抗Cyclophilin A的单克隆抗体及其在治疗炎症中的应用制造技术

本发明专利技术公开了抗Cyclophilin A的单克隆抗体或其抗原结合部分及其应用。该单克隆抗体或其抗原结合部分含有名称为V

【技术实现步骤摘要】
抗CyclophilinA的单克隆抗体及其在治疗炎症中的应用
本专利技术涉及生物医学
，尤其是涉及抗CyclophilinA的单克隆抗体及其在治疗炎症中的应用。
技术介绍
CyclophilinA（亲环素A，CypA）具有肽基脯氨酰顺/反异构酶活性，是一种在生物界广泛存在、高度保守的蛋白质。CypA广泛分布在细胞内，当细胞受到外界刺激或处于活性氧应激状态时，也能够分泌到细胞外。CypA是免疫抑制药物CyclosporinA（环孢菌素A，CsA）在细胞内的主要受体。CypA-CsA复合物与钙调磷酸酶结合后，能够抑制T细胞的活化。CypA还参与细胞凋亡、转录调控、信号转导、病毒复制等多种生物学过程。CypA在炎症调控中也发挥了重要作用。将CypA在细胞外作用于小鼠骨髓来源的巨噬细胞后，IL-1β、IL-6、TNFα等促炎细胞因子的表达水平显著升高。CypA还有助于维持细胞内核转录因子-κB(NF-κB)p65亚基的稳定性，并促进p65入核，从而促进IL-6等促炎细胞因子的表达。在心血管系统炎症动脉粥硬化发生过程中，CypA表达显著增加，从而促进白细胞迁移，并诱导MMP-9、IL-6与TNF-α的表达。另外，脂多糖（LPS）诱导的急性肺损伤、脓毒血症、系统性红斑狼疮等炎症相关疾病的发生过程中，均可观察到CypA与炎症的联系。因此，有必要利用特异性抗体拮抗CypA的作用并抑制CypA调控的相关信号通路，促进其在病毒、细菌等因素诱发的炎症相关疾病治疗中的应用。
技术实现思路
本专利技术提供了抗CypA单克隆抗体或其抗原结合部分，所述单克隆抗体或其抗原结合部分含有名称为VH的重链可变区和名称为VL的轻链可变区，所述VH和VL均由决定簇互补区和框架区组成；所述VH和所述VL的决定簇互补区均由CDR1、CDR2和CDR3组成；所述VH的CDR1的氨基酸序列如SEQIDNo.1中第11位-第18位所示；所述VH的CDR2的氨基酸序列如SEQIDNo.1中第36位-第42位所示；所述VH的CDR3的氨基酸序列如SEQIDNo.1中第81位-第94位所示；所述VL的CDR1的氨基酸序列如SEQIDNo.2中第28位-第38位所示；所述VL的CDR2的氨基酸序列如SEQIDNo.2中第56位-第58位所示；所述VL的CDR3的氨基酸序列如SEQIDNo.2中第95位-第103位所示。其中所述重链可变区和轻链可变区的框架区可为鼠源或人源化的。所述单克隆抗体还可包含恒定区，并且所述恒定区是鼠源或人源化的。所述抗原结合部分可选自Fab片段、Fab’片段、F(ab’)2片段、Fv片段、sc-Fv和双体中的至少一种。“Fab片段”包含一条轻链以及一条重链的CH1和可变区。Fab分子的重链不能与另一个重链分子形成二硫键。“Fab’片段”含有一条轻链以及一条重链的部分或片段，所述部分或片段含有VH结构域和CH1结构域以及在CH1和CH2结构域之间的区域。“F(ab’)2片段”含有两条轻链和两条重链，所述重链含有在CH1和CH2结构域之间的恒定区的一部分，使得在两条重链之间形成链间二硫键。F(ab’)2片段因而由两个Fab’片段组成，而两个Fab’片段通过两条重链之间的二硫键连接在一起。“Fv片段”包含来自重链和轻链的可变区，但是缺少恒定区。“单链Fv”或“scFv”，是指包含抗体的VH结构域和VL结构域的抗体片段，其中这些结构域以单一多肽链形式存在。通常，Fv多肽还包含VH结构域和VL结构域之间的多肽接头，所述接头使scFv能够形成期望的结构以进行抗原结合。“双体”指具有两个抗原结合位点的小抗体片段，所述片段在同一多肽链中包含重链可变结构域(VH)和与之连接的轻链可变结构域(VL)(VH-VL或VL-VH)。通过使用短得不能让同一链上的两个结构域之间发生配对的接头，各结构域被迫与另一条链的互补结构域发生配对，从而产生两个抗原结合位点。可选地，根据上述的单克隆抗体或其抗原结合部分，所述单克隆抗体是下述任一种：a）由上述的VH和上述的VL连接得到的单链抗体；b）含有a）所述单链抗体的融合抗体；c）含有上述的VH和上述的VL的Fab；d）含有上述的VH和上述的VL的完整抗体；e）由保藏号为CGMCCNo.21909的杂交瘤细胞系QH01产生的单克隆抗体。本专利技术还提供了与上述的单克隆抗体或其抗原结合部分相关的生物材料，所述生物材料为B1）至B17）中的任一种：B1）编码上述的单克隆抗体或其抗原结合部分的核酸分子；B2）含有B1）所述核酸分子的表达盒；B3）含有B1）所述核酸分子的重组载体；B4）含有B2）所述表达盒的重组载体；B5）含有B1）所述核酸分子的重组微生物；B6）含有B2）所述表达盒的重组微生物；B7）含有B3）所述重组载体的重组微生物；B8）含有B4）所述重组载体的重组微生物；B9）含有B1）所述核酸分子的动物细胞系；B10）含有B2）所述表达盒的动物细胞系；B11）含有B3）所述重组载体的动物细胞系；B12）含有B4）所述重组载体的动物细胞系；B13）含有B1）所述核酸分子的植物细胞系；B14）含有B2）所述表达盒的植物细胞系；B15）含有B3）所述重组载体的植物细胞系；B16）含有B4）所述重组载体的植物细胞系；B17）产生上述的单克隆抗体的动物细胞系。B9）和/或B17）动物细胞系例如为保藏号为CGMCCNo.21909的杂交瘤细胞系QH01。可选地，根据上述的生物材料，B1）所述核酸分子为编码上述的单克隆抗体或其抗原结合部分的基因。所述基因可为如下A）或B）所述的DNA分子：A）所述VH的CDR1的编码序列如SEQIDNo.3中第31位-第54位所示，所述VH的CDR2的编码序列如SEQIDNo.3中第106位-第126位所示，所述VH的CDR3的编码序列如SEQIDNo.3中第241位-第282位所示；所述VL的CDR1的编码序列如SEQIDNo.4中第82位-第114位所示，所述VL的CDR2编码序列如SEQIDNo.4中第166位-第174位所示，所述VL的CDR3的编码序列如SEQIDNo.4中第283位-第309位所示；B）与A）限定的DNA分子具有90％以上的同一性且编码所述单克隆抗体或其抗原结合部分的DNA。上述生物材料中，B2）所述的表达盒，是指能够在宿主细胞中表达所述单克隆抗体或其抗原结合部分的DNA，该DNA不但可包括启动所述单克隆抗体或其抗原结合部分基因转录的启动子，还可包括终止所述单克隆抗体或其抗原结合部分基因转录的终止子。进一步，所述表达盒还可包括增强子序列。可用现有的表达载体构建含有所述单克隆抗体基因表达盒的重组载体。上述生物材料中，所述载体可为质粒、黏粒、噬本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.CypA单克隆抗体或其抗原结合部分，其特征在于：所述单克隆抗体或其抗原结合部分含有名称为V

