脂质纳米颗粒制剂制造技术

本发明专利技术提供了某些特定的脂质纳米颗粒，所述脂质纳米颗粒包含：(a)一种或多种核酸分子；(b)胆固醇；(c)DSPC；(d)PEG‑C‑DMA；以及(e)阳离子脂质；以及包含所述脂质纳米颗粒的药物组合物。所述脂质纳米颗粒和药物组合物特别可用于将核酸如siRNA或mRNA递送至患者(例如，人)或细胞。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】脂质纳米颗粒制剂相关申请的交叉引用本专利申请要求2018年11月9日提交的美国申请序列号62/758,088的优先权权益，所述申请以引用的方式并入本文。
技术介绍
脂质纳米颗粒(LNP)是生物活性化合物(如治疗性核酸、蛋白质和肽)的有效药物递送系统，所述化合物否则是细胞不可渗透的。基于核酸的药物(其包括大核酸分子，例如体外转录的信使RNA(mRNA)以及与信使RNA或基因相互作用的较小的多核苷酸)必须被递送至适当的细胞区室以便有效。例如，双链核酸，如双链RNA分子(dsRNA)(包括例如siRNA)受到它们的物理化学性质的不利影响，所述物理化学性质使得它们是细胞不可渗透的。递送至适当的区室后，siRNA通过称为RNA干扰(RNAi)的高度保守的调控机制阻断基因表达。通常，siRNA的尺寸较大，分子量范围为12-17kDa，并且由于其磷酸主链具有多达50个负电荷而具有高度阴离子性。此外，两条互补的RNA链形成刚性螺旋。这些特征导致了siRNA较差的“类药物”性质。当静脉内施用时，siRNA迅速从体内排出，典型的半衰期在仅10分钟的范围内。此外，siRNA被血液和其他体液或组织中存在的核酸酶快速降解，并且已显示出在体外和体内刺激强烈的免疫应答。参见例如，Robbins等人,Oligonucleotides19:89-102,2009。mRNA分子受到类似的不可渗透性、脆性和免疫原性问题不利影响。(WO2016/118697)脂质纳米颗粒制剂具有改进的体内核酸递送。例如，此类制剂显著降低了实现体内靶标敲低所需的siRNA剂量。参见Zimmermann等人,Nature441:111-114,2006。通常，此类脂质纳米颗粒药物递送系统是包含阳离子脂质、辅助脂质和含有聚乙二醇的脂质的多组分制剂。带正电荷的阳离子脂质与阴离子核酸结合，而其他组分支持脂质纳米颗粒的稳定自组装。已经致力于提高脂质纳米颗粒制剂的递送功效。许多此类努力旨在开发更合适的阳离子脂质。参见例如，Akinc等人,NatureBiotechnology26:561-569,2008；Love等人,Proc.Natl.Acad.Sci.USA107:1864-1869,2010；Baigude等人,JournalofControlledRelease107:276-287,2005；Semple等人,NatureBiotechnology28:172-176,2010。尽管做出了这些努力，但仍然需要含有脂质纳米颗粒的制剂，所述制剂在施用后提供高效力并且使施用较低剂量的核酸成为可能。
技术实现思路
本专利技术提供某些特定的脂质纳米颗粒和包含所述脂质纳米颗粒的药物组合物。所述脂质纳米颗粒和药物组合物特别适用于向患者(例如人)或细胞递送核酸。因此，在一个实施方案中，本专利技术提供了本专利技术的脂质纳米颗粒，其为包含以下的脂质纳米颗粒：(a)一种或多种核酸分子；(b)胆固醇；(c)DSPC；(d)PEG-C-DMA；以及(e)下式的阳离子脂质：或其盐，其中PEG-C-DMA、阳离子脂质、胆固醇和DSPC占总脂质的摩尔百分比如下：PEG-C-DMA：约1.5；阳离子脂质：约50.0；胆固醇：约38.5；以及DSPC：约10.0。在一个实施方案中，本专利技术提供了本专利技术的脂质纳米颗粒，其为包含以下的脂质纳米颗粒：(a)一种或多种核酸分子；(b)胆固醇；(c)DSPC；(d)PEG-C-DMA；以及(e)下式的阳离子脂质：或其盐，其中PEG-C-DMA、阳离子脂质、胆固醇和DSPC占总脂质的摩尔百分比如下：PEG-C-DMA：1.5；阳离子脂质：50.0；胆固醇：38.5；以及DSPC：10.0。本专利技术还提供了一种药物组合物，所述药物组合物包含本专利技术的脂质纳米颗粒和药学上可接受的载体。本专利技术还提供了一种用于将核酸递送至细胞的方法，所述方法包括使所述细胞与本专利技术的脂质纳米颗粒接触。更一般地，本专利技术提供了在体内或体外向活细胞施用核酸的方法。