本发明专利技术公开了一种呋塞米及其制剂中2‑呋喃甲胺及其缩合反应杂质的HPLC检测方法，包括步骤使用高效液相色谱仪采用梯度洗脱方法对呋塞米及其制剂中的2‑呋喃甲胺及其缩合反应杂质进行分离测定，其中检测波长为220nm、270nm，以十八烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱，并以体积份数比为9:1的磷酸二氢钾水溶液、有机相组成的混合溶液为流动相A，以体积份数比为3:7的磷酸二氢钾水溶液、有机相组成的混合溶液为流动相B。本发明专利技术能够对呋塞米及其制剂中的2‑呋喃甲胺及其缩合反应杂质降解杂质进行质量控制，保证产品质量和用药安全。
【技术实现步骤摘要】
一种呋塞米及其制剂中2-呋喃甲胺及其缩合反应杂质的HPLC检测方法
本专利技术涉及医药制备检测
，具体来说，涉及一种呋塞米及其制剂中2-呋喃甲胺及其缩合反应杂质的HPLC检测方法。
技术介绍
呋塞米，又名呋喃苯胺酸、速尿，是一种广泛应用于治疗充血性心力衰竭和水肿的袢利尿药。呋塞米化学结构如下图1所示，图2呋塞米的合成路线及2-呋喃甲胺及其缩合反应杂质的产生途径。由图中可以看出，整个合成过程是2-呋喃甲胺与2，4-二氯-5氨磺酰基苯甲酸缩合反应生产呋塞米粗品，然后经精制得到目标产物。呋塞米制备过程中使用的起始物料2，4-二氯-5氨磺酰基苯甲酸可能带入2，4-二氯苯甲酸，其与2-呋喃甲胺缩合反应产生的杂质以及起始物料2-呋喃甲胺则可能残留在成品中。现行的呋塞米注射液和呋塞米中国药典质量标准中未明确规定特定杂质，但2-呋喃甲胺以及部分缩合反应物作为潜在的工艺杂质应用该分析方法无法有效检出。呋塞米及其制剂中2-呋喃甲胺及其缩合反应杂质的含量水平的高低直接决定了产品的质量及后续临床用药的安全。因此，根据杂质需从源头控制的理念考虑，有必要建立一种新的用于呋塞米原料药及其制剂的2-呋喃甲胺及其缩合反应杂质的HPLC(高效液相色谱法(HighPerformanceLiquidChromatography\HPLC)又称“高压液相色谱”、“高速液相色谱”、“高分离度液相色谱”、“近代柱色谱”等，高效液相色谱是色谱法的一个重要分支，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。该方法已成为化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中重要的分离分析技术应用)分析方法，使杂质能得到有效控制，保证后续产品的质量。该方法有利于加强呋塞米原料药及其制剂产品内控质量，为工艺条件的优化提供必要的理论和实践依据。
技术实现思路
针对相关技术中的问题，本专利技术提出一种呋塞米及其制剂中2-呋喃甲胺及其缩合反应杂质的HPLC检测方法，以对呋塞米及其制剂中的2-呋喃甲胺及其缩合反应杂质降解杂质进行质量控制，保证产品质量和用药安全。为此，本专利技术采用的具体技术方案如下：一种呋塞米及其制剂中2-呋喃甲胺及其缩合反应杂质的HPLC检测方法，包括步骤使用高效液相色谱仪采用梯度洗脱方法对呋塞米及其制剂中的2-呋喃甲胺及其缩合反应杂质进行分离测定，其中检测波长为双波长220nm和270nm，以十八烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱，并以体积份数比为9:1的磷酸二氢钾水溶液、有机相组成的混合溶液为流动相A，以体积份数比为3:7的磷酸二氢钾水溶液、有机相组成的混合溶液为流动相B。优选的，所述梯度洗脱方法按下表进行，时间(分钟)流动相A(％)流动相B(％)01000101000206733406733500100600100621000751000。优选的，所述磷酸二氢钾水溶液由以下方式配制：用磷酸将浓度为0.03mol/L磷酸二氢钾水溶液调整PH值至2.5。优选的，有机相为乙腈、甲醇中的一种。优选的，所述有机相为乙腈。优选的，所述高效液相色谱仪型号为ShimadzuLC-20AT。优选的，所述高效液相色谱仪色谱柱的柱温为30-40℃。优选的，色谱柱的柱温为35℃。优选的，所述流动相A、B的流速为0.9-1.1mL/min。优选的，所述流动相A、B的流速为1.0mL/min。本专利技术的有益效果为：本专利技术的建立的一种用于呋塞米及其制剂中2-呋喃甲胺及其缩合反应杂质的HPLC检测方法，本专利技术具有分离度好、专属性强、灵敏度高的特点，能够对呋塞米原料药及其制剂的2-呋喃甲胺及其缩合反应杂质进行质量控制，保证整个产品的质量和临床用药安全。故该法可以作为呋塞米原料药及其制剂中的2-呋喃甲胺及其缩合反应杂质的监测手段。其中，在色谱柱填料的选择方面，色谱柱选择为十八烷基硅烷键合硅胶。