本发明专利技术提供一种新型冠状病毒(2019‑nCoV)抗原表位，所述抗原表位为编码1D1‑30抗原表位的短肽。本发明专利技术所述抗原表位可以与nCoV反应，而不与其它肺部感染性冠状病毒等发生反应，也不与正常人血清发生反应。所述抗原表位在新型冠状病毒(2019‑nCoV)免疫检测和中和抗体设计中的应用，该应用使得新型冠状病毒(2019‑nCoV)抗体诊断抗原可以用普通化学合成方法制备，相比基因工程重组表达蛋白做为诊断抗原，合成抗原工艺简便，纯度更高。
【技术实现步骤摘要】
新型冠状病毒（2019-ncov）抗原表位、抗体及其应用相关申请的交叉引用本申请要求2020年2月12日提交的中国专利申请202010089222.0的优先权，所述申请的公开内容均援引加入本文。
本专利技术属于生物
，具体涉及一种新型冠状病毒(2019-nCoV)蛋白质的抗原表位、抗体及其应用。
技术介绍
冠状病毒(Coronaviruses，CoVs)是一组高度多样化的、包膜的、正向单链RNA病毒，其基因组为26-32kilobases(kb)，是基因组规模最大的RNA病毒。冠状病毒(coronavirus，CoV)属巢状病毒目，冠状病毒科，分为本α、β、γ三个属，其中α、β属仅对哺乳动物致病，γ属主要引起鸟类感染。CoV主要通过直接接触分泌物或经气溶胶、飞沫传播，也有证据表明可经粪口途径传播。目前已经发现引起人类呼吸道疾病的人冠状病毒(HCoV)已达7种：HCoV-229E、HCoV-OC43、SARS-CoV、HCoV-NL63、HCoV-HKU1、MERS-CoV和新型冠状病毒(2019-nCoV)。基因组序列分析发现，新型冠状病毒(2019-nCoV)与目前发现的感染人肺部的其余六种冠状病毒(HCoV-229E、HCoV-OC43、SARS-CoV、HCoV-NL63、HCoV-HKU1、MERS-CoV)具有一定的序列同源性，其中与SARS的核酸序列同源性最高(约79.5％sequenceidentity)，与MERS次之(约50％sequenceidentity)，而与其余的四种冠状病毒的同源性低于40％。新型冠状病毒(2019-nCoV)编码了ORF1abpolyprotein(GeneID:43560238)、S(surfaceglycoprotein,GeneID:43560230)、ORF3protein(GeneID:43560231)、envelopeprotein(GeneID:43560232)、membraneglycoprotein(GeneID:43560233)、ORF6protein(GeneID:43560234)、ORF7protein(GeneID:43560235)、ORF8protein(GeneID:43560236)和N(nucleocapsidphosphoprotein,GeneID:43560237)等。用于CoV物种分类的ORF1ab中7个保守的复制酶区域，nCoV-2019和SARS-CoV之间的氨基酸序列一致率为94.6％，表明两者属于同一物种。冠状病毒的生命周期(lifecycle)分为几个步骤：粘附和入胞、病毒复制酶的翻译、基因组转录和复制、结构蛋白的翻译以及病毒体的组装和分泌。冠状病毒CoV附着于细胞受体蛋白质，诱导胞吞作用而完成入胞；然后病毒内体(endosome)中将核衣壳释放到细胞质中；随后将基因组RNA(gRNA)作为多蛋白ORF1a和ORF1b的翻译模板，这些蛋白被切割形成非结构蛋白(Nonstructuralproteins，NSPs)。NSPs能够诱导细胞膜重排以形成双膜囊泡(double-membranevesicles，DMV)，病毒复制转录复合物(coronavirusreplicationtranscriptioncomplex，RTC)锚定在DMV中。全长gRNA通过负链完成复制，并转录合成亚基因组RNA(sgRNA)，然后利用sgRNA来编码病毒结构蛋白和辅助蛋白。病毒颗粒的组装(assembly)发生在内质网-高尔基中间体(ERGIC)中，成熟的病毒颗粒最终通过囊泡分泌到胞外。在大多数急性感染性疾病病中，有两种主要的表现形式，即显性感染和隐性感染。(1)显性感染者就是病人。当感染者的机体抵抗力下降或者感染的病原体数量多、毒力强时，病原体会在人体内大量增殖，通过释放毒素或引起人体免疫反应使感染者表现出明显的相同或不同临床症状，同时不断将病原体排出体外，成为重要的传染源。(2)隐性感染即无症状感染者。