋转蒸发器将溶剂旋干形成一层薄膜，再加入6mL蒸馏水超声30分钟，形成的均匀体系为藤黄酸胶束(GA
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M)；
[0026]步骤3：依次慢慢滴加2mL鱼精蛋白溶液(5mg/mL)、2mL透明质酸溶液(6mg/mL)后分散均匀，0.45μm过滤，即得透明质酸
‑
鱼精蛋白
‑
藤黄酸胶束(HA
...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种藤黄酸层层自主装胶束的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤1：称取10mg藤黄酸(GA)、称取2mg姜黄素、卵磷脂和Solutol HS 15各200mg，转移至圆底烧瓶中，加入50mL无水乙醇超声至完全溶解；步骤2：使用旋转蒸发器将溶剂旋干形成一层薄膜，再加入6mL蒸馏水超声30分钟，形成的均匀体系为藤黄酸胶束(GA
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M)；步骤3：依次慢慢滴加2mL鱼精蛋白溶液(5mg/mL)、2mL透明质酸溶液(6mg/mL)后分散均匀，0.45μm过滤，即得透明质酸
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鱼精蛋白
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藤黄酸胶束(HA
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PRM
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GA
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M)。2.如权利要求1所述的藤黄酸层层自主装胶束的制备方法，其特征在于，藤黄酸胶束(GA
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M)和透明质酸
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鱼精蛋白
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藤黄酸胶束(HA
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PRM
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GA
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M)的粒径分布、zeta电位的测定步骤如下：利用0.45μm微孔过滤器对样品过滤，选择Malvern ZetasizerNano
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ZS进行测定。3.如权利要求1所述的藤黄酸层层自主装胶束的制备方法，其特征在于，透明质酸
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鱼精蛋白
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藤黄酸胶束(HA
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PRM
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GA
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【专利技术属性】
技术研发人员：柯仲成，程子洋，孙银宇，王欢，
申请(专利权)人：黄山学院，
类型：发明
国别省市：