一种隐丹参酮衍生物及其制备方法与在抗心肌纤维化中的应用技术

本发明专利技术公开了一种隐丹参酮衍生物及其制备方法与在抗心肌纤维化中的应用，新的隐丹参酮衍生物结构式为

【技术实现步骤摘要】
一种隐丹参酮衍生物及其制备方法与在抗心肌纤维化中的应用
本专利技术涉及一种新化合物及其制备方法和应用，特别涉及一种隐丹参酮衍生物及其制备方法与在抗心肌纤维化中的应用。
技术介绍
中药丹参具有显著的活血化瘀，通心包络的功效，以多种形式应用于临床，如注射液、滴丸、片剂等。其主要药效成分为水溶性的丹酚酸和脂溶性的丹参酮类化合物。在丹参酮类化合物中，丹参酮ⅡA已被开发为治疗心绞痛、冠心病和心肌梗死的药物。心肌纤维化一般是由冠状动脉粥样硬化引起的常见病理后果，特征是心肌组织中细胞外基质蛋白的过度合成和病理积累，导致心肌僵硬并导致舒张性心力衰竭。心肌纤维化很可能是由于心脏成纤维细胞的不适当增殖导致的心脏瓣膜异常增厚，但更常见的是指心肌中细胞外基质的过渡沉积。心肌成纤维细胞约占心脏细胞总数的60％～70％，是分泌产生细胞外基质(Extracellularmatrix，ECM)的主要来源，在心肌纤维化的发生发展过程中发挥至关重要的作用。心肌成纤维细胞的过度增殖和ECM合成增加是导致心肌纤维化的主要原因。心肌纤维化分子机制非常复杂，涉及多种细胞因子(如生长因子、炎性因子、内皮衍生因子)、氧化应激及肾素-血管紧张素-醛固酮系统(Renin-Angiotensin-AldosteroneSystem，RAAS)的参与。而其中TGF-β/Smad信号通路是心肌纤维化进程中至关重要的通路，研究表明抑制TGF-β/Smad信号通路能够高效的对抗心肌纤维化。因此，针对这个信号通路抑制剂的研究，有望成为抗心肌纤维化药物研究的新的突破口。其他药物则主要通过改善高血压、心肌肥大、肺动脉高压等具体适应症来缓解心肌纤维化的进程，作用效果和机制仍需进一步研究。因此，开发高效低毒的抗心肌纤维化新药具有重要的现实意义。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种新的隐丹参酮衍生物及其制备方法与在抗心肌纤维化中的应用。本专利技术所采取的技术方案是：本专利技术的第一个方面，提供：一种隐丹参酮衍生物，其结构式如式Ⅰ所示：本专利技术的第二个方面，提供：本专利技术第一个方面所述隐丹参酮衍生物在制备抗心肌纤维化药物中的应用。本专利技术的第三个方面，提供：本专利技术第一个方面所述隐丹参酮衍生物在制备备治疗心肌相关疾病药物中的应用，所述心肌相关疾病选自心绞痛、冠心病或心肌梗死。本专利技术的第四个方面，提供：一种组合物，添加有本专利技术第一个方面所述隐丹参酮衍生物。在一些实例中，所述组合物还添加有可接受的药用辅料。在一些实例中，所述组合物为口服制剂、注射剂、透皮吸收剂。本专利技术的第五个方面，提供：本专利技术第一个方面所述隐丹参酮衍生物的制备方法，包括如下步骤：S1)将隐丹参酮溶解于有机溶剂中，加入氯化亚砜，20～40℃下搅拌反应，得反应液；S2)将反应液中的溶剂去除，使用正向硅胶柱色谱分离，以硅胶为固定相；5％的二氯甲烷-石油醚混合溶剂为流动相，纯化得到目的隐丹参酮衍生物。在一些实例中，所述有机溶剂选自二氯甲烷。在一些实例中，所述氯化亚砜的用量为隐丹参酮摩尔量的3～8倍，优选为5倍。在一些实例中，搅拌反应的时间不低于16小时。本专利技术的有益效果是：本专利技术的隐丹参酮衍生物，通过抗心肌纤维化实验结果显示具有较好的抗心肌纤维化活性，有望开发为新型的抗心肌纤维化药物。结构分析其具有更好的水溶性，具有更好的成药性。本专利技术的隐丹参酮衍生物，易于制备。附图说明图1和图2分别是式Ⅰ化合物的核磁共振氢谱、碳谱和DEPT135谱图。图3是式Ⅰ化合物对TGFβ1诱导的FN,α-SMA和CollagenⅠ和Ⅲ的抑制作用。具体实施方式本专利技术得到了项目名称为“炎症相关性重大疾病创新药物研发及关键技术”(编号2017BT01Y093)的资助。下面结合实验，进一步说明本专利技术的技术方案。