一种基于高密度点阵的生物探针点样方法及工艺技术

本发明专利技术公开了一种基于高密度点阵的生物探针点样方法及工艺，具体包括以下步骤：配制样品，并将样品分配到孔板中，放置于样品台上；选取涂层基片，并将其按顺序放于基片台上；在非接触式喷沫装置的控制装置中输入喷沫指令，非接触式喷沫装置吸取孔板中的液体样品，然后移动至基片台上方；在基片上方80μm的位置进行非接触式喷沫，依据指令在基片上方进行移动，实现点阵布局形状指令；同一样本喷沫完成后，对非接触式喷沫装置进行清洗，重复喷沫任务，直到设定的基片全部完成点阵布局；点阵布局完成后，将所有基片进行干燥、封闭；最后对基片抽样荧光检测。本方法采用非接触式喷沫，有效提高了点样效率，极大程度避免试剂混染的问题，并大幅提高点样密度。

【技术实现步骤摘要】
一种基于高密度点阵的生物探针点样方法及工艺
本专利技术涉及生命科学
，具体涉及一种基于高密度点阵的生物探针点样方法及工艺。
技术介绍
生物芯片技术起源于核酸分子杂交。所谓生物芯片一般指高密度固定在互相支持介质上的生物信息分子(如基因片段、DNA片段或多肽、蛋白质、糖分子、组织等)的微阵列杂交型芯片(micro-arrays)，阵列中每个分子的序列及位置都是已知的，并且是预先设定好的序列点阵。生物芯片(biochip或bioarray)是根据生物分子间特异相互作用的原理，将生化分析过程集成于芯片表面，从而实现对DNA、RNA、多肽、蛋白质以及其他生物成分的高通量快速检测。现如今生物芯片在医学检验，生物科研领域都起到很重要的作用。生产工作中，理想的生物芯片应具有以下特点：1、芯片基片的荧光背景信号低；2、探针的特异性高，能够精准的标记靶基因的空间信息；3、探针与基片连接固定的稳定性高，在杂交、洗涤和后期处理过程中不易脱落。此外，将探针固定在基片的点样过程也对检测分析结果有一定的影响。传统的接触式点样过程不仅需要重复取样，浪费原料、降低效率，在对不同类型样品进行点样时还需要频繁的清洗点样头，也很难完全避免试剂混染的可能。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种基于高密度点阵的生物探针点样方法及工艺，以解决
技术介绍
中提到的问题。为实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：一种基于高密度点阵的生物探针点样方法及工艺，具体包括以下步骤：步骤1、根据需求将探针和样品溶于液体溶剂中，并将其分配到孔板中，并将孔板放置于样品台上；步骤2、根据需求选取不同的涂层基片，并将涂层基片按顺序依次放置于基片台上，按照编号方式对涂层基片位置进行编号；步骤3、在非接触式喷沫装置的控制装置中输入喷沫指令，所述喷沫指令包括：基片数，每次喷沫液滴数量，点间距，重复喷沫次数，点阵布局形状，点阵面积，喷沫模式；步骤4、非接触式喷沫装置获得特定指令，非接触式喷沫装置移动至样品台上，根据上样需求，吸取孔板中的液体样品，然后移动至基片台上方；步骤5、喷沫装置由龙门架上的移动结构带动，根据输入的点间距进行移动，移动至第一张基片位置，在基片上方80μm的位置进行非接触式喷沫，依据每次喷沫液滴数量指令，在同一位置进行喷沫任务，依据点间距指令和涂层基片位置的编号方式在基片上方进行移动，最终实现点阵布局形状指令；步骤6、同一样本喷沫完成后，非接触式喷沫装置移动至清洗装置，进行上一样品的清除，对非接触式喷沫装置的喷头进行清洁干燥工作，为吸取下一个样品做准备，清洗完成后，非接触式喷沫装置由移动装置带动，移动至样品台上，进行下一个样品的进样工作，为下一次样本的喷沫做准备；重复喷沫任务，直到设定的基片全部完成点阵布局后，一次基片生产工作即为完成；步骤7、点阵布局完成后，固定放置一段时间后，将所有基片在超净真空环境下干燥、封闭，在封闭过程中，在60-65℃环境下使用BSA或酪蛋白抑制基片与样品的非特异性结合；步骤8、将干燥完成的基片转移至清洗装置中进行封闭和清洗工作，使用含有表面活性剂的洗涤缓冲液去除基片未杂交固定上的探针；步骤9、将经过清洗完成的基片进行抽样荧光检测，通过基片扫描仪验证基片的可用性。