抗LAG3抗体和抗PD-1抗体的共制剂制造技术

本发明专利技术提供了抗PD‑1抗体和抗LAG3抗体的共制剂，及其在治疗各种病症中的用途。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】抗LAG3抗体和抗PD-1抗体的共制剂专利
本专利技术总体涉及治疗性抗体的制剂，及其在治疗各种病症中的用途。专利技术背景抗体的恒定结构域的氨基酸序列或其可变结构域内的框架序列可能略有不同，但是通常，它们的CDR序列差异最显著。甚至结合相同蛋白、相同多肽或甚至潜在相同表位的抗体可包含完全不同的CDR序列。用于人类中的治疗性抗体也可从人种系抗体序列或非人(例如啮齿动物)种系抗体序列获得，例如在人源化抗体中，导致潜在序列的又进一步多样性。这些序列差异可能导致溶液中潜在不同的稳定性和对溶液参数不同的响应性。此外，氨基酸排列的小变化或一个或几个氨基酸残基的变化可导致显著不同的抗体稳定性和对序列特异性降解途径的敏感性。因此，目前不可能预测优化抗体稳定性所必需的溶液条件。必须单独研究每种抗体以确定最佳溶液制剂。Bhambhani等人(2012)J.Pharm.Sci.101:1120。抗体也是相当大的蛋白(~150,000Da)，例如与其他治疗性蛋白如激素和细胞因子相比。抗体药物在储存期间必须是稳定的，以确保功效和一致的给药，因此关键的是，无论选择什么制剂都支持期望的特性，例如高浓度、澄清度和可接受的粘度，并且还在典型储存条件下在可接受的长保存期内保持这些特性和药物功效。LAG3(CD223)是在活化的T细胞(Huard等人，Immunogenetics39:213–217,1994)、NK细胞(Triebel等人，JExpMed171:1393–1405,1990)、B细胞(Kisielow等人，EurJImmunol35:2081–2088,2005)和浆细胞样树突细胞(Workman等人，JImmunol182:1885–1891,2009)上表达的细胞表面分子，其在这些淋巴细胞亚群的功能中发挥重要作用。此外，认为LAG3和其主要配体II类MHC之间的相互相用在调节树突状细胞功能中发挥作用(Andreae等人JImmunol168:3874–3880,2002)。近期的临床前研究已记载了LAG-3在CD8T细胞耗竭中的作用(Blackburn等人NatImmunol10:29–37,2009)。如同慢性病毒感染，肿瘤抗原特异性CD4+和CD8+T细胞展现受损的效应子功能和耗竭的表型，其特征在于促炎细胞因子的产生减少和对抗原再刺激的低应答性。这由细胞外源性机制(例如调节T细胞(Treg))和细胞内源性机制(例如在耗竭的肿瘤浸润性淋巴细胞(TIL)上上调的抑制性分子)介导。这些抑制性机制代表了对有效抗肿瘤免疫的强大的障碍。LAG3在耐受的TIL上表达，表明其促成肿瘤介导的免疫抑制。LAG3的抑制可以导致抗原特异性T细胞的活化增强，由此可以获得治疗益处。PD-1被视为在免疫调节以及在外周耐受性的维持中的重要分子。PD-1在初始T、B和NKT细胞上适度表达，并通过淋巴细胞、单核细胞和髓系细胞上的T/B细胞受体信号传导上调。PD-1、PD-L1(B7-H1)和PD-L2(B7-DC)的两种已知配体在起源于不同组织的人癌症中表达。在例如卵巢癌、肾癌、结直肠癌、胰腺癌、肝癌和黑色素瘤的大样品集合中，显示了PD-L1表达与不良预后和降低的总存活率相关，不论后续治疗如何。类似地，发现在肿瘤浸润性淋巴细胞上的PD-1表达标志了乳腺癌和黑色素瘤中的功能障碍性T细胞并与肾癌中的不良预后有关。因而，已经提出，表达PD-L1的肿瘤细胞与表达PD-1的T细胞相互作用以减弱T细胞活化和免疫监视的逃避，由此导致针对肿瘤的受损的免疫应答。几种抑制PD-1及其配体PD-L1和PD-L2中的一个或两个之间的相互作用的单克隆抗体被FDA批准用于治疗癌症。已经提出，如果与其他经批准的或实验中的癌症疗法(例如，辐射、外科手术、化学治疗剂、靶向疗法、抑制在肿瘤中失调的其他信号传导途径的药剂和其他免疫增强剂)联合施用，可能增强此类抗体的功效。因此，存在对于抗LAG3抗体和抗PD-1抗体的稳定共制剂的需要。此类稳定制剂优选在典型用于储存自我施用的药物的条件下，即在注射器中的冷藏温度下，将表现出超过数月至数年的稳定性，导致相应药物产物的长保存期。专利技术概述本专利技术提供了抗LAG3抗体或其抗原结合片段和抗PD-1抗体或其抗原结合片段的共制剂。