米诺环素作为酪氨酸激酶抑制剂的新用途制造技术

本发明专利技术属于生物医药技术领域，具体涉及一种米诺环素作为酪氨酸激酶抑制剂的新用途。为了提供一种新型酪氨酸激酶抑制剂，该抑制剂能有效抑制肿瘤细胞侵袭和转移，为肿瘤的治疗提供一种新的思路，本发明专利技术提供了米诺环素作为酪氨酸激酶抑制剂的新用途。米诺环素作为一种新的酪氨酸激酶抑制剂，通过抑制酪氨酸激酶的活性，进而抑制癌细胞转移，从而为制备抑制癌细胞转移的药物提供了一种新的方式。胞转移的药物提供了一种新的方式。胞转移的药物提供了一种新的方式。

【技术实现步骤摘要】
米诺环素作为酪氨酸激酶抑制剂的新用途


[0001]本专利技术属于生物医药
，具体涉及一种米诺环素作为酪氨酸激酶抑制剂的新用途。

技术介绍

[0002]Src是非受体膜相关酪氨酸激酶家族的原型成员，包括Fyn，Yes，Blk，Yrk，Fgr，Hck，Lck和Lyn。Src是60kDa的蛋白质，由多个功能域组成，不仅能通过其酶促活性发挥其生物学作用，而且凭借其多结构域可以与关键细胞区隔中的其他蛋白质相互作用，从而发挥其生物学作用。Src的基本功能是将外部信号传递到细胞内部，Src通过磷酸化主要位于RTK和整联蛋白下游的底物上的酪氨酸残基来完成此任务。值得注意的是，Src非受体细胞质酪氨酸激酶在肿瘤当中的作用逐渐引起了人们的关注。Src是第一个被发现的癌基因，并且已经成为癌症研究中的热点。Src非受体细胞质酪氨酸激酶在细胞中的生物学作用是比较复杂的，Src在各种组织中普遍表达，在神经元，血小板和破骨细胞中具有较高的浓度。在正常条件下，Src会调节细胞的基本活性。Src参与正常细胞稳态的维持和广泛的生理功能，包括细胞增殖和存活，细胞骨架的调控，细胞形状控制，维持正常的细胞间接触，细胞基质粘附动态，动力和迁移。越来越多的证据表明，Src酪氨酸激酶能够促进肿瘤EMT过程。原癌基因蛋白Src最早发现于Rous肉瘤逆转录病毒，在后续的研究中引领了非受体酪氨酸激酶领域。Src酪氨酸激酶家族在基因转录、细胞迁移、细胞凋亡与分化以及信号转导生物过程中扮演重要角色。此外Src酪氨酸激酶家族还增强了不同癌症中肿瘤细胞的迁移与侵袭。/>[0003]LYN酪氨酸激酶属Src非受体酪氨酸激酶范畴，其位于细胞表面，能够与STAT3相互作用直接介导STAT3的激活从而完成特定信号传递。不仅如此，LYN能促进肿瘤细胞增殖、迁移和侵袭过程。研究表明LYN能在乳腺癌和膀胱癌中启动Vav
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Rac1
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PAK1信号级联反应导致Snail转录因子的增加，从而促进EMT进程。而Yoon
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La Choi等人确定了LYN是乳腺癌中侵袭相关的治疗靶点。
[0004]EMT是一种哺乳动物胚胎发育过程中必不可少的生理现象。研究证实肿瘤细胞可通过EMT形成局部扩散，此过程伴随着多个分子标志物的改变，包括Snali、Slug、Twist等细胞因子的表达上调，从而引起E
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Cadherin的下调以及Vimentin和N
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Cadherin等表达上调。EMT的发生涉及到多个信号转导通路，且各通路间关系复杂，相互影响。其中，信号转导和转录激活因子3(STAT3)参与了机体许多生理和病理过程，其介导的信号通路与肿瘤细胞的增殖、抗凋亡、侵袭、转移、血管形成和免疫逃逸密切相关。上游的信号可以激活STAT3，磷酸化STAT3可以入核绑定特定EMT转录因子(Slug、Snail、ZEB1等)，调节肿瘤细胞中EMT相关基因的表达，最终使肿瘤细胞发生由上皮表型向间质表型的转化，使肿瘤细胞发生侵袭和转移。
[0005]越来越多的证据表明，抗生素类药物具有抑制肿瘤转移的作用。米诺环素作为一种四环素类抗生素，其抗菌作用最强，脂溶性较高，经口服后从肠道吸收，在体内代谢较快。除了抗菌作用外，米诺环素还被广泛用于临床治疗中的炎症控制和神经保护。最近的研究报道，米诺环素通过自噬或凋亡抑制肿瘤细胞生长，证明米诺环素及其衍生物具有抗癌特
性。但现有报道中，并没有关于米诺环素是否能抑制结直肠癌细胞侵袭和转移的报道，也没有关于米诺环素作用靶点的报道，关于米诺环素在抑制肿瘤细胞侵袭和转移的机制上，还有待进一步研究。