当被感染者机体的抵抗力较强，或感染的病原体数量较少、毒力较弱时，人体感染后经过最长潜伏期也没有出现明显症状和体征，即为无症状感染者。但无症状感染者仍可在一定时间内排出少量病原体，成为传染源传播疾病。目前发现，新型冠状病毒(nCoV-2019)存在显性感染和隐性感染，无症状感染者已经多例作为传染源的报道。新型冠状病毒(2019-nCoV)感染肺炎平均潜伏期为5.2天，第95百分位数为12.5天。由一人传至另一人的平均时间为7.5天(5.3～19天)。目前，针对新型冠状病毒(2019-nCoV)的检测方法主要是核酸检测。核酸检测的基本流程是采样→保存送样→病毒灭活→裂解核酸提取→荧光定量PCR检测等。为避免检测过程的交叉污染和生物安全等，核酸检测要在有条件和资质的实验室进行，对场地要求比较高；需要专门的核酸提取和定量PCR仪等专业设备和专门的经过培训的检测人员，很多的基层医疗机构难以开展；检测通量比较有限，出具报告的时间较长。另外，核酸检测对于阳性病人存在“假阴性”，即有些患者核酸检测结果为阴性，却在临床上被确认为疑似新冠肺炎。阴性检测结果可能意味着一个人没有被感染；但是，这也可能意味着感染尚未发展到足以被检测到的程度。因此迫切需要开发新的新型冠状病毒(2019-nCoV)检测方法。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供新型冠状病毒(2019-nCoV)的抗原表位。本专利技术抗原表位具有极高的特异性和稳定性，可以与CSFV反应，而不与pCold-TF空载体发生反应，也不与Vero细胞发生反应。本专利技术新型冠状病毒(2019-nCoV)的抗原表位序列如表1所示。表1.新型冠状病毒(2019-nCoV)的抗原表位序列上述新型冠状病毒(2019-nCoV)的抗原表位或编码上述新型冠状病毒(2019-nCoV)的抗原表位肽及其组合在新型冠状病毒(2019-nCoV)免疫检测试剂中的应用。上述新型冠状病毒(2019-nCoV)编码蛋白质抗原表位肽在病毒免疫检测种的应用，以获得的抗原表位作为参考化学合成抗原，以合成抗原制备试剂盒主要组分抗原包被板，按常规方法制备试剂盒其他组分，使用试剂盒检测血清中新型冠状病毒(2019-nCoV)抗体。上述新型冠状病毒(2019-nCoV)的抗原表位在制备检测抗新型冠状病毒(2019-nCoV)抗体或者抗新型冠状病毒(2019-nCoV)多肽抗体试剂盒中的应用。一种检测新型冠状病毒(2019-nCoV)感染的中和性抗体，包含上述新型冠状病毒(2019-nCoV)的抗原表位。上述新型冠状病毒(2019-nCoV)的抗原表位或编码新型冠状病毒(2019-nCoV)的抗原表位的基因在制备治疗新型冠状病毒(2019-nCoV)药物中的应用。一种疫苗组合物，包含上述新型冠状病毒(2019-nCoV)的抗原表位。进一步，上述疫苗组合物还包含可药用佐剂。有益效果：本专利技术提供新型冠状病毒(2019-nCoV)抗原表位本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.新型冠状病毒(2019-nCoV)的抗原表位序列如表1所示氨基酸序列；/n表1.新型冠状病毒(2019-nCoV)的抗原表位序列/n
【技术特征摘要】
20200212 CN 20201008922201.新型冠状病毒(2019-nCoV)的抗原表位序列如表1所示氨基酸序列；
表1.新型冠状病毒(2019-nCoV)的抗原表位序列
2.如权利要求1所述新型冠状病毒(2019-nCoV)的抗原表位或编码上述新型冠状病毒(2019-nCoV)的抗原表位肽及其组合在新型冠状病毒(2019-nCoV)免疫检测试剂中的应用。
3.如权利要求1所述新型冠状病毒(2019-nCoV)编码蛋白质抗原表位肽在病毒免疫检测中的应用。
4.如如权利要求3所述应用，其特征在于：以获得的抗原表位作为参考化学合成抗原，以合成抗原制备试剂盒抗原包被板，按常规方法制备试剂盒其他组分，使用试剂盒检测血清中新型冠状病毒(...
【专利技术属性】
技术研发人员：黄爱龙，刘萍，汪德强，蔡雪飞，陈娟，胡接力，唐霓，龙泉鑫，胡源，邓海军，
申请(专利权)人：重庆医科大学，博奥赛斯天津生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：重庆;50
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