一种荧光免疫检测毛发痕量毒品的试剂盒及其图像检测方法与系统技术方案

本发明专利技术提供了一种荧光免疫检测毒品的试剂盒包括样品清洗液，裂解液，荧光免疫层析试纸条，试剂盒采用毛发作为检测样品，对毛发中的毒品含量进行定量检测，取样简单，克服毒品检测取样困难的问题。基于上述试剂盒滴测显色结果，本发明专利技术提供了一种荧光免疫检测毛发痕量毒品的图像检测方法，通过双共聚焦免疫荧光检测获得图像识别快速，精确地识别出违禁品在毛发中的浓度。而基于该检测方法，本发明专利技术还提供了便携的荧光免疫检测毛发痕量毒品的图像检测系统，将试剂盒、检测双共聚焦免疫荧光检测仪、平板电脑整合在一个系统中，实现了检测形式的可视化、便捷化，检测方式智能化和检测结果的精确化。果的精确化。果的精确化。

【技术实现步骤摘要】
一种荧光免疫检测毛发痕量毒品的试剂盒及其图像检测方法与系统


[0001]本专利技术属于生物检测
，特别是涉及一种荧光免疫检测毛发痕量毒品的试剂盒。

技术介绍

[0002]从最原始的罂粟，加工成鸦片、可卡因和海洛因，到现在的冰毒、吗啡、大麻等，毒品一直离人们的生活很近。毒品不仅影响了吸毒者的健康，而且对吸毒者的家庭、社会、国家都造成了巨大的危害。为了与毒品作斗争，各国政府投入了大量的资金，以美国为例，自1981年以来政府每年平均投入3亿美元用于禁毒教育、治疗和研究项目，至奥巴马政府执政，美国各级政府每年用于禁毒执法的资金高达441亿美元。我国在挽救、治疗吸毒者，开展禁毒教育和科研，加大缉毒力度等方面也投入了大量的人力、物力和财力。然而如何针对吸毒人员作出有效、快速、准确、稳定的检测成为了亟待解决的问题。
[0003]随着检测手段的进步，对人体毒品残留的检测中，相较于传统血液、尿液等检测对象，毛发检测的标本容易获得，现场操作简单，避免了吸毒人员的取证不配合，标本掺假，成为了一种重要的毒品检测对象。
[0004]目前，气相色谱法、气相色谱
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质谱联用法、高效液相色谱法、毛细管电泳法、免疫分析法等多种检测方法已经被用于对毒品的检测。例如中国专利CN101750458B公开了一种检测人体中毒品残留的方法，其采用HPLC
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Chip
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MS/MS和HPLC
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MS/MS来检测毒品残留，具有费用低，准确性和稳定性高的优点。中国专利CN104422762A公开了一种检测尿液、唾液、血液、毛发中毒品的酶联免疫试剂盒和检测方法，该酶联免疫试剂盒具有高特异性、高灵敏度等特点。
[0005]现有试剂盒对于毒品含量检测都采用标准曲线标定而根据C线发光强度计算出相应毒品浓度,然而标定曲线由于并非百分百准确,存在一定程度误差，因此当检测含量在毫克数量级样品中精确检测纳克级毒品含量时，很容易产生不能容忍的较大误差。因此如何提升检测精度全部依靠函数曲线标定并不能得到理想的精度。
[0006]随着禁毒形势的愈发严峻，新型、有效、快速、准确、稳定的检测方法和装置的需求进一步被放大。

