粘膜粘附脂质递送系统技术方案

描述了用于增强对所选择的抗原的诸如粘膜免疫应答之类的免疫应答的方法和组合物。该方法可用于治疗和预防微生物感染，如由细菌、病毒、真菌和寄生虫引起的感染。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】粘膜粘附脂质递送系统
本专利技术总体上涉及用于增强对抗原的免疫应答的组合物。具体地，本专利技术涉及使用粘膜粘附阳离子脂质载体递送的组合佐剂组合物，用作疫苗佐剂来刺激粘膜免疫。
技术介绍
杀死的疫苗或亚单位疫苗通常免疫原性较差，并且可能导致弱和短暂的T细胞应答，因此需要佐剂来增强免疫应答。因此，佐剂是许多疫苗的关键组分。它们用于改善疫苗的免疫原性，目的是赋予长期保护，增强疫苗在新生儿、老年人或免疫功能低下者中的功效，并且减少抗原的量或引起有效免疫所需的剂量。然而，许多目前可获得的疫苗包括佐剂，这些佐剂在诱导免疫反应的质量和程度上都不理想。例如，明矾是美国少数批准用于人体的佐剂之一，诱导良好的Th2型免疫应答，但不是用于Th1型免疫应答的有效佐剂(HogenEschetal.，Vaccine(2002)20Suppl3：S34-39)。因此，需要另外的有效且更安全的佐剂。现在广泛认识到，尤其是对于呼吸道疾病，诱导局部和全身免疫两者可以显著提高保护水平。粘膜给药(诸如，鼻内递送)的优点在于能诱导局部和全身免疫，而肌内免疫仅诱导全身免疫。事实上，现在在人类和动物两者中通过粘膜给药越来越多的疫苗被。为了使鼻内疫苗有效，必须将疫苗以粘附于鼻粘膜并且可以渗透到粘膜本身的载体中递送，并且此外，要使佐剂的免疫刺激作用最大化。最近，开发了一种包含三种组分的组合佐剂平台：(1)免疫刺激分子，诸如，CpG或聚(I:C)(聚肌苷酸-聚胞苷酸)；(2)聚磷腈，诸如，聚[二(羧酰苯氧基钠)磷腈](PCPP)或聚(二-4-氧基苯基丙酸酯)磷腈(PCEP)(作为钠盐或呈酸性形式)；以及(3)能够杀死广谱微生物的抗微生物分子，称为“宿主防御肽”。例如，参见美国专利第9,408,908和9,061,001号，通过引用以其全文结合在此。三重佐剂形成稳定的复合物，并且已证实在肌内或皮下给药后，在广泛的人类和动物疫苗中被证明是高度有效的。参见，例如，Garg等，J.Gen.Virol.(2014)95:301-306。当与各种疫苗抗原一起使用时，这种三重佐剂组合物诱导有效的长期体液和细胞免疫。此外，佐剂平台适合于母体免疫，并且甚至在母体抗体的存在下，在新生儿中也是高度有效的。然而，通过鼻途径最大化粘膜免疫的功效仍然需要增强。尽管佐剂技术取得了各种进展，但是仍然需要安全和有效的方法来预防感染性疾病。因此，非常需要用于粘膜免疫的新的佐剂递送方法的广泛可用性。
技术实现思路
本专利技术部分地基于以下发现：组合佐剂的使用，包括用粘膜粘附阳离子脂质载体配制的宿主防御肽、聚阴离子聚合物(诸如，聚磷腈)、具有免疫刺激特性(ISS)的核酸序列(诸如，聚(I:C))，当肌内或粘膜递送时，与未观察到的那些组分相比，对共同给药抗原提供了显著更高的抗体滴度。佐剂组合物提供了一种安全且有效的方法，该方法用于增强用于预防性和治疗性组合物两者的多种疫苗抗原的免疫原性。因此，在一个实施方式中，提供了一种粘膜粘附脂质载体系统。粘膜粘着剂脂质载体系统包含三重佐剂组合物，该三重佐剂组合物包含用粘膜粘附脂质载体配制的宿主防御肽、免疫刺激序列和聚阴离子聚合物。粘膜粘附脂质载体系统能够增强对所选择的抗原的免疫应答。在某些实施方式中，当粘膜给药时，粘膜粘附剂脂质载体系统能够增强免疫应答。在一些实施方式中，当肌内给药时，粘膜粘附剂脂质载体系统能够增强免疫应答。在某些实施方式中，系统的粘膜粘附脂质载体包括阳离子脂质体，诸如，但不限于粘膜粘附阳离子脂质载体，该粘膜粘附阳离子脂质载体包括选自以下的一种或多种阳离子脂质：1,2-二油酰基-3-三甲基铵-丙烷(DOTAP)；3β-[N-(N’,N’-二甲基氨基乙烷)-氨甲酰基](DC)；二甲基双十八烷基铵(DDA)；十八烷基胺(SA)；二甲基双十八烷基溴化铵(DDAB)；1,2-二油酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺(DOPE)；卵L-α-磷脂酰胆碱(EPC)；胆固醇(Chol)；二硬脂酰磷脂酰胆碱(DSPC)；1,2-二肉豆蔻酰基-3-三甲基铵-丙烷(DMTAP)；二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱(DMPC)；或神经酰胺氨基甲酰基-精胺(CCS)。在另外实施方式中，系统的粘膜粘附脂质体由DDAB和DOPE；DDAB、EPC和DOPE；SA和Chol；EPC和Chol；或SA/EPC和Chol组成。在另外实施方式中，粘膜粘附脂质载体系统的宿主防御肽是IDR-1002(SEQIDNO:19)。在另外实施方式中，粘膜粘附脂质载体系统的免疫刺激序列是聚肌苷酸-聚胞苷酸(聚(I:C))或CpG。在另外实施方式中，粘膜粘附脂质载体系统的聚磷腈是聚(二-4-氧基苯基丙酸酯)磷腈(PCEP)，诸如，PCEP的钠盐。在另外实施方式中，粘膜粘附脂质载体系统包含来自侵入粘膜组织的病原体的抗原，诸如，抗原来自病毒、细菌、寄生虫或真菌。在又一另外实施方式中，提供了一种粘膜粘附阳离子脂质载体系统。阳离子脂质载体系统包含(a)DDAB和DOPE；DDAB、EPC和DOPE；SA和Chol；EPC和Chol；或SA/EPC和Chol；(b)IDR-1002(SEQIDNO:19)；(c)聚(I:C)；(d)PCEP(诸如，PCEP的钠盐)；以及(e)抗原，该抗原来自侵袭粘膜组织的病原体。在某些实施方式中，抗原来自病毒、细菌、寄生虫或真菌。在另外实施方式中，提供了一种组合物，该组合物包括如在此所描述的粘膜粘附脂质载体系统；以及药学上可接受的赋形剂。在某些实施方式中，组合物中的粘膜粘附脂质载体系统的平均直径小于200纳米。在另外实施方式中，提供了一种增强对所选择的抗原的免疫应答的方法。方法包括向受试者给药组合物；以及所选择的抗原。在某些实施方式中，给药通过粘膜进行。在某些实施方式中，给药通过鼻内进行。在某些实施方式中，给药通过肌内进行。结合在本文的公开内容，本领域的普通技术人员将容易地想到本专利技术的这些和其他实施方式。附图说明图1示出通过ζ电位评估的脂质三重佐剂颗粒(L-TriAdj)在24小时内的稳定性。数据表示平均值+/-SD(n＝3)。图2示出使用DDAB/DOPE50:50和各种组合物的粘蛋白结合研究的结果，如实施例中所描述。图3示出使用DDAB/DOPE75:25和各种组合物的粘蛋白结合研究的结果，如实施例中所描述。图4示出使用DDAB/EggPC/DOPE40:50:10和各种组合物的粘蛋白结合研究的结果，如实施例中所描述。图5示出使用EggPC/Chol90:10和各种组合物的粘蛋白结合研究的结果，如实施例中所描述。图6示出MTS细胞毒性测定的结果，其中TriAdj含量恒定在0.5:1:0.5(μg:μg:μg)/孔，如实施例中所描述。图7示出MTS细胞毒性测定的结果，其中TriAdj含量恒定在0.25:0.5:0.25μg:μg:μg/孔，如实施例中所描述。图8A至图8J示出鼻内给药后在动物中获得的免疫应答，如实施例中所描述。图8A和图本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种粘膜粘附脂质载体系统，包含：三重佐剂组合物，所述三重佐剂组合物包含用粘膜粘附脂质载体配制的宿主防御肽、免疫刺激序列和聚阴离子聚合物，其中，所述粘膜粘附脂质载体系统能够增强对所选择的抗原的免疫应答。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20180920 US 62/733,8811.一种粘膜粘附脂质载体系统，包含：三重佐剂组合物，所述三重佐剂组合物包含用粘膜粘附脂质载体配制的宿主防御肽、免疫刺激序列和聚阴离子聚合物，其中，所述粘膜粘附脂质载体系统能够增强对所选择的抗原的免疫应答。


