一种转移因子口服溶液的制备方法技术

本发明专利技术提供了一种转移因子口服溶液的制备方法，在传统的工业化方法的基础上进行了改进，采用通常不易杀死病毒的较低温度(65～70℃)进行加热，在显著降低能耗、防止破坏物料中有效成分的同时能够有效杀灭脂包膜病毒，通过两次超滤可以有效去除非脂包膜病毒；采用升温‑保温‑降温的调配过程配合两次超滤，可以有效杀灭/去除物料中残留的病毒，同时能对其中的有效成分进行充分提取，有效保证了产品的安全性和有效性，能够适应原有工业生产线进行大批量物料的处理、无需更新设备，在保证生产效率的同时可有效节约成本，适于在传统化工生产线上推广使用。

【技术实现步骤摘要】
一种转移因子口服溶液的制备方法
本专利技术属于工业化制药
，特别涉及一种转移因子口服溶液的制备方法。
技术介绍
转移因子由Lawrence于1949年从结核菌素通过人的血液传递中首次发现，可在个体间乃至种属间转移传递迟发型超敏反应或其它细胞介导的免疫反应，将供体的细胞免疫性传递给受体正常的淋巴细胞，使其获得供体细胞的免疫性。转移因子具有传递免疫信息、激发免疫细胞活性、调节机体特异、非特异性细胞免疫功能等作用，已在临床应用多年，疗效确切。转移因子是多肽-多核苷酸组成的复合物，一般认为猪脾转移因子溶液中含有多肽、游离氨基酸、核苷酸、多种碱基及核酸降解产物、前列腺素等物质，因此目前工业化生产转移因子大多是以猪脾为原料。然而，一旦供体猪只发生了病毒感染，原料脾脏中也可能携带有这些病毒，并可能在加工过程中残留在转移因子溶液内，进而影响使用的安全性。因此，如何在生产过程中进行有效进行病毒灭活、同时不影响转移因子的品质，并且能够适应大批量物料的工业化处理，成为本领域技术人员急需解决的技术问题。
技术实现思路
为了解决上述技术问题，本专利技术提供了一种转移因子口服溶液的制备方法。本专利技术具体技术方案如下：本专利技术提供了一种转移因子口服溶液的制备方法，包括如下步骤：S1：将猪脾用纯化水清洗，使用绞肉机将清洗过的猪脾绞碎并收集，加入纯化水、搅拌均匀后研磨，收集研磨液；S2：将所述研磨液置于速冻冷库中，反复低温冻融三次；通过反复冻融降低细胞膜稳定性，同时不会影响小分子物质的活性，从而能对活性物质进行充分提取；S3：将解冻的物料边搅拌边升温，10min内升至65～70℃，保温15min，之后15min内降温至20℃以下，用1:1的稀盐酸调节物料的pH值至3.8～4.2，静置备用；将物料升温至65～75℃，可以使蛋白质及部分有机物质通过温度范围的有效控制，对药液进行热变性、使有效物质溶出，同时能有效地去除/灭活病毒，且通过相关验证；在65～75℃保温15min，可以使其中的有效物质进一步分解，使大分子物质充分降解；之后，物料经过降温工序、降至20℃，使有效物质可以降解更加完全；S4：低温下低速离心，收集上清液；S5：对上清液进行两次超滤，两次超滤之间用20％NaOH调节pH至6.0～7.0，两次超滤之后收集超滤液并搅拌均匀，得到转移因子溶液；通过两次超滤可以进一步去除上清液中残留的病毒，使消毒更加彻底；S6：使用注射用水对所述转移因子溶液进行稀释，得到可用于分装的转移因子口服溶液。进一步地，步骤S1的具体方法如下：将猪脾缓化后用纯化水清洗三次，使用绞肉机将猪脾绞碎、收集、称重，每个不锈钢桶装量不超过8kg，之后加入绞碎脾重量1.5倍的纯化水，搅拌均匀，使用胶体磨研磨三次，收集研磨液备用。上述方法可以对大批量物料进行充分研磨，在适应工业化生产条件的前提下有效提高原料处理的效率。进一步地，步骤S2中，所述冻融过程中冷冻温度不高于125℃、时间不低于24h，缓化温度不高于40℃、时间不超过24h。上述温度设置可以有效降低细胞膜稳定性，同时能确保有效成分的活性不受损失。进一步地，步骤S3中，所述升温的方式是水浴加热，所述降温的方式是冰水降温，所述静置的时间不低于40min。上述方法可以使升温和降温的过程较为温和而均匀，可以在传统的工业生产线上对物料进行处理，从而防止对有效成分的活性造成影响。进一步地，步骤S4中，离心的条件为在0～5℃下、2800r/min离心60min。进一步地，步骤S5中，先用单层绢布对上清液进行过滤，然后进行超滤，两次超滤的压力表示值均不超过0.1Mpa。进一步地，步骤S5中，第一次超滤之前用纯化水冲洗、超滤之后用0.4％碱液封。进一步地，步骤S6包括如下步骤：浓配工序，用注射用水将所述转移因子溶液稀释至理论配液量的60％，并进行搅拌循环；稀配工序，用40℃以下的注射用水补足药液体积，并进行搅拌循环，得到转移因子口服溶液。进一步地，所述浓配工序的具体方法如下：将所述转移因子溶液经0.22μm的微孔滤膜过滤至浓配罐中，再经5000分子量超滤装置过滤到稀配罐中，超滤完毕后，将经过超滤的注射用水加入所述稀配罐中、至达到理论配液量的60％。进一步地，所述稀配工序的具体方法如下：对所述浓配工序得到的溶液进行搅拌循环10min，检测后用40℃以下的注射用水补足药液体积，用0.22μm的微孔滤膜过滤后搅拌循环10min，测定pH值为6.0～7.5，即得到所述转移因子口服溶液。上述操作提供了在传统工业生产线的基础上、基于上述转移因子提取物制备口服溶液的最佳方法，应用该方法可得到浓度均匀、安全性高、稳定性好的口服溶液。本专利技术的有益效果如下：本专利技术提供了一种转移因子口服溶液的制备方法，在传统的工业化方法的基础上进行了改进，采用通常不易杀死病毒的较低温度(65～70℃)进行加热，在显著降低能耗、防止破坏物料中有效成分的同时能够有效杀灭脂包膜病毒，通过两次超滤可以有效去除非脂包膜病毒；采用升温-保温-降温的调配过程配合两次超滤，可以有效杀灭/去除物料中残留的病毒，同时能对其中的有效成分进行充分提取，有效保证了产品的安全性和有效性，能够适应原有工业生产线进行大批量物料的处理、无需更新设备，在保证生产效率的同时可有效节约成本，适于在传统化工生产线上推广使用。具体实施方式下面结合以下实施例对本专利技术作进一步详细说明。需要说明的是，由于本方法是应用于大规模工业化生产线上，其中部分操作(例如调节pH值、定容体积等)的精确程度和要求略低于实验室水平，因此实施例中部分数值无法提供准确值、只能提供范围值，凡在给定范围内的数值均可认为符合该方法的规定。实施例1一种转移因子口服溶液的制备方法，包括如下步骤：S1：将猪脾缓化后用纯化水清洗三次，使用绞肉机将猪脾绞碎、收集、称重，每个不锈钢桶装量不超过8kg，之后加入绞碎脾重量1.5倍的纯化水，搅拌均匀，使用胶体磨研磨三次，收集研磨液备用；S2：将研磨液置于速冻冷库中，反复低温冻融三次，冷冻温度不高于125℃、时间不低于24h，缓化温度不高于40℃、时间不超过24h；S3：将解冻的物料边搅拌边用90～100摄氏度水浴加热，10min内升温至65℃，保温15min，之后用冰水降温、15min内降温至15℃，用1:1的稀盐酸调节物料的pH值至4.0，静置备用；S4：0～5℃下、2800r/min离心60min，收集上清液；S5：用单层绢布对上清液进行过滤，然后进行超滤、压力表示值不超过0.1Mpa，对超滤液用20％NaOH调节pH至6.0～7.0，用单层绢布过滤后再次进行超滤、压力表示值不超过0.1Mpa，收集超滤液并搅拌均匀，得到转移因子溶液；S6：使用注射用水对转移因子溶液进行稀释，得到可用于分装的转移因子口服溶液。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种转移因子口服溶液的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：/nS1：将猪脾用纯化水清洗，使用绞肉机将清洗过的猪脾绞碎并收集，加入纯化水、搅拌均匀后研磨，收集研磨液；/nS2：将所述研磨液置于速冻冷库中，反复低温冻融三次；/nS3：将解冻的物料边搅拌边升温，10min内升至65～70℃，保温15min，之后15min内降温至20℃以下，用1:1的稀盐酸调节物料的pH值至3.8～4.2，静置备用；/nS4：低温下低速离心，收集上清液；/nS5：对上清液进行两次超滤，两次超滤之间用20％NaOH调节pH至6.0～7.0，两次超滤之后收集超滤液并搅拌均匀，得到转移因子溶液；/nS6：使用注射用水对所述转移因子溶液进行稀释，得到可用于分装的转移因子口服溶液。/n