在一个实施方案中，所述制剂包含：约16-22mg/mL的抗LAG3抗体或其抗原结合片段；约3-7mg/mL的抗PD-1抗体或其抗原结合片段；约30-120mg/mL的非还原性二糖；约0.02-2.0mg/mL聚山梨酯80或聚山梨酯20；pH为约4.5-6.5的缓冲剂；和约40-150mML-精氨酸或其药学上可接受的盐，其中所述抗LAG3抗体或其抗原结合片段包含可变轻链区和可变重链区，所述可变轻链区包含SEQIDNO:39的CDRL1、SEQIDNO:40的CDRL2和SEQIDNO:41的CDRL3，且所述可变重链区包含SEQIDNO:42的CDRH1、SEQIDNO:59的CDRH2和SEQIDNO:44的CDRH3，且所述抗PD-1抗体或其抗原结合片段包含可变轻链区和可变重链区，所述可变轻链区包含SEQIDNO:1的CDRL1、SEQIDNO:2的CDRL2和SEQIDNO:3的CDRL3，且所述可变重链区包含SEQIDNO:6的CDRH1、SEQIDNO:7的CDRH2和SEQIDNO:8的CDRH3。在一个实施方案中，所述制剂进一步包含约5-15或约5-10mML-甲硫氨酸。令人惊讶地，所述抗LAG3/抗PD-1共制剂显示比单独抗体制剂更好的稳定性。所述制剂可以被冻干用于重构或呈液体形式。在本专利技术的另一个方面，所述制剂包含：摩尔比为4:1至5:1(抗LAG3抗体与抗PD-1抗体，或其抗原结合片段)的约3-300mg/mL的抗LAG3抗体或其抗原结合片段和约3-300mg/mL的抗PD-1抗体或其抗原结合片段，总赋形剂浓度为约10-1000mM的一种或多种选自组氨酸、天冬氨酸、谷氨酰胺、甘氨酸、脯氨酸、甲硫氨酸、精氨酸或其药学上可接受的盐、NaCl、KCl、LiCl、CaCl2、MgCl2、ZnCl2和FeCl2的赋形剂，以及pH为约5-8的缓冲剂。本专利技术还提供了治疗癌症或感染的方法，其包括向有此需要的受试者施用重构的或液体的制剂(溶液制剂)。在进一步实施方案中，所述制剂用于治疗慢性感染中。还考虑溶液或冻干制剂在制备用于治疗癌症或感染的药物中的用途。附图简述图1：Ab6A药物产品在5℃、25℃和40℃储存条件下通过HP-IEX稳定性数据的Ab6酸性变体。图2：Ab6A药物产品在5℃、25℃和40℃储存条件下通过HP-IEX稳定性数据的Ab6主要种类。图3：Ab6A药物产品在5℃、25℃和40℃储存条件下通过HP-IEX稳定性数据的Ab6碱性变体。图4：Ab6A药物产品在5℃、25℃和40℃储存条件下通过HP-IEX稳定性数据的MK-3475酸性变体。图5：Ab6A药物产品在5℃、25℃和40℃储存条件下通过HP-IEX稳定性数本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.制剂，其包含：16-22 mg/mL的抗LAG3抗体或其抗原结合片段；3-7 mg/mL的抗PD-1抗体或其抗原结合片段；约30-120 mg/mL的非还原性二糖；约0.02-2.0 mg/mL聚山梨酯80或聚山梨酯20；pH为约4.5-6.5的缓冲剂；和约40-150 mM L-精氨酸或其药学上可接受的盐，其中所述抗LAG3抗体或其抗原结合片段包含可变轻链区和可变重链区，所述可变轻链区包含SEQ ID NO:39的CDRL1、SEQ ID NO:40的CDRL2和SEQ ID NO:41的CDRL3，且所述可变重链区包含SEQ ID NO:42的CDRH1、SEQ ID NO:59的CDRH2和SEQ ID NO:44的CDRH3，且所述抗PD-1抗体或其抗原结合片段包含可变轻链区和可变重链区，所述可变轻链区包含SEQ IDNO:1的CDRL1、SEQ ID NO:2的CDRL2和SEQ ID NO:3的CDRL3，且所述可变重链区包含SEQ IDNO:6的CDRH1、SEQ ID NO:7的CDRH2和SEQ ID NO:8的CDRH3。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20181107 US 62/7566781.制剂，其包含：16-22mg/mL的抗LAG3抗体或其抗原结合片段；3-7mg/mL的抗PD-1抗体或其抗原结合片段；约30-120mg/mL的非还原性二糖；约0.02-2.0mg/mL聚山梨酯80或聚山梨酯20；pH为约4.5-6.5的缓冲剂；和约40-150mML-精氨酸或其药学上可接受的盐，其中所述抗LAG3抗体或其抗原结合片段包含可变轻链区和可变重链区，所述可变轻链区包含SEQIDNO:39的CDRL1、SEQIDNO:40的CDRL2和SEQIDNO:41的CDRL3，且所述可变重链区包含SEQIDNO:42的CDRH1、SEQIDNO:59的CDRH2和SEQIDNO:44的CDRH3，且所述抗PD-1抗体或其抗原结合片段包含可变轻链区和可变重链区，所述可变轻链区包含SEQIDNO:1的CDRL1、SEQIDNO:2的CDRL2和SEQIDNO:3的CDRL3，且所述可变重链区包含SEQIDNO:6的CDRH1、SEQIDNO:7的CDRH2和SEQIDNO:8的CDRH3。


