本发明专利技术公开了一种头孢吡肟及其制剂中的高分子杂质的HPLC检测方法，包括步骤使用高效液相色谱仪采用等度洗脱方法对头孢吡肟及其制剂中的聚合物杂质进行分离测定，其中检测波长为254±2nm，以球状蛋白色谱用亲水硅胶为填料的色谱柱，并以体积百分比87.5‑92.5％的浓度为0.005mol/L磷酸盐缓冲液和体积百分比7.5‑12.5％的有机相组成的混合溶液为流动相。本发明专利技术能够对头孢吡肟及其制剂中的高分子杂质进行质量控制，保证产品质量和用药安全。
【技术实现步骤摘要】
一种头孢吡肟及其制剂中的高分子杂质的HPLC检测方法
本专利技术涉及医药制备检测
，具体来说，涉及一种头孢吡肟及其制剂中的高分子杂质的HPLC检测方法。
技术介绍
头孢吡肟为广谱第四代头孢菌素，通过抑制细菌细胞壁的生物合成而达到杀菌作用。体外试验表明，本品对革兰氏阳性菌和阴性菌均有作用。本品对细菌染色体编码的β-内酰胺酶的亲和力低，可高度耐受多数β-内酰胺酶的水解，并可迅速渗入革兰阴性菌的细胞内。在菌体细胞内，其靶分子为青霉素结合蛋白(PBP)。注射用盐酸头孢吡肟为注射用无菌粉末，是由盐酸头孢吡肟和L-精氨酸按一定比例无菌混合制成的制剂。头孢吡肟化学结构如下图1所示，抗生素中高分子杂质，统称为聚合物。大量研究表明，引发头孢菌素过敏反应的过敏原是制剂中高分子聚合物杂质，通过控制聚合物杂质可控制过敏反应的发生。因此，头孢吡肟及其制剂中聚合物杂质的含量水平的高低直接决定了产品的质量及后续临床用药的安全。但是，现行的头孢吡肟及其制剂的国内外现行药典质量标准均未对其聚合物杂质进行控制。因此，根据杂质需从源头控制的理念考虑，有必要建立一种新的用于头孢吡肟原料药及其制剂的聚合物杂质的HPLC(高效液相色谱法(HighPerformanceLiquidChromatography\HPLC)又称“高压液相色谱”、“高速液相色谱”、“高分离度液相色谱”、“近代柱色谱”等，高效液相色谱是色谱法的一个重要分支，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。该方法已成为化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中重要的分离分析技术应用)分析方法，使杂质能得到有效控制，保证后续产品的质量。该方法有利于加强头孢吡肟原料药及其制剂产品内控质量，为工艺条件的优化提供必要的理论和实践依据。
技术实现思路
针对相关技术中的问题，本专利技术提出一种头孢吡肟及其制剂中的高分子杂质的HPLC检测方法，以对头孢吡肟及其制剂中的高分子杂质进行质量控制，保证产品质量和用药安全。为此，本专利技术采用的具体技术方案如下：一种头孢吡肟及其制剂中的高分子杂质的HPLC检测方法，包括步骤使用高效液相色谱仪采用等度洗脱方法对头孢吡肟及其制剂中的聚合物杂质进行分离测定，其中检测波长为254±2nm，以球状蛋白色谱用亲水硅胶为填料的色谱柱，并以体积百分比87.5-92.5％的浓度为0.005mol/L磷酸盐缓冲液和体积百分比7.5-12.5％的有机相组成的混合溶液为流动相。优选的，所述流动相的流速为0.5-0.7mL/min。优选的，所述磷酸盐缓冲液由以下方式配制：将浓度0.005mol/L磷酸氢二钠溶液与浓度0.005mol/L磷酸二氢钠溶液以50:50的体积份数比进行混合配制。优选的，有机相为乙腈、甲醇中的一种。优选的，所述有机相为乙腈。优选的，流动相中缓冲盐溶液体积占比90％，乙腈体积占比10％。优选的，所述高效液相色谱仪色谱柱的柱温为20-30℃。优选的，色谱柱的柱温为25℃。优选的，所述流动相的流速为0.6mL/min。本专利技术的有益效果为：本专利技术的建立的一种用于头孢吡肟及其制剂中聚合物杂质的HPLC的检测方法，该方法具有分离度好、简单快速、专属性强、灵敏度高，能够对头孢吡肟的聚合物杂质降解杂质进行质量控制，保证产品质量和用药安全，本专利技术的检测方法可以作为头孢吡肟原料药及其制剂中的聚合物杂质的监测手段。其中，在洗脱步骤方面，采用等度洗脱方法，根据各物质的分子量大小进行分离。在流动相中添加缓冲盐，其原因是，聚合物杂质中含羧基，通过在流动相中添加缓冲盐可使被测物增强离子化，提高溶解度，从而有助于分离。附图说明为了更清楚地说明本申请实施例中的技术方案，下面将对实施例描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本申请的一些实施例，对于本领域技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。