在洗脱步骤方面，采用梯度洗脱方法，是由于各物质的极性相差较大，相比等度洗脱方法，采用梯度条件更易实现目标杂质与其相关主成分和各杂质的有效分离，空白无干扰，杂质之间的分离度均在1.5以上，由于梯度洗脱改善了峰形，杂质的灵敏度和分离度得到显著提高。在流动相中添加缓冲盐，其原因是，2-呋喃甲胺与2，4-二氯苯甲酸缩合反应产生的杂质中含氨基和羧基，通过在流动相中添加缓冲盐可使被测物增强离子化，提高溶解度，从而有助于分离。附图说明为了更清楚地说明本申请实施例中的技术方案，下面将对实施例描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本申请的一些实施例，对于本领域技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。图1示出了现有技术中呋塞米的结构分子式；图2示出了现有技术中呋塞米的合成路线及2-呋喃甲胺及其缩合反应杂质的产生途径示意图；图3示出了本专利技术实施例一中的检测色谱图；图4示出了本专利技术实施例二中的检测色谱图；图5示出了本专利技术实施例三中的检测色谱图。具体实施方式为进一步说明各实施例，本专利技术提供有附图，这些附图为本专利技术揭露内容的一部分，其主要用以说明实施例，并可配合说明书的相关描述来解释实施例的运作原理，配合参考这些内容，本领域普通技术人员应能理解其他可能的实施方式以及本专利技术的优点，图中的组件并未按比例绘制，而类似的组件符号通常用来表示类似的组件。呋塞米原料药制备过程中由于起始物料和缩合反应过程中残留会引入2-呋喃甲胺及2-呋喃甲胺与2，4-二氯苯甲酸缩合反应过程产生的杂质，现行的中国药典质量标准中未明确规定特定杂质，但该分析方法无法有效检出上述杂质，2-呋喃甲胺及2-呋喃甲胺与2，4-二氯苯甲酸缩合反应过程产生的杂质是在呋塞米原料药制备过程中产生，若不对其进行检测和控制可能导致不良反应的发生。因此，通过建立HPLC方法对其进行检测和控制，有利于保证产品质量和临床用药安全。本专利技术的建立的一种用于呋塞米及其制剂中2-呋喃甲胺及其缩合反应杂质的HPLC的分析方法，该方法具有分离度好、专属性强、灵敏度高，能够对2-呋喃甲胺及其缩合反应杂质进行质量控制，保证产品质量和用药安全。实施例一：本实施例中所采用的仪器以及设置条件如下：高效液相色谱仪：ShimadzuLC-20AT；色谱柱：UltimateAQ-C18，4.6×250mm，5μm；流动相A、B的本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种呋塞米及其制剂中2-呋喃甲胺及其缩合反应杂质的HPLC检测方法，其特征在于，包括步骤使用高效液相色谱仪采用梯度洗脱方法对呋塞米及其制剂中的2-呋喃甲胺及其缩合反应杂质进行分离测定，其中检测波长为双波长220nm和270nm，以十八烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱，并以体积份数比为9:1的磷酸二氢钾水溶液、有机相组成的混合溶液为流动相A，以体积份数比为3:7的磷酸二氢钾水溶液、有机相组成的混合溶液为流动相B。/n
【技术特征摘要】
1.一种呋塞米及其制剂中2-呋喃甲胺及其缩合反应杂质的HPLC检测方法，其特征在于，包括步骤使用高效液相色谱仪采用梯度洗脱方法对呋塞米及其制剂中的2-呋喃甲胺及其缩合反应杂质进行分离测定，其中检测波长为双波长220nm和270nm，以十八烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱，并以体积份数比为9:1的磷酸二氢钾水溶液、有机相组成的混合溶液为流动相A，以体积份数比为3:7的磷酸二氢钾水溶液、有机相组成的混合溶液为流动相B。
2.根据权利要求1所述的一种呋塞米及其制剂中2-呋喃甲胺及其缩合反应杂质的HPLC检测方法，其特征在于，所述梯度洗脱方法按下表进行，
时间(分钟)
流动相A(％)
流动相B(％)
0
100
0
10
100
0
20
67
33
40
67
33
50
0
100
60
0
100
62
100
0
75
100
0
。
3.根据权利要求1或2所述的一种呋塞米及其制剂中2-呋喃甲胺及其缩合反应杂质的HPLC检测方法...
【专利技术属性】
技术研发人员：刘爽，杨莹，刘银，林宏博，苳泽英，金国峰，郭彬，谈宗华，吴统选，王晓，
申请(专利权)人：天圣制药集团股份有限公司，
类型：发明
国别省市：重庆;50
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