本发明专利技术涉及功能微生物筛选与应用技术领域，提供了一种防控禽肠炎的枯草芽孢杆菌及其应用。所述枯草芽孢杆菌已于2019年6月6日保藏于中国武汉武汉大学的中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：M2019437。所述枯草芽孢杆菌对产气荚膜梭菌和球虫导致的肉鸡肠道性炎症有良好的预防效果，可广泛应用于家禽养殖领域。
【技术实现步骤摘要】
一种防控禽肠炎的枯草芽孢杆菌及其应用
本专利技术涉及功能微生物筛选与应用
，具体涉及一种防控禽肠炎的枯草芽孢杆菌及其应用。
技术介绍
肠道健康是家禽高效生产的重要保障，但在细菌耐药性日益严重和无抗养殖的双重压力下，家禽肠道问题更加突出。尤其是在我国家禽养殖业转型升级时期，饲养管理与疫病防控水平相对滞后于规模化和集约化的进程，家禽养殖场肠道疫病发生率居高不下。危害家禽肠道健康的病原菌主要包括大肠杆菌、沙门菌、葡萄球菌、空肠弯曲菌、产气荚膜梭菌等，这些病原引发的疫病造成的急性死亡或隐性感染严重危害家禽健康，导致生产能力降低，甚至导致死亡。益生菌是一类具有生物活性和对宿主健康有益的微生物，并因其无污染、无毒及无不良反应、抗菌保健和促生长等特点，成为继抗生素之后的新型添加剂。益生菌可通过调节肠道微生物组成发挥抑制病原菌作用。益生菌通常能与肠黏膜上皮细胞结合，占据致病菌肠黏膜上皮细胞结合位点，竞争性抑制宿主肠道病原菌的黏附，从而能够保护肠粘膜，降低肠道致病菌感染的风险。益生菌定植于肠道，刺激肠粘膜上皮细胞，促进局部粘膜组织生长发育，有助于维持肠黏膜屏障功能。胡勇等从健康鸡粪便中共分离出41株益生菌株，并从中筛选出对肠道沙门氏菌有较强颉颃作用的益生菌株4株，其中1菌株同时具有较强的耐酸、耐胆盐特性和较好的疏水性能，有望作为潜在的颉颃性饲用益生菌用于控制鸡的肠炎沙门氏菌感染。王佰魁等进行了益生菌对肉鸡产气荚膜梭菌进行攻毒的保护效果研究，发现植物乳杆菌和多粘芽孢杆菌可通过抑制产气荚膜梭菌的生长，提高鸡巨噬细胞的吞噬和免疫功能，改善肉鸡肠道菌群结构、微生物功能及黏膜结构等，降低产气荚膜梭菌感染引起的负面效应。黄晨轩等研究表明饲粮中添加1‰复合微生态制剂可提高蛋鸡后期的养分消化率和免疫能力，改善肠道菌群结构，改善机体健康。张雷等研究发现通过饮水给与复合微生态制剂能够提高雏鸡的平均体重，显著增加鸡的胸腺指数和法氏囊指数，并促进十二指肠和盲肠内乳酸杆菌和双歧杆菌增殖。研究显示微生态制剂的主要作用是维持肠道内菌群平衡，而肠道也是体内淋巴细胞主要聚集的器官，在机体免疫中起到了至关重要的作用，特别是对肠道感染的细菌具有显著的抑制作用。微生态制剂在家禽生产中已经广泛使用，但目前仅作为改善家禽肠道健康，提升饲料报酬和防治疾病的辅助手段。因为微生态制剂只能部分替代抗生素作用，和敏感抗菌药相比，其抗感染作用还有一定差距。并且微生态制剂在使用过程中起效慢及需长时间连续使用等缺点。因此，益生菌优良菌株的筛选、多种活性成份的配合、益生菌在机体消化代谢、免疫调节、疫病防治等方面的作用机制等仍需深入研究。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种用于防控禽肠炎的枯草芽孢杆菌及其应用。所述枯草芽孢杆菌对产气荚膜梭菌和球虫导致的肉鸡肠道性炎症有良好的预防效果，可广泛应用于家禽养殖领域。本专利技术一方面提供了一株枯草芽孢杆菌VB236（BacillussubtilisVB236），已于2019年6月6日保藏于中国武汉武汉大学的中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCCM2019437。本专利技术一方面提供了一种用于预防或治疗家禽肠炎的组合物。所述组合物包含上述枯草芽孢杆菌VB236。所述组合物还包含地衣芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌，凝结芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、丁酸梭菌、屎肠球菌、乳酸菌、粪肠球菌、植物乳杆菌、干酪乳杆菌、鼠李糖乳杆菌中的任意一种或多种的组合。所述组合物中枯草芽孢杆菌VB236的活菌量不低于109CFU/g。本专利技术还提供了一种饲料添加剂，包含上述组合物。