图1示出了现有技术中头孢吡肟的结构分子式；图2示出了本专利技术实施例一中的检测色谱图；图3示出了本专利技术实施例二中的检测色谱图；图4示出了本专利技术实施例三中的检测色谱图。具体实施方式为进一步说明各实施例，本专利技术提供有附图，这些附图为本专利技术揭露内容的一部分，其主要用以说明实施例，并可配合说明书的相关描述来解释实施例的运作原理，配合参考这些内容，本领域普通技术人员应能理解其他可能的实施方式以及本专利技术的优点，图中的组件并未按比例绘制，而类似的组件符号通常用来表示类似的组件。实施例一：本实施例中所采用的仪器以及设置条件如下：高效液相色谱仪：ShimadzuLC-20AT；色谱柱：TSK-GELG2000Wxl，7.8mm×30cm×5μm；流动相的流速：0.6mL/min；检测波长：254nm；色谱柱柱温：25℃；进样量：20uL；流动相：将浓度为0.005mol/L磷酸盐缓冲液与乙腈按照体积份数比90：10配置为流动相；其中，浓度为0.005mol/L磷酸盐缓冲液由以下方式配制：将浓度0.005mol/L磷酸氢二钠溶液与浓度0.005mol/L磷酸二氢钠溶液以50:50的体积份数比进行混合配制。实验步骤：步骤一：溶液配制系统适应性溶液：取本品适量，精密称定，加水溶解并定量稀释制成每1ml中约含头孢吡肟1.0mg的溶液，取溶液10ml，加0.1mol/L氢氧化钠溶液1ml，室温放置1分钟，再加0.1mol/L盐酸溶液1ml，摇匀，作为系统适用性溶液。系统适应性要求：主峰与其前相邻降解杂质峰分离度应不小于2。步骤二：测定精密量取系统适应性溶液20μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。典型系统适用性图谱见下图2。实施例二：本实施例中所采用的仪器以及设置条件如下高效液相色谱仪：ShimadzuLC-20AT；色谱柱：TSK-GELG2000Wxl，7.8mm×30cm×5μm；流动相的流速：0.6mL/min；检测波长：254nm；色谱柱柱温：25℃；进样量：20uL；流动相：将浓度为0.005mol/L磷酸盐缓冲液与乙腈按照体积份数比87.5：12.5配置为流动相；其中，浓度为0.005mol/L磷酸盐缓冲液由以下方式配制：将浓度0.005mol/L磷酸氢二钠溶液与浓度0.005mol/L磷酸二氢钠溶液以50:50的体积份数比进行混合配制。实验步骤：步骤一：溶液配制系统适应性溶液：取本品适量，精密称定，加水溶解并定量稀释制成每1ml中约含头孢吡肟1.0mg的溶液，取溶液10ml，加0.1mol/L氢氧化钠溶液1ml，室温放置1分钟本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种头孢吡肟及其制剂中的高分子杂质的HPLC检测方法，其特征在于，包括步骤使用高效液相色谱仪采用等度洗脱方法对头孢吡肟及其制剂中的聚合物杂质进行分离测定，其中检测波长为254±2nm，以球状蛋白色谱用亲水硅胶为填料的色谱柱，并以体积百分比87.5-92.5％的浓度为0.005mol/L磷酸盐缓冲液和体积百分比7.5-12.5％的有机相组成的混合溶液为流动相。/n
【技术特征摘要】
1.一种头孢吡肟及其制剂中的高分子杂质的HPLC检测方法，其特征在于，包括步骤使用高效液相色谱仪采用等度洗脱方法对头孢吡肟及其制剂中的聚合物杂质进行分离测定，其中检测波长为254±2nm，以球状蛋白色谱用亲水硅胶为填料的色谱柱，并以体积百分比87.5-92.5％的浓度为0.005mol/L磷酸盐缓冲液和体积百分比7.5-12.5％的有机相组成的混合溶液为流动相。
2.根据权利要求1所述的一种头孢吡肟及其制剂中的高分子杂质的HPLC检测方法，其特征在于，所述流动相的流速为0.5-0.7mL/min。
3.根据权利要求1或2所述的一种头孢吡肟及其制剂中的高分子杂质的HPLC检测方法，其特征在于，所述磷酸盐缓冲液由以下方式配制：将浓度0.005mol/L磷酸氢二钠溶液与浓度0.005mol/L磷酸二氢钠溶液以50:50体积份数比进行混合配制。
4.根据权利要求3所述的一种头孢吡...
【专利技术属性】
技术研发人员：刘爽，刘明莉，唐琴，张薇，王婷婷，郭彬，谈宗华，吴统选，王晓，
申请(专利权)人：天圣制药集团股份有限公司，
类型：发明
国别省市：重庆;50
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