隐丹参酮衍生物(式Ⅰ化合物)的制备与分离：将隐丹参酮溶于二氯甲烷中，加入5倍当量的氯化亚砜，于室温下搅拌反应24小时，得所示化合物。将所得的反应液于旋转蒸发仪中旋干，后使用正向硅胶柱色谱分离，以300～400目硅胶为固定相；5％的二氯甲烷-石油醚混合溶剂为流动相，即可获得式Ⅰ化合物隐丹参酮衍生物(式Ⅰ化合物)结构确证数据：1HNMR(CDCl3,400MHz)δ7.95(1H,d,J＝8.25Hz,H-9),7.75(1H,d,J＝8.25Hz,H-10),4.13(1H,dd,J＝8.89,9.97Hz,H-16),3.81(1H,m,H-16),3.76(1H,m,H-15),3.24(2H,t,J＝6.38Hz,H-1),1.82(2H,m,H-2),1.68(2H,m,H-3),1.41(3H,d,J＝6.85Hz,H-17),1.32(6H,s,H-18,19).核磁共振氢谱谱图如图1所示。13CNMR(CDCl3,400MHz)δ182.8(C,C-11),179.2(C,C-12),154.2(C,C-14),146.0(C,C-13),145.2(C,C-5),141.0(C,C-6),132.7(CH,C-10),131.4(C,C-8),128.8(C,C-7),125.0(CH,C-9),46.6(CH2,C-16),39.5(CH,C-15),37.4(CH2,C-1),35.1(C,C-4),31.8(CH3×2,C-18,19),30.0(CH2,C-3),19.2(CH2,C-2),16.4(CH3,C-17).是式Ⅰ化合物的核磁共振碳谱和DEPT135谱图如图2所示。HRMS(ESI)m/z:[M+H]+CalcdforC19H20Cl2O2351.2670；Found351.2651.式Ⅰ化合物对TGFβ1诱导的FN,α-SMA和CollagenⅠ和Ⅲ的抑制作用：用浓度10、5、2.5μM的式Ⅰ化合物预处理心脏成纤维细胞1小时，然后用10ng/mLTGFβ1刺激12小时；细胞经过处理后，采集样本并提取蛋白：将细胞用冰PBS冲洗3次，加入蛋白裂解缓冲液中(含蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂)裂解15min；用细胞刮将细胞碎片刮下，收集到EP管中，超声破碎细胞后12000rpm，4℃，离心15min，收集上清为总蛋白，储存于–80℃。应用BCA法蛋白定量，计算样本中的蛋白浓度。然后应用Westernblotting检测FN，α-SMA、CollagenⅠ和Ⅲ的表达量：制备10％SDS-PAGE分离胶，待凝固后，加入5％浓缩胶，使分离胶和浓缩胶的高度比为3:2，插入齿梳；将蛋白样品用4×上样缓冲液稀释后，沸水煮5分钟，冷却后，每孔80μg蛋白量上样，80V，25min浓缩胶，160V分离胶，等待检测蛋白(根据Marker)分离充分后，停止电泳；之后，应用Tris-HCL和谷氨酸配制转膜液，按本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种隐丹参酮衍生物，其结构式如式Ⅰ所示：/n

【技术特征摘要】
1.一种隐丹参酮衍生物，其结构式如式Ⅰ所示：





2.权利要求1所述的隐丹参酮衍生物在制备抗心肌纤维化药物中的应用。


3.权利要求1所述的隐丹参酮衍生物在制备治疗心肌相关疾病药物中的应用，所述心肌相关疾病选自心绞痛、冠心病或心肌梗死。


4.一种组合物，其特征在于：其添加有权利要求1所述的隐丹参酮衍生物。


5.根据权利要求4所述的组合物，其特征在于：所述组合物还添加有可接受的药用辅料。


6.根据权利要求4或5所述的组合物，其特征在于：所述组合物为口服制剂、注射剂、透皮吸收剂。

【专利技术属性】
技术研发人员：刘培庆，尹胜，潘文杰，罗思远，
申请(专利权)人：广州中大南沙科技创新产业园有限公司，中山大学，
类型：发明
国别省市：广东;44