一种注射用头孢西丁钠中聚合物的检测方法技术

本发明专利技术属于药物分析技术领域，具体涉及一种注射用头孢西丁钠中聚合物的检测方法。本发明专利技术包括检测条件、溶液配制、系统适用性要求及限度三大步骤。本发明专利技术采用高效液相色谱法，操作简单，灵敏度更高、专属性更好，可精准控制本品中单个聚合物和总聚合物的含量，更能有效控制产品的质量，保证临床用要安全。

【技术实现步骤摘要】
一种注射用头孢西丁钠中聚合物的检测方法
本专利技术属于药物分析
，具体涉及一种注射用头孢西丁钠中聚合物的检测方法。
技术介绍
头孢西丁钠是头霉素类抗生素，由美国MerckSharp&Dohme公司开发并于1974年上市，是由链霉素产生的甲氧头孢菌素C(cephamycinC)经半合成制得的一类新型抗生素，其母核与头孢菌素相似，且抗菌性能也类似，习惯上被列入第二代头孢菌素类。头孢西丁钠(CefoxitinSodium)化学名称为：(6R,7S)-3-(氨基甲酰氧甲基)-7-甲氧基-8-氧代-7-[2(2-噻吩基)乙酰氨基]-5-硫杂-1-氮杂双环[4.2.0]辛-2-烯-2-甲酸钠盐。其化学结构式为：头孢西丁钠是在1992年被引进中国市场的由美国默沙东公司开发的一种全新的头孢菌素类抗生素药物。该产品具有抗菌谱广，对革兰氏阳性菌、阴性菌、厌氧菌或需氧菌都有较强活性，对β-内酞胺酶高度稳定、体内分布广、感染渗出液中药物浓度高等特点，另外由于其主要由肾脏排出体外，因此毒副作用小，耐受性大。由于头孢西丁钠对厌氧菌具有有效杀菌作用及对β-内酰胺酶的稳定性，特别适用于需氧及厌氧混合菌和对β-内酰胺酶药品敏感细菌所引起的感染。临床上用于腹膜炎和其他腹腔内、盆腔内、妇科感染，败血症，心内膜炎，尿路感染(包括淋病)，呼吸道感染，骨关节感染，皮肤软组织感染。头孢西丁钠临床上多将其制成静脉及肌肉注射制剂，该制剂存在着稳定性差，对光和热很不稳定，长时间放置有关物质增加，且溶解后出现浑浊现象，导致其在使用上遇到很多困难，存在用药安全隐患。目前国内至少有32个企业生产销售注射用头孢西丁钠，原料涉及5个生产企业；各级医疗机构普遍使用，2011～2015年注射用头孢西丁钠的销售金额均为抗感染用药的前10位，因此其产品质量对公众用药的安全影响较大。头孢菌素类药物在临床上常出现过敏反应，高分子聚合杂质是引发过敏反应的过敏原。因此，对注射用头孢西丁钠中聚合物的检测和控制具有重要意义。查询现行版注射用头孢西丁钠中国药典(2020版)，美国药典(USP43)，头孢西丁钠原料药中国药典(2020)、欧洲药典(10.0)，均未收载聚合物的检测方法，因此，开发注射用头孢西丁钠中聚合物的检测方法是亟待解决的新课题，以控制产品在工艺生产过程中聚合物的含量。
技术实现思路
目前头孢类产品聚合物检查方法多采用分子排阻色谱法(G10法)，该法只能检测产品中总聚合物含量，且分析周期长，操作复杂，本专利技术提供一种用高效液相色谱法测定聚合物的方法，操作简单，且可测定产品中单个聚合物及总聚合物的含量，更能有效控制产品的质量。为实现上述目的，本专利技术采用以下技术方案。一种注射用头孢西丁钠中聚合物的检测方法，该方法包括如下步骤。1、检测条件。1)色谱柱：用苯基硅烷键合硅胶为填充剂；粒径为2～10μm，长度为100～300mm，内径为8.0～4.6mm。2)流动相：流动相A为浓度1～2g/L，pH＝6～8的乙酸铵溶液、；流动相B为乙腈。3)进样量：20μL～50μL；流速：0.8～1.2ml/ml；检测波长：254±10nm；柱温：30～40℃；样品室温度：2℃～8℃。