抗人类CSF-1R抗体和其用途制造技术

本发明专利技术涉及一种特异性结合到人类CSF‑1R的抗体或其抗原结合片段，其包括：重链可变结构域，其包含具有SEQ ID NO:4的序列的HCDR1区、具有SEQ ID NO:5的序列的HCDR2区和具有SEQ ID NO:6的序列的HCDR3区；以及轻链可变结构域，其包含具有SEQ ID NO:7的序列的LCDR1区、具有SEQ ID NO:8的序列的LCDR2区和具有SEQ ID NO:9的序列的LCDR3区。所述重链可变结构域包含SEQ ID NO:2的序列且其中所述轻链可变结构域包含SEQ ID NO:3的序列。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】抗人类CSF-1R抗体和其用途
本专利技术大体上涉及可特异性中和人类CSF-1R的抗体以及其使用和制备方法。特定地说，本专利技术涉及可具有减少巨噬细胞的作用的抗体、此类抗体的制备和其在治疗与异常巨噬细胞增殖相关的疾病，如肿瘤方面的用途。
技术介绍
CSF-1R(M-CSFR)是巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF或CSF-1)和IL-34的细胞表面受体。CSF-1与其受体的结合激活信号转导通路，包括PI3K/Akt和MAPK通路，引起单核细胞/巨噬细胞谱系的细胞的增殖、存活、活动性和分化。CSF-1R是由造血干细胞、骨髓细胞，包括单核细胞巨噬细胞、破骨细胞、树突状细胞和微神经胶质细胞，神经祖细胞表达。骨髓细胞是在先天性免疫和后天性免疫中起重要作用的异质且多功能的细胞。高可塑性和多样性是巨噬细胞谱系的特征。巨噬细胞可取决于微环境和代谢状态而分化成不同表型且具有不同的生物功能。在啮齿动物和人类中，巨噬细胞具有两种主要激活表型，即M1(经典或促发炎)表型和M2(替代性或抗炎)表型(曼托瓦尼A(MantovaniA)等人,2002)。M2巨噬细胞分泌抗炎性细胞因子，且其功能与组织修复和血管生成相关。已在多种癌症中发现CSF-1R和/或其配体的表达或激活升高，且升高的M-CSF含量与某些癌症的不良预后相关(佩德森MB(PedersenMB)等人,2017；张QW(ZhangQW)等人,2012)。M-CSF是牵涉到肿瘤相关巨噬细胞(TAM)募集的若干细胞因子中的一种，所述TAM展现与M2巨噬细胞类似的特征且促成肿瘤血管生成和肿瘤进展成转移。CSF-1R的激活还引起破骨细胞前体的增殖和分化，由此介导骨骼再吸收过程。因此，抑制CSF-1R将提供对癌症，尤其是癌症侵袭、血管生成、癌转移、免疫耐受和骨转移的治疗。另外，CSF-1R因其在破骨细胞生物学中的作用而成为骨质疏松症、炎症性关节炎和其它炎症性骨侵蚀的重要治疗目标。因此，中和抗体经由CSF-1R信号传导靶向TAM成为治疗肿瘤和炎症性/免疫性疾病的一个引人注目的策略。
技术实现思路
本专利技术的实施例涉及特异性结合到人类CSF-1R的抗体或其结合片段。所述抗体包括人类化抗体和人类抗体。在一个方面中，本专利技术涉及特异性结合到人类CSF-1R细胞外结构域(ECD)(SEQIDNO:1)的抗体。本专利技术的抗体包含重链可变区序列，其包括HCDR1、HCDR2和HCDR3，其中所述HCDR1序列是GYSFTGYNMN(SEQIDNO:4)，所述HCDR2序列是NIDPYYGGTTYNQKFKG(SEQIDNO:5)，所述HCDR3序列是GDYSGSSYWYFDV(SEQIDNO:6)，其中所述HCDR序列是根据Kabat方法定义。根据本专利技术的一些实施例，特异性结合人类CSF-1R的抗体的重链可变区具有SEQIDNO:2的序列。在另一方面中，本申请案涉及特异性结合人类CSF-1R的抗体，其包含具有LCDR1、LCDR2和LCDR3序列的轻链可变区，其中所述LCDR1序列是KASDHINNWLA(SEQIDNO:7)，所述LCDR2序列是GATSLET(SEQIDNO:8)，所述LCDR3序列是QQNNEDPLT(SEQIDNO:9)，其中所述LCDR序列是根据Kabat方法定义。根据本专利技术的一些实施例，特异性结合人类CSF-1R的抗体的轻链可变区具有SEQIDNO:3的序列。在另一方面中，本专利技术涉及特异性结合人类CSF-1R的抗体，其包含具有HCDR1、HCDR2和HCDR3的重链可变区和具有LCDRl、LCDR2和LCDR3的轻链可变区，其中所述HCDR1序列是GYSFTGYNMN(SEQIDNO:4)，所述HCDR2序列是NIDPYYGGTTYNQKFKG(SEQIDNO:5)，所述HCDR3序列是GDYSGSSYWYFDV(SEQIDNO:6)，所述LCDR1序列是KASDHINNWLA(SEQIDNO:7)，所述LCDR2序列是GATSLET(SEQIDNO:8)，所述LCDR3序列是QQYWSTPFT(SEQIDNO:9)，且其中所述HCDR和LCDR序列是根据Kabat方法定义。在一些实施例中，特异性结合人类CSF-1R的抗体的重链可变区具有SEQIDNO:2的序列，且所述特异性结合人类CSF-1R的抗体的轻链可变区具有SEQIDNO:3的序列。在本专利技术的一些实施例中，特异性结合人类CSF-1R的抗体是完整抗体、Fab片段、F(ab')2片段或ScFv片段。