【技术特征摘要】
1.CypA单克隆抗体或其抗原结合部分，其特征在于：所述单克隆抗体或其抗原结合部分含有名称为VH的重链可变区和名称为VL的轻链可变区，所述VH和VL均由决定簇互补区和框架区组成；所述VH和所述VL的决定簇互补区均由CDR1、CDR2和CDR3组成；
所述VH的CDR1的氨基酸序列如SEQIDNo.1中第11位-第18位所示；
所述VH的CDR2的氨基酸序列如SEQIDNo.1中第36位-第42位所示；
所述VH的CDR3的氨基酸序列如SEQIDNo.1中第81位-第94位所示；
所述VL的CDR1的氨基酸序列如SEQIDNo.2中第28位-第38位所示；
所述VL的CDR2的氨基酸序列如SEQIDNo.2中第56位-第58位所示；
所述VL的CDR3的氨基酸序列如SEQIDNo.2中第95位-第103位所示。


2.根据权利要求1所述的单克隆抗体或其抗原结合部分，其特征在于：所述单克隆抗体是下述任一种：
a）由权利要求1所述的VH和权利要求1所述的VL连接得到的单链抗体；
b）含有a）所述单链抗体的融合抗体；
c）含有权利要求1所述的VH和权利要求1所述的VL的Fab；
d）含有权利要求1所述的VH和权利要求1所述的VL的完整抗体；
e）由保藏号为CGMCCNo.21909的杂交瘤细胞系QH01产生的单克隆抗体。


3.与权利要求1或2所述的单克隆抗体或其抗原结合部分相关的生物材料，所述生物材料为B1）至B17）中的任一种：
B1）编码权利要求1或2所述的单克隆抗体或其抗原结合部分的核酸分子；
B2）含有B1）所述核酸分子的表达盒；
B3）含有B1）所述核酸分子的重组载体；
B4）含有B2）所述表达盒的重组载体；
B5）含有B1）所述核酸分子的重组微生物；
B6）含有B2）所述表达盒的重组微生物；
B7）含有B3）所述重组载体的重组微生物；
B8）含有B4）所述重组载体的重组微生物；
B9）含有B1）所述核酸分子的动物细胞系；
B10）含有B2）所述表达盒的动物细胞系；
B11）含有B3）所述重组载体的动物细胞系；
B12）含有B4）所述重组载体的动物细胞系；
B13）含...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘文军，孙蕾，栾晓晗，白晓园，杨文贤，范文辉，张鹤，
申请(专利权)人：中国科学院微生物研究所，
类型：发明
国别省市：北京;11