优选地，所述步骤3中的非接触式喷沫装置包括压电陶瓷喷头和频闪监控相机，非接触式喷沫装置的每个喷沫模块共8条通道，压电陶瓷喷头主要材质是锆钛酸铅压电陶瓷(PZT)并与喷沫模块的通道连通，频闪监控相机可对液滴喷沫的速度，液滴的数量，点阵的大小，点阵间距进行实时监控，并反馈给控制装置。优选地，所述步骤2中的涂层基片包括环氧硅烷涂层基片和N-羟基丁二酰亚胺酯涂层基片。优选的，所述步骤1中的液体溶剂为printbuffer，所述printbuffer的选用原则为滴的最佳微流体性质和样品与基片生化耦合的效率。优选地，所述基片数为指一次生产过程中，基片台上需要布局点阵的基片数量；每次喷沫液滴数量为同位置情况下，单喷头通道喷出的液滴体积及数量；点间距包括点间距(X)和点间距(Y)，分别代表液滴点在基片上的X间距和液滴点在基片上的Y间距；重复喷沫次数为同一样品的喷沫次数；点阵布局形状为基片上点阵分布形状；点阵面积为点阵布局的边长度参数；喷沫模式为单通道模式是指1条喷沫通道完成整个指令；多通道模式是指8条通道同时喷沫。优选地，所述步骤2中的涂层基片编号方式为沿X轴方向为数字编号，Y轴方向为字母编号。本专利技术的技术效果和优点：本方法采用非接触式喷沫技术，克服了接触式喷沫过程针头与基片的接触，喷头在工作时上升下降过程对点阵的干扰，降低了错误率；非接触式喷沫有效提高了点样效率，极大程度避免试剂混染的问题，并大幅提高点样密度。附图说明图1为本专利技术的实施例1中的编号方式示意图；图2为本专利技术的实施例2中的基片点样示意图；图3为本专利技术的实施例2中的高密度点阵生物基片的荧光检测图。具体实施方式为了使本专利技术的实现技术手段、创作特征、达成目的与功效易于明白了解，下面结合具体图示，进一步阐述本专利技术，在本专利技术的描述中，需要说明的是，除非另有明确的规定和限定，术语“安装”、“连”、“连接”应做广义理解，例如，可以是固定连接，也可以是可拆卸连接，或一体地连接或是机械连接，也可以是电连接；可以是直接相连，也可以通过中间媒介间接相连，可以两个元件内部的连通。实施例1一种基于高密度点阵的生物探针点样方法及工艺，具体包括以下步骤：步骤1、根据液体溶剂的滴的最佳微流体性质和样品与基片生化耦合的效率，选择合适浓度的printbuffer，并将探针和样品溶于液体溶剂中，并将其分配到96孔板(384孔板)中，并将孔板放置于样品台上；步骤2、根据涂层基片对样品与基片的链接牢固性，链接效率，和边际扩散范围，结合实际生产需求选取环氧硅烷涂层基片或N-羟基丁二酰亚胺酯涂层基片，并将涂层基片按顺序依次放置于基片台上，按照编号方式对涂层基片位置进行编号，具体的编号方式如图1所示，沿X轴方向进行数字编号，Y轴方向为字母编号，生产过程非接触式喷沫装置起始行为A行，会沿1到10横线移动喷沫，当完成同样品第一排的喷沫后，喷沫装置沿Y轴移动至B行从10-1进行喷沫；步骤3、在非接触式喷沫装置的控制装置中输入喷沫指令，所述非接触式喷沫装置包括压电陶瓷喷头和频闪监控相机，非接触式喷沫装置的每个喷沫模块共8条通道，压电陶瓷喷头主要材质是锆钛酸铅压电陶瓷(PZT)，频闪监控相机可对液滴喷沫的速度，液滴的数量，点阵的大小，点阵间距进行实时监控，并反馈给控制装置；所述喷沫指令包括：基片数，每次喷沫液滴数量，点间距，重复喷沫次数，点阵布局形状，点阵面积，喷沫模式；其中，基片数为指一次生产过程中，基片台上需要布局点阵的基片数量；每次喷沫液滴数量为同位置情况下，单喷头通道喷出的液滴体积及数量；点间距包括点间距(X)和点间距(Y)，分别代表液滴点在基片上的X间距和液本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