一种响应面法优化石榴花中ɑ-葡萄糖苷酶抑制剂的提取方法技术

本发明专利技术公开了一种响应面法优化石榴花中ɑ‑葡萄糖苷酶抑制剂的提取方法，该方法以石榴花为原材料，首先采用单因素实验考察了溶剂比例，料液比，超声时间，超声温度对石榴花中ɑ‑葡萄糖苷酶抑制剂的影响；并根据单因素实验结果进行响应面优化处理得到石榴花提取液，再将提取液浓缩干燥，得到α‑葡萄糖苷酶抑制剂。本发明专利技术工艺简单，安全可靠，对石榴花治疗糖尿病的开发利用提供了理论基础和实验依据。

【技术实现步骤摘要】
一种响应面法优化石榴花中ɑ-葡萄糖苷酶抑制剂的提取方法
本专利技术为天然产物提取
，涉及一种响应面法优化石榴花中ɑ-葡萄糖苷酶抑制剂的提取方法。
技术介绍
α-葡萄糖苷酶(α-glucosidase)，又称葡萄糖基转移酶，是一类能够从含有α-葡萄糖苷键底物的非还原端催化水解α-葡萄糖基的酶,分布在小肠上皮绒毛膜刷状沿上,可通过水解作用将α-葡萄糖苷、寡糖和葡聚糖的非还原性末端α-1,4糖苷键切开，释放出葡萄糖，导致血糖水平增加，从而引发糖尿病或糖尿病并发症。因此，口服α-葡萄糖苷酶抑制剂，可使葡萄糖的生成及吸收减缓，降低餐后血糖峰值，维持血糖处于动态平衡水平。目前，常用的α-葡萄糖苷酶抑制剂主要是阿卡波糖、伏格列波糖和米格列醇等西药，但都有价格昂贵，吸收慢，毒性大等不良反应。因此寻找安全、有效的植物类药物具有重大意义，如何快速、有效的从植物中获得安全可靠的α-葡萄糖苷酶抑制剂成为当今社会的研究热点。如专利文献CN109010456A公开了一种从覆盆子中提取α-葡萄糖苷酶抑制剂的方法，该专利技术以覆盆子果实为原料，用体积比为40％的乙醇水超声提取或震荡浸提，超声提取条件为料液比为1：10g/mL在30℃下提取30min(超声功率为300W)；震荡浸提则于24℃、常压条件下，用磁力搅拌器提取24h，其他条件与超声提取一致，获得提取液，将提取液真空浓缩后得到浸膏。接着，将得到的浸膏按1g/mL的比例分散于蒸馏水中，离心取上清液；将上清液用XAD-16大孔树脂吸附，并依次用0％，10％，40％，60％，80％比例的乙醇水洗脱，收集α-葡萄糖苷酶抑制活性最好的流分，即40％的乙醇洗脱剂。但该专利只考察了不同的溶剂比例和提取方法对α-葡萄糖苷酶抑制剂的影响，并无考察料液比、温度和时间的影响，致使α-葡萄糖苷酶抑制剂的得率未达到最优级。且后续的大孔树脂的色谱柱处理既耗时又损失了大量乙醇溶剂。乙醇是常用的提取溶剂，但是乙醇价格较高并且回收不便，在应用上存在着诸多不足。多酚类化合物，是一种重要的植物次生代谢产物，含有一个或多个酚羟基。自然界中天然酚类化合物的结构复杂多样，按结构大致可分为黄酮、芪、酚酸和木酚素。多酚类化合物在自然界分布广泛，具有抗氧化，清除自由基，抗炎，抗癌、抗菌，调节血糖等药理作用。石榴花是石榴科(Punicaceae)石榴属(Punica)植物石榴(PunicagranatumL.)花后期不能正常结果而自然脱落的干燥花瓣。原产于伊朗、阿富汗、格鲁吉亚、印度等中亚地区(古代波斯地区)，后经佛教、航海等途径向东传入中国，向西传入欧洲各国。石榴花化学成分丰富，具有较好的药用活性，被收载于《卫生部药品标准·维吾尔药分册》(1999年版)和《中华本草·维吾尔药卷》(2005年版)，用于治疗消痰、止血、消炎，反胃、退翳和神经衰弱，在我国中药、维药等药用历史中扮演重要角色。目前已有大量研究报道，石榴花提取物中含有丰富的多酚类资源，是石榴花中抑制α-葡萄糖苷酶活性的重要化合物。因此，如何有效利用响应面法优化石榴花中α-葡萄糖苷酶抑制剂的提取法是本专利技术需要解决的问题。
技术实现思路
本专利技术的目的在于，提供一种响应面法优化石榴花中ɑ-葡萄糖苷酶抑制剂的提取方法，该方法以石榴花为原料，采用超声辅助提取法，在单因素试验基础上采用响应面法进行优化，获得石榴花中α-葡萄糖苷酶抑制剂。与传统的提取方法相比，该方法操作简单、成本低、安全绿色，同时又能高效从莲蓬石榴花中得到α-葡萄苷酶抑制剂。本专利技术所述的一种响应面法优化石榴花中ɑ-葡萄糖苷酶抑制剂的提取方法，该方法以石榴花为原料，采用超声辅助提取法，在单因素试验基础上采用响应面法进行优化，具体操作按下列步骤进行：a.将采摘的石榴花干燥、粉碎、过100-200目的筛，得到石榴花粉末；b.