2.权利要求1的制剂，其包含：18-22mg/mL的抗LAG3抗体；4-7mg/mL的抗PD-1抗体；约50-90mg/mL蔗糖或海藻糖；约0.05-1.0mg/mL聚山梨酯80或聚山梨酯20；约3-30mM的pH为约5.0-6.5的组氨酸缓冲剂；和约40-100mML-精氨酸或其药学上可接受的盐。


3.权利要求1的制剂，其包含：18-20mg/mL的抗LAG3抗体；4-7mg/mL的抗PD-1抗体；约50-60mg/mL蔗糖或海藻糖；约0.05-1.0mg/mL聚山梨酯80或聚山梨酯20；约8-12mM的pH为约5.0-6.5的组氨酸缓冲剂；和约40-70mML-精氨酸或其药学上可接受的盐。


4.权利要求1至3中任一项的制剂，其进一步包含约5-15mML-甲硫氨酸。


5.权利要求1至3中任一项的制剂，其进一步包含约5-10mML-甲硫氨酸。


6.权利要求1的制剂，其包含：约18.75mg/mL的抗LAG3抗体；约6.25mg/mL的抗PD-1抗体；约55mg/mL蔗糖；约0.2mg/mL聚山梨酯80；约10mM的pH为约5.8的组氨酸缓冲剂；和约52.5mML-精氨酸或其药学上可接受的盐；且进一步包含约7.5mML-甲硫氨酸。