技术实现思路

[0006]本专利技术要解决的技术问题为：提供一种新型酪氨酸激酶抑制剂，该抑制剂能有效抑制肿瘤细胞侵袭和转移，为肿瘤的治疗提供一种新的思路。
[0007]本专利技术解决上述技术问题的技术方案为：提供一种米诺环素作为酪氨酸激酶抑制剂的新用途。
[0008]其中，上述新用途中，所述的米诺环素的结构如下所示：
[0009][0010]本专利技术还提供了一种米诺环素抑制癌细胞转移的新用途。
[0011]其中，所述的癌细胞为结直肠癌细胞、肝癌细胞、乳腺癌细胞、肺癌细胞、卵巢癌细胞或前列腺癌细胞中的至少一种。
[0012]其中，所述的癌细胞为结直肠癌细胞。
[0013]其中，所述的抑制癌细胞转移通过抑制酪氨酸激酶的活性来实现。
[0014]进一步的，本专利技术还提供了一种米诺环素在制备预防或治疗结直肠癌、肝癌、乳腺癌、肺癌、卵巢癌或前列腺癌的药物中的新用途。
[0015]本专利技术的有益效果为：
[0016]本专利技术首次发现米诺环素可以作为一种酪氨酸激酶抑制剂，与LYN相互作用并有效抑制LYN酶活性，米诺环素能有效抑制酪氨酸激酶磷酸化，可有效治疗受酪氨酸激酶调控并与所述酪氨酸激酶信号转导途径异常相关的疾病，包括结直肠癌、肝癌、乳腺癌、肺癌、卵巢癌、前列腺癌等。本专利技术为肿瘤细胞的侵袭转移提供了一种新的抑制方法，还开发了米诺环素在抗肿瘤中的新用途，为肿瘤的预防与治疗提供了一种新的方式。
附图说明
[0017]图1所示为实施例1中米诺环素与LYN亲和纯化的免疫印迹图；
[0018]图2所示为实施例1中米诺环素与人源重组LYN蛋白的亲和纯化的免疫印迹图；
[0019]图3所示为实施例1米诺环素与人重组LYN蛋白的离子体共振图；
[0020]图4所示为实施例2中米诺环素对LYN酶活性影响图；
[0021]图5所示为实施例3中米诺环素在体外对癌细胞迁移的影响图；
[0022]图6所示为实施例3中米诺环素在体外对癌细胞Transwell迁移和基质胶侵袭结果图；
[0023]图7所示为实施例4中米诺环素在体内对小鼠结直肠癌细胞的肺转移抑制结果。
具体实施方式
[0024]下面将通过实施例对本专利技术的具体实施方式做进一步的解释说明，但不表示将本专利技术的保护范围限制在实施例所述范围内。
[0025]实施例中所用到的各种试剂和原料均为普通市售产品。
[0026]实施例1米诺环素与LYN的相互作用研究
[0027]实验方法：
[0028]1、将偶联在Epoxy
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ActivedμSphere上的米诺环素与SW480和SW620细胞裂解液一起孵育，用抗LYN抗体进行免疫印迹。
[0029]2、利用基因工程技术制备人源重组LYN蛋白，将偶联在Epoxy
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ActivedμSphere上的米诺环素与人源重组LYN蛋白共孵育，SDS
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PAGE电泳检测米诺环素与人源重组LYN蛋白的结合情况。
[0030]3、将米诺环素与制备人源重组LYN蛋白进行等离子体共振分析(Biacore，GE)，检测米诺环素与LYN蛋白的亲和力。
[0031]实验结果如下：
[0032]1、与对照组相比，米诺环素组在5本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种米诺环素作为酪氨酸激酶抑制剂的新用途。2.根据权利要求1所述的米诺环素作为酪氨酸激酶抑制剂的新用途，其特征在于：所述的米诺环素的结构如下所示：3.一种米诺环素抑制癌细胞转移的新用途。4.根据权利要求3所述的米诺环素抑制癌细胞转移的新用途，其特征在于：所述癌细胞为结直肠癌细胞、肝癌细胞、乳腺癌细胞、肺癌细胞、卵巢癌细胞或前列腺癌细胞中的至少一种。5....

【专利技术属性】
技术研发人员：张涛，潘克俭，杨菁，兰景彬，杨铃，
申请(专利权)人：成都医学院，
类型：发明
国别省市：