将步骤a得到的石榴花粉末利用DesignExpert10软件进行Box-Behnken响应面优化设计，以石榴花提取物抗α-葡萄糖苷酶活性的IC50值为响应值，采用三因素三水平的响应面分析法优化石榴花中ɑ-葡萄糖苷酶抑制剂的超声提取，在液料比为1:20g/mL，溶剂比例45％乙醇水，超声时间3h，超声温度45℃的条件下得到提取液；c.将b所得到的提取液在7000rpm离心10min，取上清液浓缩干燥并称重，得到石榴花中α-葡萄糖苷酶抑制剂。所述方法获得的石榴花中ɑ-葡萄糖苷酶抑制剂在制备治疗餐后高血糖的药物中的用途。所述方法获得的石榴花中ɑ-葡萄糖苷酶抑制剂在制备餐后高血糖的保健食品中的用途。与现有技术相比，本专利技术所述的一种响应面法优化石榴花中ɑ-葡萄糖苷酶抑制剂的提取方法，具有如下优点：本专利技术使用的原料为天然植物，药食同用，获得的α-葡萄糖苷酶抑制剂毒副作用小；且使用超声辅助技术，利用超声波的机械、空化及热效应，在植物表面产生强大的冲击波和微声流，使植物细胞壁瞬间破裂，细胞内化学成分直接进入溶剂，在保留石榴花原有的化学成分基本不变的基础上，大大缩短传统方法的提取时间，避免了化学物长时间暴露在溶剂内而导致有些化合物结构改变，失去活性。同时，与传统的提取方法相比，通过本专利技术所述方法获得的α-葡萄糖苷酶抑制剂组分含量较大，抑制效果良好，具有较高的实用价值和实用前景。附图说明图1为本专利技术溶剂比例对石榴花中α-葡萄糖苷酶抑制活性剂提取的影响；图2为本专利技术溶剂比例对石榴花总酚含量的影响；图3为本专利技术液料比对石榴花中α-葡萄糖苷酶抑制活性剂提取的影响；图4为本专利技术料液比对石榴花总酚含量的影响；图5为本专利技术超声时间对石榴花中α-葡萄糖苷酶抑制活性剂提取的影响；图6为本专利技术超声时间对石榴花总酚含量的影响；图7为本专利技术超声温度对石榴花中α-葡萄糖苷酶抑制活性剂提取的影响；图8为本专利技术超声温度对石榴花总酚含量的影响；图9为本专利技术溶剂比例与超声时间对石榴花中α-葡萄糖苷酶抑制活性成分剂提取的响应面图；图10为本专利技术溶剂比例与超声时间对石榴花中α-葡萄糖苷酶抑制活性剂提取的响应面图；图11为本专利技术超声时间与超声温度对石榴花中α-葡萄糖苷酶抑制活性剂提取的响应面图。具体实施方式实施例1(响应面法)a.将采摘的石榴花干燥、粉碎、过100-200目的筛，得到石榴花粉末；b.将步骤a得到的石榴花粉末利用DesignExpert10软件进行Box-Behnken响应面优化设计，以石榴花提取物抗α-葡萄糖苷酶活性的IC50值为响应值，采用三因素三水平的响应面分析法优化石榴花中ɑ-葡萄糖苷酶抑制剂的超声提取，在液料比为1:20g/mL，溶剂比例45％乙醇水，超声时间3h，超声温度45℃的条件下得到提取液；c.将b所得到的提取液在7000rpm离心10min，取上清液浓缩干燥并称重，得到石榴花中α-葡萄糖苷酶抑制剂；本专利技术所述的一种响应面法优化石榴花中ɑ-葡萄糖苷酶抑制剂提取实验：单因素实验：称取粉碎的石榴花粉末本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种响应面法优化石榴花中ɑ-葡萄糖苷酶抑制剂的提取方法，其特征在于该方法以石榴花为原料，采用超声辅助提取法，在单因素试验基础上采用响应面法进行优化，具体操作按下列步骤进行：/na．将采摘的石榴花干燥、粉碎、过100-200目的筛，得到石榴花粉末；/nb．将步骤a得到的石榴花粉末利用Design Expert 10软件进行Box-Behnken响应面优化设计，以石榴花提取物抗α-葡萄糖苷酶活性的IC

【技术特征摘要】
1.一种响应面法优化石榴花中ɑ-葡萄糖苷酶抑制剂的提取方法，其特征在于该方法以石榴花为原料，采用超声辅助提取法，在单因素试验基础上采用响应面法进行优化，具体操作按下列步骤进行：
a．将采摘的石榴花干燥、粉碎、过100-200目的筛，得到石榴花粉末；
b．将步骤a得到的石榴花粉末利用DesignExpert10软件进行Box-Behnken响应面优化设计，以石榴花提取物抗α-葡萄糖苷酶活性的IC50值为响应值，采用三因素三水平的响应面分析法优化石榴花中ɑ-葡萄糖苷...

【专利技术属性】
技术研发人员：袁涛，贾丽，阿吉艾克拜尔·艾萨，热依木古丽·阿布都拉，
申请(专利权)人：中国科学院新疆理化技术研究所，
类型：发明
国别省市：新疆;65