7.权利要求1的制剂，其包含：约20mg/mL的抗LAG3抗体；约5mg/mL的抗PD-1抗体；约54mg/mL蔗糖；约0.2mg/mL聚山梨酯80；约10mM的pH为约5.8的组氨酸缓冲剂；和约56mML-精氨酸或其药学上可接受的盐；且进一步包含约8mML-甲硫氨酸。


8.权利要求1的制剂，其包含：约20.83mg/mL的抗LAG3抗体；约4.17mg/mL的抗PD-1抗体；约53mg/mL蔗糖；约0.2mg/mL聚山梨酯80；约10mM的pH为约5.8的组氨酸缓冲剂；和约58.3mML-精氨酸或其药学上可接受的盐；且进一步包含约8.3mML-甲硫氨酸。


9.权利要求1的制剂，其包含：约18.02mg/mL的抗LAG3抗体；约4.505mg/mL的抗PD-1抗体；约50mg/mL蔗糖；约0.2mg/mL聚山梨酯80；约10mM的pH为约5.8的组氨酸缓冲剂；和约70mML-精氨酸或其药学上可接受的盐；和进一步包含约10mML-甲硫氨酸。


10.制剂，其包含：约3-300mg/mL的抗LAG3抗体或其抗原结合片段和约3-300mg/mL的抗PD-1抗体或其抗原结合片段，其中抗LAG3抗体与抗PD-1抗体或其抗原结合片段的摩尔比为4:1，总赋形剂浓度为约25-250mM的一种或多种选自组氨酸、天冬氨酸、谷氨酰胺、甘氨酸、脯氨酸、甲硫氨酸、精氨酸或其药学上可接受的盐、NaCl和KCl的赋形剂，以及pH为约4.5-8的缓冲剂，其中所述抗LAG3抗体或其抗原结合片段包含可变轻链区和可变重链区，所述可变轻链区包含SEQIDNO:39的CDRL1、SEQIDNO:40的CDRL2和SEQIDNO:41的CDRL3，且所述可变重链区包含SEQIDNO:42的CDRH1、SEQIDNO:59的CDRH2和SEQIDNO:44的CDRH3，且所述抗PD-1抗体或其抗原结合片段包含可变轻链区和可变重链区，所述可变轻链区包含SEQIDNO:1的CDRL1、SEQIDNO:2的CDRL2和SEQIDNO:3的CDRL3，且所述可变重链区包含SEQIDNO:6的CDRH1、SEQIDNO:7的CDRH2和SEQIDNO:8的CDRH3。


11.权利要求10的制剂，其包含：约10-200mg/mL的抗LAG3抗体或其抗原结合片段，和约4-200mg/ml的抗PD-1抗体或其抗原结合片段，总赋形剂浓度为约25-250mM的一种或多种选自组氨酸、天冬氨酸、谷氨酰胺、甘氨酸、脯氨酸、甲硫氨酸、精氨酸或其药学上可接受的盐和NaCl的赋形剂，以及pH为约5-8的缓冲剂。


12.权利要求10的制剂，其中所述赋形剂是浓度为约25-250mM的L-精氨酸或其药学上可接受的盐。


13.权利要求10的制剂，其中所述赋形剂是浓度为约40-100mM的L-精氨酸或其药学上可接受的盐。


14.权利要求10的制剂，其中所述赋形剂是总赋形剂浓度为约25-250mM的NaCl和L-精氨酸或其药学上可接受的盐。


15.权利要求14的制剂，其中NaCl与L-精氨酸的浓度比为1:1。


16.权利要求15的制剂，其中NaCl浓度为约35mM，且L-精氨酸浓度为约35mM。


17.权利要求15的制剂，其中NaCl浓度为约50mM，且L-精氨酸浓度为约50mM。


18.权利要求10的制剂，其中所述赋形剂是约40-150mM的NaCl。


19.权利要求10的制...

【专利技术属性】
技术研发人员：V·安托楚舒克，P·G·德赛，Y·克里希纳马查里，S·S·桑加尼，
申请(专利权)人：默沙东公司，
类型：发明
国别省市：美国;US