本专利技术还提供了一种用于治疗以导致功能性蛋白质缺乏的遗传缺陷为特征的疾病的方法，所述方法包括：向患有所述疾病的受试者施用本专利技术的脂质纳米颗粒，其中核酸分子是编码功能性蛋白质或具有与所述功能性蛋白质相同的生物活性的蛋白质的mRNA。本专利技术还提供了一种用于治疗以多肽的过表达为特征的疾病的方法，所述方法包括向患有所述疾病的受试者施用本专利技术的脂质纳米颗粒，其中核酸分子是靶向所述过表达多肽的表达的siRNA。本专利技术还提供了本专利技术的脂质纳米颗粒，所述脂质纳米颗粒用于以导致功能性蛋白质缺乏的遗传缺陷为特征的疾病的治疗性或预防性治疗。本专利技术还提供了本专利技术的脂质纳米颗粒，所述脂质纳米颗粒用于以多肽的过表达为特征的疾病的治疗性或预防性治疗。本专利技术还提供了一种用于治疗动物的疾病或病症的方法，所述方法包括向所述动物施用治疗有效量的本专利技术的脂质纳米颗粒。本专利技术还提供了本文公开的可用于制备本专利技术的脂质纳米颗粒的方法和中间体。具体实施方式定义如本文所用，除非另外指明，否则以下术语具有赋予其的含义。术语“约”意指±5％、±4％、±3％、±2％或±1％。术语“干扰RNA”或“RNAi”或“干扰RNA序列”是指在干扰RNA处于与靶基因或序列相同的细胞中时，能够减少或抑制靶基因或序列的表达(例如，通过介导降解或抑制与干扰RNA序列互补的mRNA的翻译)的单链RNA(例如，成熟miRNA)或双链RNA(即，双链体RNA，如siRNA、aiRNA或前体miRNA)。干扰RNA因此是指与靶mRNA序列互补的单链RNA或由两条互补链或由单条自身互补链形成的双链RNA。干扰RNA可与靶基因或序列基本同一或完全同一，或者可包含错配区(即，错配基序)。干扰RNA的序列可对应于全长靶基因或其子序列。干扰RNA包括“小干扰RNA”或“siRNA”，例如长度为约15-60、15-50或15-40个(双链体)核苷酸的干扰RNA，更通常地长度为约15-30、15-25或19-25个(双链体)核苷酸，并且优选地长度为约20-24、21-22或21-23个(双链体)核苷酸(例如，双链siRNA的每个互补序列的长度均为15-60、15-50、15-40、15-30、15-25或19-25个核苷酸，优选地长度为约20-24、21-22或21-23个核苷酸，并且双链siRNA的长度为约15-60、15-50、15-40、15-30、15-25或19-25个碱基对，优选地长度为约18-22、19-20或19-21个碱基对)。siRNA双链体可包含约1至约4个核苷酸或约2至约3个核苷酸的3’突出端和5’磷酸酯末端。siRNA的实例包括但不限于：由两个分开链分子组装的双链多核苷酸分子，其中一条链为有义链并且另一个为互补反义链；由单链分子组装的双本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种脂质纳米颗粒，其包含：/n(a)一种或多种核酸分子；/n(b)胆固醇；/n(c)DSPC；/n(d)PEG-C-DMA；以及/n(e)下式的阳离子脂质：/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20181109 US 62/758,0881.一种脂质纳米颗粒，其包含：
(a)一种或多种核酸分子；
(b)胆固醇；
(c)DSPC；
(d)PEG-C-DMA；以及
(e)下式的阳离子脂质：



或其盐，其中PEG-C-DMA、阳离子脂质、胆固醇和DSPC占总脂质的摩尔百分比如下：
PEG-C-DMA：约1.5；
阳离子脂质：约50.0；
胆固醇：约38.5；以及
DSPC：约10.0。


2.如权利要求1所述的脂质纳米颗粒，其中所述一种或多种核酸分子包含siRNA。


3.如权利要求1所述的脂质纳米颗粒，其中所述一种或多种核酸分子包含mRNA。


4.如权利要求1-3中任一项所述的脂质纳米颗粒，其具有大于约17的(总脂质):(核酸)重量比。


5.如权利要求1-3中任一项所述的脂质纳米颗粒，其具有大于约18的(总脂质):(核酸)重量比。


6.如权利要求1-3中任一项所述的脂质纳米颗粒，其具有大于约19的(总脂质):(核酸)重量比。


7.如权利要求1-3中任一项所述的脂质纳...

【专利技术属性】
技术研发人员：詹姆斯·海斯，亚当·贾奇，林荞梦，洛恩·拉尔夫·帕尔默，佩特拉·施赖纳，
申请(专利权)人：阿布特斯生物制药公司，
类型：发明
国别省市：加拿大;CA