在一些实施例中，特异性结合人类CSF-1R的抗体是完全人类抗体。在一些实施例中，特异性结合人类CSF-1R的抗体进一步包含选自IgG1、IgG2或IgG4同源异构体的重链恒定区和选自κ亚型或λ同源异构体的轻链恒定区。在一些实施例中，本专利技术的抗体(或其结合片段)通过与针对第二目标的另一特定结合结构域缀合而形成双特异性或多特异性抗体的一部分。在一些实施例中，本专利技术的抗体(或其结合片段)通过与药物(有效负载)缀合而形成抗体-药物缀合物(ADC)的一部分。所述药物或有效负载可根据其调节表达CSF-1R的细胞的能力来选择。本专利技术的另一方面涉及一种用于治疗由CSF-1R介导的疾病的医药组合物，其中所述医药组合物包含治疗有效量的特异性结合到人类CSF-1R的抗体或其结合片段。治疗有效量是足以产生所希望的治疗结果的量。所属领域的技术人员应理解，治疗有效量将取决于疾病状况、患者(性别、年龄、身体状况等)、投与途径等。所属领域的技术人员将能够在不进行过度实验的情况下鉴别出此类量。本专利技术的另一方面涉及包含特异性结合人类CSF-1R的抗体或其结合片段的医药组合物的用途，所述医药组合物是用于治疗和/或预防由CSF-1R、CSF-1和/或IL-34介导的疾病。在一些实施例中，所述CSF-1R、CSF-1和/或IL-34介导的疾病是癌症。在一些实施例中，癌症包括(但不限于)多发性骨髓瘤、白血病(例如急性骨髓性白血病(AML)和慢性骨髓性白血病(CML))、前列腺癌、多形性胶质母细胞瘤、骨巨细胞瘤、腱鞘巨细胞瘤、向其它组织的肿瘤转移和胃肠基质瘤、黑色素瘤、非小细胞肺癌、肾癌、乳癌、白血病、卵巢癌、骨髓纤维化、胃肠基质瘤和其它晚期实体肿瘤。在一些实施例中，所述CSF-1R、CSF-1和/或IL-34介导的疾病是炎症性或免疫性疾病。在一些实施例中，所述炎症性或免疫性疾病是色素沉着绒毛结节性滑膜炎(PVNS)、骨质疏松症、炎症性关节炎或其它炎症性骨侵蚀。附图说明图1示出通过ELISA测定的mAbAB21抗体与CSF-1R的结合。图2示出通过Biacore分析测定的mAbAB21与人类CSF-1R的结合。图3示出mAbAB21阻断CSF-1与CSF-1R之间的结合的能力。图4示出通过流式细胞术测定的mAbAB21与细胞表面上的CSF-1R结合的能力。图5示出mAbAB21抑制Ba/F3-CSF-1R细胞系的CSF-1依赖性细胞生长的能本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种特异性结合到人类CSF-1R的抗体或其抗原结合片段，其包含：/n重链可变结构域，其包含具有SEQ ID NO:4的序列的HCDR1区、具有SEQ ID NO:5的序列的HCDR2区和具有SEQ ID NO:6的序列的HCDR3区；以及/n轻链可变结构域，其包含具有SEQ ID NO:7的序列的LCDR1区、具有SEQ ID NO:8的序列的LCDR2区和具有SEQ ID NO:9的序列的LCDR3区。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20181213 US 62/779,4551.一种特异性结合到人类CSF-1R的抗体或其抗原结合片段，其包含：
重链可变结构域，其包含具有SEQIDNO:4的序列的HCDR1区、具有SEQIDNO:5的序列的HCDR2区和具有SEQIDNO:6的序列的HCDR3区；以及
轻链可变结构域，其包含具有SEQIDNO:7的序列的LCDR1区、具有SEQIDNO:8的序列的LCDR2区和具有SEQIDNO:9的序列的LCDR3区。


2.根据权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述重链可变结构域包含SEQIDNO:2、10、11、12或13的序列或与SEQIDNO:2、10、11、12或13的序列具有至少95％同源性的序列，且其中所述轻链可变结构域包含SEQIDNO:3、14、15或16的序列或与SEQIDNO:3、14、15或16的序列具有至少95％同源性的序列。


3.根据权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述重链可变结构域包含SEQIDNO:2、10、11、12或13的序列，且其中所述轻链可变结构域包含SEQIDNO:3、14、15或16的序列。


4.根据权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段特异性结合到人类CSF-1R的细胞外结构域中的表位，其中所述人类CSF-1R的细胞外结构域具有SEQIDNO:1的氨基酸序列，且所述表位具有以下序列：Ser-Val-Asp-Val-Asn-Phe(SEQIDNO:17)。


5.根据权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段抑制CSF-1诱导的...

【专利技术属性】
技术研发人员：何承璇，廖助彬，陈又楷，黄承炜，杨子平，赖思良，
申请(专利权)人：财团法人生物技术开发中心，
类型：发明
国别省市：中国台湾;71