血清总蛋白测定试剂球的制备方法、试剂球及微流控芯片技术

技术编号:29755299 阅读:27 留言:0更新日期:2021-08-20 21:08
本发明专利技术实施例涉及医学检测技术领域,尤其涉及一种血清总蛋白测定试剂球的制备方法、试剂球及微流控芯片,该方法是将一定量的缓冲液、五水硫酸铜、酒石酸钾钠、碘化物、非离子表面活性剂、稳定剂、赋形剂以及水混合形成混合液,然后将混合液以液滴的形式滴在液氮中,使液滴形成冰球,再将冰球进行冷冻干燥制得球形的血清总蛋白测定试剂球。其中,混合液包括以下组分:缓冲液40‑200mmol/L、五水硫酸铜10‑40g/L、酒石酸钾钠20‑80g/L、碘化物10‑40g/L、非离子表面活性剂5‑20g/L、稳定剂0.1‑10g/L、赋形剂10‑100g/L。该剂量范围的赋形剂能够保证试剂球的形态及复融溶解性,有益于试剂球完全冻干,从而,使得试剂球具有较高的稳定性和精密度。

【技术实现步骤摘要】
血清总蛋白测定试剂球的制备方法、试剂球及微流控芯片
本专利技术实施例涉及医学检测
,尤其涉及一种血清总蛋白测定试剂球的制备方法、试剂球及微流控芯片。
技术介绍
血清总蛋白(TotalProtein,TP)包括白蛋白和球蛋白两类,在机体中具有重要的生理功能,能维持血液正常胶体渗透压和PH,运输多种代谢物,同时还具有免疫作用以及营养作用等多种功能。血清总蛋白能够反映肝脏的合成功能,当肝脏发生病变时,血清总蛋白会明显升高。由此可知,血清总蛋白测定是肝脏疾病的主要检测项目。目前,双缩脲法是临床实验室最常用的血清总蛋白测量方法,然而,双缩脲法灵敏度较差,且需要依赖大型全自动生化分析仪,难以应用在病人身边进行及时诊断(Pointofcare,POCT)。虽然,现有用于检测其它项目的冻干试剂球,但是,现有的冻干试剂球形态较差,难以完全冻干,导致其具有较低的稳定性和准确性。
技术实现思路
本专利技术实施例主要解决的技术问题是提供一种血清总蛋白测定试剂球的制备方法、试剂球及微流控芯片,采用该方法制备得到的试剂球具有较好的形态及复融溶解性,并能完全冻干,具有较高的稳定性和精密度。为解决上述技术问题,第一方面,本专利技术实施例中提供给了一种血清总蛋白测定试剂球的制备方法,包括:将缓冲液、五水硫酸铜、酒石酸钾钠、碘化物、非离子表面活性剂、稳定剂、赋形剂以及水混合形成混合液;将所述混合液的液滴滴在液氮中,以使所述液滴形成冰球;将所述冰球进行冷冻干燥制得所述血清总蛋白测定试剂球;其中,所述混合液包括以下组分:缓冲液40-200mmol/L、五水硫酸铜10-40g/L、酒石酸钾钠20-80g/L、碘化物10-40g/L、非离子表面活性剂5-20g/L、稳定剂0.1-10g/L、赋形剂10-100g/L,其中,所述稳定即包括碳酸钠和胆酸。在一些实施例中,所述将缓冲液、五水硫酸铜、酒石酸钾钠、碘化物、非离子表面活性剂、稳定剂、赋形剂以及水混合形成混合液,包括:将所述缓冲液加入第一预设定量的水中;待所述缓冲液在所述水中完全溶解后,依次加入五水硫酸铜、酒石酸钾钠和碘化物,形成第一溶液;将非离子表面活性剂、稳定剂和赋形剂依次加入所述第一溶液中,并将第二预设定量的水加入所述第一溶液中,形成第三预设定量的所述混合液。在一些实施例中,所述赋形剂包括甘露醇、肌醇、海藻糖、PEG3350、PEG8000、聚乙烯吡咯烷酮、葡聚糖1万、葡聚糖4万中的至少一种。在一些实施例中,所述缓冲液包括氢氧化钠缓冲液、氢氧化钾缓冲液、枸橼酸二钠缓冲液中的至少一种。在一些实施例中,所述非离子表面活性剂包括聚乙二醇辛基苯基醚、四聚乙二醇单月桂醚中的至少一种。在一些实施例中,所述冰球的体积为2.5ul-3.5ul。为解决上述技术问题,第二方面,本专利技术实施例中提供给了一种试剂球,采用如上第一方面所述的血清总蛋白测定试剂球的制备方法制备得到。为解决上述技术问题,第三方面,本专利技术实施例中提供给了一种微流控芯片,包括芯片本体和如上第二方面所述的试剂球,其中,所述试剂球设置于所述芯片本体内部。为解决上述技术问题,第四方面,本专利技术实施例中提供给了一种生化分析仪,包括分析仪本体、反应槽以及如上第三方面所述的微流控芯片,其中,所述反应槽开设于所述分析仪本体内,所述微流控芯片安装于所述反应槽。