本专利技术还提供了所述饲料添加剂在家禽养殖中的应用。本专利技术所述枯草芽孢杆菌VB236对大肠杆菌、产气荚膜梭菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌和鸡源产气荚膜梭菌等多种病原菌均具有显著的抑制效果，尤其是对鸡源产气荚膜梭菌的抑制能力最强，抑菌圈直径达到23.5mm。该菌株对球虫的抑制效果非常突出，能够显著降低球虫引起的鸡胚死亡，抑制球虫在鸡胚内的增殖，每胚卵囊量比对照组减少了94.3%，取得了意料不到的效果。本专利技术提供的枯草芽孢杆菌VB236抗逆性强，在人工胃液和肠液中1h和2h后的存活率均为100%。该菌株可有效防控鸡源产气荚膜梭菌、大肠杆菌等常致病菌引起的家禽肠道疾病以及鸡球虫病，显著降低肠道损伤，同时能够改善家禽的粪便状态、提高生产性能，可广泛应用于家禽养殖领域。说明书附图图1为VB236菌株的菌落形态图；图2为VB236菌株蛋白质谱峰图；图3为VB236菌株基因指纹图谱。具体实施方式下面结合具体实施例进一步阐述本专利技术。对于实施例中所用到的具体方法或材料，本领域技术人员可以在本专利技术技术思路的基础上，根据已有的技术进行常规的替换选择，而不仅限于本专利技术实施例的具体记载。本专利技术所选用的设备和试剂可以选自市售任意一种。实施例1菌株分离与筛选1、样品来源：山东省潍坊市高密养殖场肉鸡肠道粪便。2、菌株分离与筛选：称取粪便样品1g，置于9mL无菌生理盐水中，在30℃，200rpm，处理10min，得到菌悬液；将菌悬液置于80℃水浴锅中，处理10min，取出，迅速冷却；将处理后的菌悬液以10倍梯度稀释至合适浓度，取100uL于营养琼脂平板上，涂抹均匀，37℃培养16-24h；挑取营养琼脂平板上已培养好的不同单菌落，进一步划线2次，纯化获得单菌株。申请人从中选取了5株单菌，分别命名为A、B、C、D、E。将柔嫩艾美耳球虫子孢子液分别与5株菌的菌液上清等体积混合，37℃孵育1h后接种9日龄SPF鸡胚，尿囊腔注射，每枚鸡胚0.2mL，每个样品接种10枚，置于37℃培养箱中进行孵育。每天照胚检查鸡胚存活情况。存活鸡胚啄壳后，收集胚体的绒毛尿囊膜于100mL2.5%重酪酸钾溶液中，用高通量组织研磨器破碎后，经100目纱网过滤，取10mL滤液，3000r/min离心10min，弃去上清，加入4mL饱和盐水，用麦氏虫卵计数板计卵囊数。具体结果见表1。表1不同菌株抑菌圈及球虫卵囊计数结果菌株存活/总胚数卵囊总量每胚卵囊量A6/101.5×10525×103B6/101.38×10523×103C5/101.15×10523×103D7/103.23×1044.7×103E9/101.26×1041.4×103从表1的结果可以看出，本专利技术筛选到的五株菌中E菌株接种的鸡胚成活率最高，达90%，而且每胚中球虫的卵囊数最少。从而说明该菌株对球虫有很强的抑制作用，能够显著降低球虫引起的鸡胚死亡，抑制球虫在鸡胚内的增殖。申请人将E菌株命名为VB236，并对其进一步评价本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一株枯草芽孢杆菌，其特征在于，所述枯草芽孢杆菌的保藏编号为CCTCC NO：M2019437。/n
【技术特征摘要】
1.一株枯草芽孢杆菌，其特征在于，所述枯草芽孢杆菌的保藏编号为CCTCCNO：M2019437。
2.一种用于预防或治疗家禽肠炎的组合物，其特征在于，所述的组合物包含权利要求1所述的枯草芽孢杆菌。
3.如权利要求2所述的组合物，其特征在于，所述的组合物还包含地衣芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌，凝结芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、丁酸梭菌、屎肠球菌、乳酸...
【专利技术属性】
技术研发人员：彭虹旎，凌红丽，李宁，周英俊，孙文丽，梁莉，牛庆奎，
申请(专利权)人：山东康地恩生物科技有限公司，山东蔚蓝生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：山东;37
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