技术实现思路

[0007]本专利技术的目的在于提供一种荧光免疫检测毛发痕量毒品的试剂盒。本专利技术能够快速、准确、灵敏的对毛发中的毒品进行检测。
[0008]为了达到上述的目的，本专利技术采取以下技术方案：
[0009]一种荧光免疫检测毛发痕量毒品的试剂盒，包括样品清洗液，裂解液，荧光免疫层析试纸条；
[0010]所述清洗液，用于将毛发样品表面污物清除，所述裂解液用于将毒品小分子从毛
发中溶出；
[0011]所述荧光免疫层析试纸条包含PVC衬板、硝酸纤维膜、样品垫和吸收垫，所述样品垫、硝酸纤维膜和吸收垫依次交错固定于PVC衬板之上；
[0012]所述样品垫上有毒品抗体
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量子点纳米颗粒复合物以及兔IgG
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量子点纳米颗粒复合物；
[0013]所述硝酸纤维膜上设有检测线和质控线，检测线包被有毒品抗原
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牛血清白蛋白复合物，质控线包被有羊抗兔抗体。
[0014]本专利技术检测对象为毛发相对于常规检测方法要验血、验尿或者验口水，可以克服毒品测试取证困难和被测人员的不配合。
[0015]在上述试剂盒中，清洗液、裂解液和毛发的质量比为(15
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28)：(70
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73)：1。
[0016]在上述试剂盒中，优选的，所述清洗液包含表面活性剂，所述裂解液包含角蛋白酶和缓冲溶液。其中，角蛋白酶能够腐蚀毛发表面，使毛发形成粗糙表面，从而利于毒品小分子从待测样品中溶出。单独设置包含表面活性剂的清洗液能够洗涤毛发表面的污渍，使角蛋白酶能充分跟毛发接触，与活性剂和角蛋白酶和缓冲溶液混合液进行处理相比能进一步提高毛发表面的污渍去除，提高毒品的溶出率。由于活性剂是单独对毛发样品进行清洗，因而不会像混合活性剂的裂解液那般在混合有清洗下的污渍的体系中进行蛋白酶接触，从而降低接触几率，进而影响毒品的溶出率。缓冲溶液能够中和角蛋白酶分解毛发产生的副反应物，提高角蛋白酶的生物活性。
[0017]进一步地，所述表面活性剂优选非离子表面活性剂，例如聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、Triton X 100、Triton X 114、Triton X 405、Tween 20、Tween 60、Tween 80。相对于离子型表面活性剂，非离子表面活性剂不容易对离子强度产生影响，从而避免了影响后续试剂条中的免疫反应，提高了免疫检测的准确度。
[0018]进一步地，所述缓冲溶剂优选为TRIS(无水四硼酸钠)
‑
EDTA缓冲溶液。本专利技术的缓冲体系相对于其它缓冲体系来说pH范围接近8，性质温和，且溶液稳定性更高。
[0019]进一步地，所述裂解液还包括碳酸氢钠。碳酸氢钠的添加主要是为了进一步调整裂解液的pH。
[0020]进一步地，所述裂解液中角蛋白酶的含量为14000
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72000IU/ML。
[0021]在上述试剂盒中，优选的，所述量子点纳米颗粒的荧光发射波长范围为600
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620nm，更优选的，发射波长为610nm。激发光的波长范围为360
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430nm，更优选的，激发光的波长为365nm。
[0022]在上述试剂盒中，优选的，所述量子点纳米颗粒为单一化合物形成的量子点或是几种化合物组装成的复合物量子点。更优选的，所述化合物选自ZnS、CdS、HgS、MgS、CdSe、ZnSe、ZnCdSe中的一种或多种。
[0023]本专利技术荧光免疫层析试剂盒采用量子点纳米颗粒作为荧光发射物质，量子点在光学性能上表现出激发光谱宽二连续，发射光谱窄且对称，荧光强度高，荧光寿命长，稳定性好等特点，能够克服常规的稀土微球，胶乳微球等荧光材料，信号衰退块，信号梯度不明显等缺陷。本专利技术的荧光免疫试纸条显示的荧光信号可以在2个小时内不发生明显衰减，且信号的梯度非常明显，可以有效分层，使测试的荧光信号更加稳定和便于检测提高检测的灵敏度和准确度。此外，量子点荧光稳定，信号强且变化明显的性质，也使得荧光信号量值转
化效果好，利于定量分析。
[0024]本专利技术荧光免疫层析试纸条的检测原理为竞争法，T线(检测线)包被的抗原和待检样品中的毒品抗原竞争结合毒品抗体
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量子点纳米颗粒复合物，当待检样品中无毒品抗原存在，毒品抗体