本专利技术实施例的有益效果:区别于现有技术的情况,本专利技术实施例提供的血清总蛋白测定试剂球的制备方法,该方法是将一定量的缓冲液、五水硫酸铜、酒石酸钾钠、碘化物、非离子表面活性剂、稳定剂、赋形剂以及水混合形成混合液,然后将混合液以液滴的形式滴在液氮中,使液滴形成冰球,再将冰球进行冷冻干燥制得球形的血清总蛋白测定试剂球。其中,混合液包括以下组分:缓冲液40-200mmol/L、五水硫酸铜10-40g/L、酒石酸钾钠20-80g/L、碘化物10-40g/L、非离子表面活性剂5-20g/L、稳定剂0.1-10g/L、赋形剂10-100g/L,所述稳定剂包括碳酸钠和胆酸。其中,酒石酸钾钠提供碱性环境,使得五水硫酸铜中的铜离子与总蛋白的肽键发生络合反应形成蓝紫色复合物,从而结合蓝紫色复合物的颜色强度以评估总蛋白的含量,碘化物有助于防止络合物自动还原,非离子表面活性剂可以增加血清总蛋白和铜离子的接触和结合,同时可一定程度上降低血清的脂浊,起到抗干扰的作用,从而有益于提高检测精度;另一方面,稳定剂中的碳酸钠和胆酸形成胆酸盐,胆酸盐能很好的起到乳化、增稠和维持各成分活性的作用;此外,该剂量范围的赋形剂能够保证试剂球的形态及复融溶解性,有益于试剂球完全冻干。也即,通过该方法制备出的血清总蛋白测定试剂球,具有较好的形态及复融溶解性,并能完全冻干,从而,具有较高的稳定性和精密度。附图说明一个或多个实施例通过与之对应的附图中的图片进行示例性说明,这些示例性说明并不构成对实施例的限定,附图中具有相同参考数字标号的元件表示为类似的元件,除非有特别申明,附图中的图不构成比例限制。图1为专利技术一实施例提供的血清总蛋白测定试剂球的制备方法的流程示意图;图2为图1所示中步骤S10的一子流程示意图;图3为临床相关性分析中相关方程的拟合线示意图;图4为线性范围测试中相关方程的拟合线示意图。具体实施方式下面结合具体实施例对本专利技术进行详细说明。以下实施例将有助于本领域的技术人员进一步理解本专利技术,但不以任何形式限制本专利技术。应当指出的是,对本领域的普通技术人员来说,在不脱离本专利技术构思的前提下,还可以做出若干变形和改进。这些都属于本专利技术的保护范围。为了使本申请的目的、技术方案及优点更加清楚明白,以下结合附图及实施例,对本申请进行进一步详细说明。应当理解,此处所描述的具体实施例仅用以解释本申请,并不用于限定本申请。需要说明的是,如果不冲突,本专利技术实施例中的各个特征可以相互结合,均在本申请的保护范围之内。另外,虽然在装置示意图中进行了功能模块划分,在流程图中示出了逻辑顺序,但是在某些情况下,可以以不同于装置中的模块划分,或流程图中的顺序执行所示出或描述的步骤。此外,本文所采用的“第一”、“第二”、“第三”等字样并不对数据和执行次序进行限定,仅是对功能和作用基本相同的相同项或相似项进行区分。除非另有定义,本说明书所使用的所有的技术和科学术语与属于本专利技术的
的技术人员通常理解的含义相同。本说明书中在本专利技术的说明书中所使用的术语只是为了描述具体的实施方式的目的,不是用于限制本专利技术。本说明书所使用的术语“和/或”包括一个或多个相关的所列项目的任意的和所有的组合。此外,下面所描述的本专利技术各个实施方式中所涉及到的技术特征只要彼此之间未构成冲突就可以相互组合。本专利技术实施例提供一种血清总蛋白测定试剂球的制备方法,能够制备出球形的血清总蛋白测定试剂,请参阅图1,该方法包括如下步骤:S10:将缓冲液、五水硫酸铜、酒石酸钾钠、碘化物、非离子表面活性本文档来自技高网
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【技术保护点】
1.一种血清总蛋白测定试剂球的制备方法,其特征在于,包括:/n将缓冲液、五水硫酸铜、酒石酸钾钠、碘化物、非离子表面活性剂、稳定剂、赋形剂以及水混合形成混合液;/n将所述混合液的液滴滴在液氮中,以使所述液滴形成冰球;/n将所述冰球进行冷冻干燥制得所述血清总蛋白测定试剂球;/n其中,所述混合液包括以下组分:缓冲液40-200mmol/L、五水硫酸铜10-40g/L、酒石酸钾钠20-80g/L、碘化物10-40g/L、非离子表面活性剂5-20g/L、稳定剂0.1-10g/L、赋形剂10-100g/L,其中,所述稳定剂包括碳酸钠和胆酸。/n