种基于高密度点阵的生物探针点样方法及工艺，其特征在于：具体包括以下步骤，/n步骤1、根据需求将探针和样品溶于液体溶剂中，并将其分配到孔板中，并将孔板放置于样品台上；/n步骤2、根据需求选取不同的涂层基片，并将涂层基片按顺序依次放置于基片台上，按照编号方式对涂层基片位置进行编号；/n步骤3、在非接触式喷沫装置的控制装置中输入喷沫指令，所述喷沫指令包括：基片数，每次喷沫液滴数量，点间距，重复喷沫次数，点阵布局形状，点阵面积，喷沫模式；/n步骤4、非接触式喷沫装置获得特定指令，非接触式喷沫装置移动至样品台上，根据上样需求，吸取孔板中的液体样品，然后移动至基片台上方；/n步骤5、喷沫装置由龙门架上的移动结构带动，根据输入的点间距进行移动，移动至第一张基片位置，在基片上方80μm的位置进行非接触式喷沫，依据每次喷沫液滴数量指令，在同一位置进行喷沫任务，依据点间距指令和涂层基片位置的编号方式在基片上方进行移动，最终实现点阵布局形状指令；/n步骤6、同一样本喷沫完成后，非接触式喷沫装置移动至清洗装置，进行上一样品的清除，对非接触式喷沫装置的喷头进行清洁干燥工作，为吸取下一个样品做准备，清洗完成后，非接触式喷沫装置由移动装置带动，移动至样品台上，进行下一个样品的进样工作，为下一次样本的喷沫做准备；重复喷沫任务，直到设定的基片全部完成点阵布局后，一次基片生产工作即为完成；/n步骤7、点阵布局完成后，固定放置一段时间后，将所有基片在超净真空环境下干燥、封闭，在封闭过程中，在60-65℃环境下使用BSA或酪蛋白抑制基片与样品的非特异性结合；/n步骤8、将干燥完成的基片转移至清洗装置中进行封闭和清洗工作，使用含有表面活性剂的洗涤缓冲液去除基片未杂交固定上的探针；/n步骤9、将经过清洗完成的基片进行抽样荧光检测，通过基片扫描仪验证基片的可用性。/n...

【技术特征摘要】
1.一种基于高密度点阵的生物探针点样方法及工艺，其特征在于：具体包括以下步骤，
步骤1、根据需求将探针和样品溶于液体溶剂中，并将其分配到孔板中，并将孔板放置于样品台上；
步骤2、根据需求选取不同的涂层基片，并将涂层基片按顺序依次放置于基片台上，按照编号方式对涂层基片位置进行编号；
步骤3、在非接触式喷沫装置的控制装置中输入喷沫指令，所述喷沫指令包括：基片数，每次喷沫液滴数量，点间距，重复喷沫次数，点阵布局形状，点阵面积，喷沫模式；
步骤4、非接触式喷沫装置获得特定指令，非接触式喷沫装置移动至样品台上，根据上样需求，吸取孔板中的液体样品，然后移动至基片台上方；
步骤5、喷沫装置由龙门架上的移动结构带动，根据输入的点间距进行移动，移动至第一张基片位置，在基片上方80μm的位置进行非接触式喷沫，依据每次喷沫液滴数量指令，在同一位置进行喷沫任务，依据点间距指令和涂层基片位置的编号方式在基片上方进行移动，最终实现点阵布局形状指令；
步骤6、同一样本喷沫完成后，非接触式喷沫装置移动至清洗装置，进行上一样品的清除，对非接触式喷沫装置的喷头进行清洁干燥工作，为吸取下一个样品做准备，清洗完成后，非接触式喷沫装置由移动装置带动，移动至样品台上，进行下一个样品的进样工作，为下一次样本的喷沫做准备；重复喷沫任务，直到设定的基片全部完成点阵布局后，一次基片生产工作即为完成；
步骤7、点阵布局完成后，固定放置一段时间后，将所有基片在超净真空环境下干燥、封闭，在封闭过程中，在60-65℃环境下使用BSA或酪蛋白抑制基片与样品的非特异性结合；
步骤8、将干燥完成的基片转移至清洗装置中进行封闭和清洗工作，使用含有表面活性剂的洗涤缓冲液去除基片未杂交固定上的探针；
步骤9、将经过清洗完成...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈岱，王超，刘志刚，
申请(专利权)人：江西烈冰生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江西;36