【技术特征摘要】
1.一种转移因子口服溶液的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
S1：将猪脾用纯化水清洗，使用绞肉机将清洗过的猪脾绞碎并收集，加入纯化水、搅拌均匀后研磨，收集研磨液；
S2：将所述研磨液置于速冻冷库中，反复低温冻融三次；
S3：将解冻的物料边搅拌边升温，10min内升至65～70℃，保温15min，之后15min内降温至20℃以下，用1:1的稀盐酸调节物料的pH值至3.8～4.2，静置备用；
S4：低温下低速离心，收集上清液；
S5：对上清液进行两次超滤，两次超滤之间用20％NaOH调节pH至6.0～7.0，两次超滤之后收集超滤液并搅拌均匀，得到转移因子溶液；
S6：使用注射用水对所述转移因子溶液进行稀释，得到可用于分装的转移因子口服溶液。


2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤S1的具体方法如下：
将猪脾缓化后用纯化水清洗三次，使用绞肉机将猪脾绞碎、收集、称重，每个不锈钢桶装量不超过8kg，之后加入绞碎脾重量1.5倍的纯化水，搅拌均匀，使用胶体磨研磨三次，收集研磨液备用。


3.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤S2中，所述冻融过程中冷冻温度不高于125℃、时间不低于24h，缓化温度不高于40℃、时间不超过24h。


4.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤S3中，所述升温的方式是水浴加热，所述降温的方式是冰水降温，所述静置的时间不低于40min。<...

【专利技术属性】
技术研发人员：付金凤，陈憼臣，苗海娟，
申请(专利权)人：哈尔滨圣泰生物制药有限公司，
类型：发明
国别省市：黑龙江;23