【技术特征摘要】
1.一种血清总蛋白测定试剂球的制备方法,其特征在于,包括:
将缓冲液、五水硫酸铜、酒石酸钾钠、碘化物、非离子表面活性剂、稳定剂、赋形剂以及水混合形成混合液;
将所述混合液的液滴滴在液氮中,以使所述液滴形成冰球;
将所述冰球进行冷冻干燥制得所述血清总蛋白测定试剂球;
其中,所述混合液包括以下组分:缓冲液40-200mmol/L、五水硫酸铜10-40g/L、酒石酸钾钠20-80g/L、碘化物10-40g/L、非离子表面活性剂5-20g/L、稳定剂0.1-10g/L、赋形剂10-100g/L,其中,所述稳定剂包括碳酸钠和胆酸。


2.根据权利要求1所述的血清总蛋白测定试剂球的制备方法,其特征在于,所述将缓冲液、五水硫酸铜、酒石酸钾钠、碘化物、非离子表面活性剂、稳定剂、赋形剂以及水混合形成混合液,包括:
将所述缓冲液加入第一预设定量的水中;
待所述缓冲液在所述水中完全溶解后,依次加入五水硫酸铜、酒石酸钾钠和碘化物,形成第一溶液;
将非离子表面活性剂、稳定剂和赋形剂依次加入所述第一溶液中,并将第二预设定量的水加入所述第一溶液中,形成第三预设定量的所述混合液。


3.根据权利要求1或2所述的血清总...

【专利技术属性】
技术研发人员:牟健汪晨宇周慧欣陈明
申请(专利权)人:深圳市锦瑞生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:广东;44

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