2、溶液配制。1)稀释剂：称量乙酸铵约0.5～1.5g，加水溶解，并用氨水调pH至6.0～8.0，混匀。2)供试品溶液：取注射用头孢西丁钠样品适量，加稀释剂溶解并定量稀释制成浓度约为3-7mg/ml的溶液。3)对照溶液a：精密量取供试品溶液适量，用稀释剂定量稀释制成浓度约为30-70μg/ml的溶液。4)对照溶液b：精密量取对照溶液a适量，用稀释剂定量稀释制成浓度约为0.3-0.7μg/ml的溶液。5)对照溶液c：取样品约225-275mg，精密称定，置50mL量瓶中，加0.1N盐酸溶液4-6mL，室温下放置1小时后，加入0.1N氢氧化钠溶液4-6mL中和，加稀释剂稀释至刻度，超声25-35分钟，摇匀，即得。3、系统适用性要求及限度。1)在上述色谱条件下，精密吸取稀释剂、供试品溶液、对照溶液b、对照溶液c各20μL～50μL，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。2)计算公式：聚合物杂质＝Aimp/Astd-b*0.01％，其中：Aimp为供试品溶液中单个聚合物杂质的峰面积；Astd-b为对照溶液b中头孢西丁的峰面积。3)聚合物限度要求：单个聚合物的含量不大于0.2％。进一步地，所述步骤1中洗脱按如下方式实施：先以95～90v/v％流动相A和5～10v/v％流动相B共混形成洗脱流动相，洗脱4～6分钟；再经第一次线性洗脱40～50分钟，其间增加洗脱流动相中流动B相的含量至24～28v/v％，同时减少流动A相含量至76～72v/v％；最后以45～55v/v％流动性A和55～45v/v％流动性B相共混形成洗脱流动相，洗脱5～9分钟。进一步地，所述步骤3中系统适用性要求为稀释剂在聚合物杂质和主峰的保留时间处不应有干扰；对照溶液b的主峰信噪比不低于10；对照溶液c定位聚合物杂质，以头孢西丁主峰定位聚合物2，聚合物2的相对保留时间约为2.07；以聚合物2为特征峰定位聚合物1和聚合物3，聚合物1的相对保留时间为0.92-0.94，聚合物3的相对保留时间为1.07-1.08。聚合物杂质和其相邻峰的分离度应不小于1.2。进一步地，所述的一种注射用头孢西丁钠中聚合物的检测方法，头孢西丁钠中聚合物为头孢西丁分子的二聚物中的一种或几种。与现有技术相比，具有如下有益效果。目前有报道采用采用葡聚糖凝胶G-10为色谱柱；流动相A：pH7.0的0.1mol/L磷酸盐缓冲液[0.1mol/L磷酸氢二钠溶液-0.1mol/L磷酸二氢钠溶液(61：39)]，流动相B：超纯水，流速为1.0ml/min，检测波长诶254nm，测定注射用头孢西丁钠中的聚合物，但该方法灵敏度低、专属性较差。相比之下，本专利技术采用高效液相色谱法，灵敏度更高、专属性更好，可精准控制本品中单个聚合物和总聚合物的含量，更能保证临床用要安全。附图说明图1为聚合物方法典型色谱图。图2为样品+混和杂质对照品溶液相谱图。具体实施方式下述实施例仅为本专利技术的优选实施例而已，并不用于限制本专利技术，对于本领域的技术人员来说，本专利技术可以有各种更改和变化。凡在本专利技术的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本专利技术的保护范围之内。实施例1。注射用头孢西丁钠中聚合物的检测方法的建立。1、色谱柱选择传统聚合物检测多选用凝聚色谱柱，本专利技术方法采用苯基硅烷键合硅胶为填充剂。2、流动相选择。