一种竹红菌素乙醇提取物除杂方法技术

本发明专利技术涉及竹红菌素的提取方法，具体涉及一种竹红菌素乙醇提取物除杂方法。所述方法包括：向竹红菌素乙醇提取物中加入硅藻土、碳酸氢钙、磷酸钠及乙醇溶液，进行热回流，过滤收取滤液，减压回收乙醇。本发明专利技术方法可有效去除竹红菌素乙醇提取物中存在的大量杂质，显著提高竹红菌素的纯度，纯度最高可达未除杂前的6.4倍。本发明专利技术方法为高纯度竹红菌素的制备提供了有利条件，为发酵法工业化生产竹红菌素奠定了基础。

【技术实现步骤摘要】
一种竹红菌素乙醇提取物除杂方法
本专利技术涉及竹红菌素的提取方法，具体涉及一种竹红菌素乙醇提取物除杂方法。
技术介绍
竹红菌素属于苝醌类化合物，包括竹红菌甲素、竹红菌乙素、竹红菌丙素和竹红菌丁素。可溶于丙酮、氯仿、甲醇和乙醇等有机溶剂，微溶于石油醚，不溶于水。竹红菌素在中性和酸性溶液中呈红色，在碱性溶液中呈鲜绿色，乙醇溶液在465nm有最大光吸收。竹红菌素具有一定的消炎、镇痛和局麻作用(朱丽青，胡汉杰，张黎明，等.竹黄的镇痛抗炎作用[J].中草药,1990,21(1):22-23)。竹红菌素也是是可见光区内的优良光敏剂，单线态氧量子产率高，具有光敏杀伤肿瘤细胞、抗病毒和抑制HIV-Ⅰ型病毒增殖(HUDSONJB，ZHOUJ，CHENJ，etal.Hypocrellin，fromHypocrellabambuase，isphototoxictohumanimmunodeficiencyvirus[J].PhotochemPhotobiol，1994，60(3):253-255.)等作用。在临床上已经用于治疗皮肤病，如瘢痕疙瘩、牛皮癣、白癜风和外阴白色病变(崔荔群，探讨竹红菌素软膏治疗外阴白斑病的临床价值[J].中医诊疗标准前研究，2017,8(20):108-109)等。竹红菌素还可以制成新型光敏杀菌剂和杀虫剂，并且是潜在的光电转换材料(周家宏，冯玉英，魏少华，等.竹红菌甲素和竹红菌乙素的光电转换性能[J].南京师大学报，2004，27(4):59-60.)。此外，竹红菌素色泽鲜红且富有保健功能，因此还可以用于食品领域。现有的竹红菌素粗提物的制备方式，大多是采用乙醇回流提取这种方法。如中国专利申请CN1284494A公开了一种竹红菌提取物及其制备方法和应用该法以天然竹红菌粗粉为原料，投入多功能提取罐中，加入75％-85％的乙醇热回流，强制循环，提取两次，合并两次提取液于真空罐内回收乙醇至浓缩液比重为1.1-1.4，加入4-6倍重量的丙酮趁热搅拌回流8-15分钟后，静置冷却至室温，过滤并回收丙酮即得竹红菌素提取物。中国专利技术专利CN102406668B公开了一种一种竹红菌浸膏的制备方法，该法以天然竹红菌粗颗粒或粗粉为原料，投入多功能提取罐中，加4-6倍重量的90％以上乙醇分别冷浸2-3次，每次12-24小时，合并提取液于真空罐内回收乙醇至浓缩液比重为1.2-1.6，即得竹红菌浸膏。天然竹黄的产量是非常有限，以人工培养竹黄菌的发酵产物为原料来提取竹红菌素，可解决原料产量不足的问题。本申请专利技术人用乙醇回流提取法对竹黄菌固态发酵物料进行提取，分析提取物的的成分，发现竹红菌素质量比约占5％(即粗提物中竹红菌素的纯度约为5％)，其余大部分为油脂、蛋白质、多糖和灰分等杂质。提取物中竹红菌素的纯度太低，限制了竹红菌素的应用。而且杂质比例太高，也使后续制备高纯度竹红菌素的难度提高。
技术实现思路
针对以上所述问题，本专利技术提供一种竹红菌素乙醇提取物除杂方法，采用本专利技术方法对竹红菌素乙醇提取物除杂后，所得产物中竹红菌素纯度显著提高，为竹红菌素后续纯化提供有利条件。为实现上述目的，本专利技术采用以下技术方案：本专利技术提供一种竹红菌素乙醇提取物除杂方法，其包括以下步骤：向竹红菌素乙醇提取物中加入硅藻土、碳酸氢钙、磷酸钠及乙醇溶液，进行热回流，过滤收取滤液，减压回收乙醇。进一步地，向竹红菌素粗提物中加入1-3倍重量的硅藻土。进一步地，向竹红菌素粗提物中加入0.3-0.8倍重量的碳酸氢钙。进一步地，磷酸钠的加入量为竹红菌素重量的5％-15％。进一步地，向竹红菌素粗提物中加入5-20倍、浓度为90-95％v/v的乙醇溶液。进一步地，70℃-95℃温度下热回流提取0.5-2h。与现有技术相比，本专利技术具有以下有益效果：本专利技术方法可有效去除竹红菌素乙醇提取物中存在的大量杂质，显著提高竹红菌素的纯度，纯度最高可达未除杂前的6.4倍。本专利技术方法为高纯度竹红菌素的制备提供了有利条件，为发酵法工业化生产竹红菌素奠定了基础。具体实施方式应该指出，以下详细说明都是示例性的，旨在对本专利技术提供进一步的说明。除非另有指明，本文使用的所有技术和科学术语具有与本专利技术所属