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量子点纳米复合物在泳动过程中先和T线包被毒品抗原
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牛血清白蛋白复合物结合，T线处形成毛发荧光免疫分析仪可测的荧光信号；当待检样品中有毒品抗原存在，则样品中的毒品抗原、包被毒品抗原和毒品抗原
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牛血清白蛋白复合物竞争结合，此时T线处信号强度会随着样品中毒品抗原的增加而逐渐减弱；而兔IgG
‑本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种荧光免疫检测毛发痕量毒品的试剂盒，其特征在于，包括样品清洗液，裂解液，荧光免疫层析试纸条；所述清洗液用于将毛发样品表面污物清除，所述裂解液用于将毒品小分子从毛发中溶出；所述荧光免疫层析试纸条包含PVC衬板、硝酸纤维膜、样品垫和吸收垫，所述样品垫、硝酸纤维膜和吸收垫依次交错固定于PVC衬板之上；所述样品垫上有毒品抗体
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量子点纳米颗粒复合物以及兔IgG
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量子点纳米颗粒复合物；所述硝酸纤维膜上设有检测线和质控线，检测线包被有毒品抗原
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牛血清白蛋白复合物，质控线包被有羊抗兔抗体。2.根据权利要求1的所述试剂盒，其特征在于，清洗液、裂解液和毛发的质量比为(15
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28)：(70
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73)：1，所述清洗液包含表面活性剂，所述裂解液包含角蛋白酶和缓冲溶液。3.根据权利要求1的所述试剂盒，其特征在于，所述表面活性剂为非离子表面活性剂。4.根据权利要求1的所述试剂盒，其特征在于，非离子表面活性剂为聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、Triton X 100、Triton X 114、Triton X 405、Tween 20、Tween 60、Tween 80中的至少一种，所述缓冲溶剂为TRIS(无水四硼酸钠)，EDTA缓冲溶液或者缓冲溶剂为TRIS(无水四硼酸钠)，EDTA缓冲溶液和碳酸氢钠。5.根据权利要求1的所述试剂盒，其特征在于，所述裂解液中角蛋白酶的含量为14000
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72000IU/ML。6.根据权利要求1的所述试剂盒，其特征在于，所述量子点纳米颗粒的荧光发射波长范围为600
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620nm，所述量子点纳米颗粒选自ZnS、CdS、HgS、MgS、CdSe、ZnSe、ZnCdSe中的一种或多种。7.一种利用如权利要求1
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6中任一项试剂盒以实现荧光免疫检测毛发痕量毒品的图像检测方法，其特征在于，包括如下步骤：S1配制含有不同浓度的毒品的裂解液标准品，将其滴入试条的滴入口，待试条T线和C线颜色目视稳定后，使用共聚焦荧光检测系统对试条T线和C线进行荧光进行成像，使用共聚焦荧光检测系统对试条T线和C线进行荧光进行成像，获得多个对应不同毒品浓度的第一图像；S2将所述多个对应不同毒品浓度的第一图像作为人工智能模型输入端，以相应的浓度作为输出端，建立痕量毒品智能识别模型；S3获取待测毛发样品，并将其处理成平均长度在5
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10mm的细碎；S4使用上述的试剂盒中的清洗液将步骤S3中处理好的毛发细碎进行清洗预定的时间t1；并将清洗完毕的所述毛发细碎经冲洗和烘干后浸泡于裂解液中预设的时间t2；S5将浸泡后的裂解液滴入试条的滴入口，待试条T线和C线颜色目视稳定后，使用共聚焦荧光检测系统对试条T线和C线进行荧光进行成像，获得第二图像；将第二图像代入步骤S2建立的痕量毒品智能识别模型中得到检测结果。8.如权利要求7所述的检测方法，其特征在于，步骤S2中所述人工智能模型包括卷积神经网络(CNN)，深度神经网络(DNN)，...

【专利技术属性】
技术研发人员：欧阳云，方芳，郑水娣，
申请(专利权)人：杭州莱和生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：