选用可进质谱的乙酸铵溶液作为水相并调节pH值6.0～8.0。3、洗脱程序选择通过质谱提取洗脱的杂质分子量，调整有机相比例，确认最终的洗脱程序，保证聚合物能有效洗脱。4、供试品浓度选择提高供试品浓度本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种注射用头孢西丁钠中聚合物的检测方法，其特征在于，包括如下步骤：/n1、检测条件/n1)色谱柱：/n用苯基硅烷键合硅胶为填充剂，粒径为2～10μm，长度为100～300mm，内径为8.0～4.6mm；/n2)流动相：流动相A为浓度1～2g/L，pH＝6～8的乙酸铵溶液、；流动相B为乙腈；/n3)进样量：20μL～50μL；流速：0.8～1.2ml/ml；检测波长：254±10nm；柱温：30～40℃；样品室温度：2℃～8℃；/n2、溶液配制/n1)稀释剂：称量乙酸铵约0.5～1.5g，加水溶解，并用氨水调pH至6.0～8.0，混匀；/n2)供试品溶液：取注射用头孢西丁钠样品适量，加稀释剂溶解并定量稀释制成浓度约为3-7mg/ml的溶液；/n3)对照溶液a：精密量取供试品溶液适量，用稀释剂定量稀释制成浓度约为30-70μg/ml的溶液；/n4)对照溶液b：精密量取对照溶液a适量，用稀释剂定量稀释制成浓度约为0.3-0.7μg/ml的溶液；/n5)对照溶液c：取样品约225-275mg，精密称定，置50mL量瓶中，加0.1N盐酸溶液4-6mL，室温下放置1小时后，加入0.1N氢氧化钠溶液4-6mL中和，加稀释剂稀释至刻度，超声25-35分钟，摇匀，即得对照溶液c；/n3、系统适用性要求及限度/n1)在上述色谱条件下，精密吸取稀释剂、供试品溶液、对照溶液b、对照溶液c各20μL～50μL，分别注入液相色谱仪，记录色谱图；/n2)计算公式：聚合物杂质＝A...

【技术特征摘要】
1.一种注射用头孢西丁钠中聚合物的检测方法，其特征在于，包括如下步骤：
1、检测条件
1)色谱柱：
用苯基硅烷键合硅胶为填充剂，粒径为2～10μm，长度为100～300mm，内径为8.0～4.6mm；
2)流动相：流动相A为浓度1～2g/L，pH＝6～8的乙酸铵溶液、；流动相B为乙腈；
3)进样量：20μL～50μL；流速：0.8～1.2ml/ml；检测波长：254±10nm；柱温：30～40℃；样品室温度：2℃～8℃；
2、溶液配制
1)稀释剂：称量乙酸铵约0.5～1.5g，加水溶解，并用氨水调pH至6.0～8.0，混匀；
2)供试品溶液：取注射用头孢西丁钠样品适量，加稀释剂溶解并定量稀释制成浓度约为3-7mg/ml的溶液；
3)对照溶液a：精密量取供试品溶液适量，用稀释剂定量稀释制成浓度约为30-70μg/ml的溶液；
4)对照溶液b：精密量取对照溶液a适量，用稀释剂定量稀释制成浓度约为0.3-0.7μg/ml的溶液；
5)对照溶液c：取样品约225-275mg，精密称定，置50mL量瓶中，加0.1N盐酸溶液4-6mL，室温下放置1小时后，加入0.1N氢氧化钠溶液4-6mL中和，加稀释剂稀释至刻度，超声25-35分钟，摇匀，即得对照溶液c；
3、系统适用性要求及限度
1)在上述色谱条件下，精密吸取稀释剂、供试品溶液、对照溶液b、对照溶液c各20μL～50μL，分别注入液相色谱仪，记录色谱图；<...

【专利技术属性】
技术研发人员：步显坤，史清华，李阳，王惠琳，鄂一丹，相宇，
申请(专利权)人：沈阳三九药业有限公司，
类型：发明
国别省市：辽宁;21