的普通技术人员通常理解的相同含义。需要注意的是，这里所使用的术语仅是为了描述具体实施方式，而非意图限制根据本专利技术的示例性实施方式。如在这里所使用的，除非上下文另外明确指出，否则单数形式也意图包括复数形式，此外，还应当理解的是，当在本说明书中使用术语“包含”和/或“包括”时，其指明存在特征、步骤、操作和/或它们的组合。为了使得本领域技术人员能够更加清楚地了解本专利技术的技术方案，以下将结合具体的实施例详细说明本专利技术的技术方案。以下实施例采用的竹红菌素乙醇提取物是以竹黄菌固态发酵物为原料采用乙醇提取得到，具体方法为：①菌株来源：菌株由本单位从野生竹黄分离所得，已保藏于中国普通微生物菌种保藏中心，保藏编号为CGMCCNo.18808，保藏日期为2019年12月02日。②制备种子接种液：所用培养基为PDB培养基。培养基灭菌后，接入活化菌株，26℃摇瓶培养36-40h。③制备固体发酵培养基：所述固体发酵培养基包括如下质量百分比的组分：大米45％，麸皮15％，NaCl0.5g/L，ZnSO4·7H2O0.01g/L，余量为水。0.1MPa灭菌30min。向固体发酵培养基中加入3％的淡竹茎的浸提液。④固态发酵：将制备的种子液接入培养基中，置26℃恒温箱中发酵，15天后发酵结束。⑤烘干：将④中得到的固态发酵料放置在烘箱中，65℃烘72h，然后粉碎，得到提取物料。⑥称取100g提取物料投入提取器中，加入95％乙醇，热回流提取两次，每次加1L95％乙醇提取1小时；合并提取液，回收乙醇，即得竹红菌素乙醇提取物。经检测，提取物中竹红菌素的纯度为4.5％。本专利技术所述竹红菌素乙醇提取物包括但不仅限于此，对于天然竹黄、竹黄菌液体发酵产物等原料经不同乙醇提取工艺得到的竹红菌素乙醇提取物同样适用。竹红菌素总量测定方法：竹红菌素具有相似的分子骨架，乙醇溶液在464nm左右有最大吸收，无需显色可直接用分光光度法测定，方法简单、快速、准确。配置不同浓度的竹红菌素标准液，测量吸光度，绘制标准曲线，得回归方程y＝0.0439x-0.0001，R2＝0.999。实施例1一种竹红菌素乙醇提取物除杂方法，包括以下步骤：取10g竹红菌素乙醇提取物加入15g硅藻土、4g碳酸氢钙、0.7g磷酸钠、350ml95％v/v乙醇，热回流1h；过滤得滤液，减压回收乙醇，即得除杂后的竹红菌素提取物，经检测，除掉杂后提取物中竹红菌素的纯度为18.3％，是除杂前的4倍。实施例2一种竹红菌素乙醇提取物除杂方法，包括以下步骤：取10g竹红菌素乙醇提取物，加入20g硅藻土、5g碳酸氢钙、1g磷酸钠、350ml95v/v％乙醇，热回流1h；过滤得滤液，减压回收乙醇，本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种竹红菌素乙醇提取物除杂方法，其特征在于，包括以下步骤：向竹红菌素乙醇提取物中加入硅藻土、碳酸氢钙、磷酸钠及乙醇溶液，进行热回流，过滤收取滤液，减压回收乙醇。/n

【技术特征摘要】
1.一种竹红菌素乙醇提取物除杂方法，其特征在于，包括以下步骤：向竹红菌素乙醇提取物中加入硅藻土、碳酸氢钙、磷酸钠及乙醇溶液，进行热回流，过滤收取滤液，减压回收乙醇。


2.根据权利要求1所述方法，其特征在于，向竹红菌素粗提物中加入1-3倍重量的硅藻土。


3.根据权利要求1所述方法，其特征在于，向竹红菌素粗提物中加入0.3-0.8...

【专利技术属性】
技术研发人员：袁建国，田特，刘代成，
申请(专利权)人：山东国力生物技术研究院，山东国力生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：山东;37