2.根据权利要求1所述的粘膜粘附脂质载体系统，其中，当粘膜给药时，所述粘膜粘附脂质载体系统能够增强对所选择的抗原的免疫应答。


3.根据权利要求1所述的粘膜粘附脂质载体系统，其中，当肌内给药时，所述粘膜粘附脂质载体系统能够增强对所选择的抗原的免疫应答。


4.根据权利要求1至3中任一项所述的粘膜粘附脂质载体系统，其中，所述系统的所述粘膜粘附脂质载体包括阳离子脂质体。


5.根据权利要求1至4中任一项所述的粘膜粘附脂质载体系统，其中，所述粘膜粘附脂质载体包括选自以下的一种或多种阳离子脂质：1,2-二油酰基-3-三甲基铵-丙烷(DOTAP)；3β-[N-(N',N'-二甲基氨基乙烷)-氨甲酰基](DC)；二甲基双十八烷基铵(DDA)；十八烷基胺(SA)；二甲基双十八烷基溴化铵(DDAB)；1,2-二油酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺(DOPE)；卵L-α-磷脂酰胆碱(EPC)；胆固醇(Chol)；二硬脂酰磷脂酰胆碱(DSPC)；1,2-二肉豆蔻酰基-3-三甲基铵-丙烷(DMTAP)；二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱(DMPC)；或神经酰胺氨基甲酰基-精胺(CCS)。


6.根据权利要求5所述的粘膜粘附脂质载体系统，其中，所述脂质载体包括DDAB和DOPE；DDAB、EPC和DOPE；SA和Chol；EPC和Chol；或SA/EPC和Chol。


7.根据权利要求1至6中任一项所述的粘膜粘附脂质载体系统，其中，所述宿主防御肽是IDR-1002(SEQIDNO:19)。


8.根据权利要求1至7中任一项所述的粘膜粘附脂质载体系统，其中，所述免疫刺激序列是聚肌苷酸-聚胞苷酸(聚(I:C))或CpG。


9.根...

【专利技术属性】
技术研发人员：艾伦·K·华森，基什·M·华森，沃科·哲茨，斯塔西·斯特姆，
申请(专利权)人：萨斯喀彻温大学，
类型：发明
国别省市：加拿大;CA