水飞蓟亭在制备预防和/或治疗帕金森病药物中的应用制造技术

水飞蓟亭在制备预防和/或治疗帕金森病药物中的应用，涉及帕金森病药物领域。本发明专利技术通过实验证实，水飞蓟亭能够抑制鱼藤酮对人SH‑SY5Y细胞的杀伤作用，水飞蓟亭能够抑制鱼藤酮所导致的DNA双链损伤，水飞蓟亭能够抑制鱼藤酮所导致的内质网应激反应，水飞蓟亭能够抑制鱼藤酮所导致蛋白聚集。本发明专利技术通过实验证实，水飞蓟宁能够抑制氧糖剥夺(OGD)对神经元的损伤作用，具有预防和/或治疗脑缺血后神经元损伤和死亡的作用。本发明专利技术开拓了水飞蓟亭的新用途，为防治防治帕金森病这一影响老年人生存质量的神经系统常见疾病提供了新的防治途径和防治方法。

【技术实现步骤摘要】
水飞蓟亭在制备预防和/或治疗帕金森病药物中的应用
本专利技术涉及帕金森病药物
，具体涉及一种水飞蓟亭在制备预防和/或治疗帕金森病药物中的应用。
技术介绍
水飞蓟亭(Silychristin)是从菊科水飞蓟属植物水飞蓟(奶蓟)果实中提取的黄酮类单体小分子化合物，分子式：C25H22O10，分子量482，为白色颗粒晶体。CAS号：33889-69-9。水飞蓟亭(Silychristin)具有取材方便、价格低的特点。帕金森病(Parkinson’sdisease，PD)是一种常见的神经系统变性疾病，老年人多见，平均发病年龄为60岁左右，40岁以下起病的青年帕金森病较少见。我国65岁以上人群PD的患病率大约是1.7％。临床表现主要包括静止性震颤、运动迟缓、肌强直和姿势步态障碍，同时患者可伴有抑郁、便秘和睡眠障碍等非运动症状。帕金森病最主要的病理改变是中脑黑质多巴胺(dopamine，DA)能神经元的变性死亡，由此而引起纹状体DA含量显著性减少而致病。帕金森病的诊断主要依靠病史、临床症状及体征。一般的辅助检查多无异常改变。药物治疗是帕金森病最主要的治疗手段。左旋多巴制剂仍是最有效的药物。但是，只能改善症状，不能阻止病情的进展，也无法治愈疾病，所以此类患者迫切需要新的防治药物。研究表明，中脑黑质多巴胺能神经元的变性死亡与DNA损伤、蛋白聚集以及内质网应激反应等因素密切相关，因此抑制DNA损伤、蛋白聚集以及内质网应激反应所导致的神经元死亡已经成为防治帕金森病的主要策略。目前，水飞蓟亭对神经系统疾病，尤其是对帕金森氏病的防治作用尚未见报道。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供水飞蓟亭的新用途，即水飞蓟亭在制备预防和/或治疗帕金森病药物中的应用。具体地说，水飞蓟亭能够抑制鱼藤酮(Rotenone)对神经元的损伤及杀伤作用，具有防治帕金森病的作用。本专利技术为解决技术问题所采用的技术方案如下：本专利技术提供一种水飞蓟亭在制备预防和/或治疗帕金森病药物中的应用。作为优选的实施方式，所述水飞蓟亭的浓度为2.0～4.0mmol/L。作为更优选的实施方式，所述水飞蓟亭的浓度为2.0mmol/L。作为更优选的实施方式，所述水飞蓟亭的浓度为4.0mmol/L。本专利技术的有益效果是：本专利技术通过实施例1证实，水飞蓟亭能够抑制鱼藤酮对人SH-SY5Y细胞的杀伤作用。本专利技术通过实施例2证实，水飞蓟亭以浓度依赖的方式抑制了鱼藤酮诱导的γ-H2AX的表达上调，水飞蓟亭显著地抑制了人SH-SY5Y细胞核中红色斑点的增加，水飞蓟亭显著地抑制了鱼藤酮诱导细胞核拖尾，由此说明水飞蓟亭能够抑制鱼藤酮所导致的DNA双链损伤。本专利技术通过实施例3证实，水飞蓟亭能够抑制鱼藤酮所导致的内质网应激反应。本专利技术通过实施例4证实，水飞蓟亭能够抑制鱼藤酮所导致蛋白聚集。本专利技术通过实验证实，水飞蓟宁能够抑制氧糖剥夺(OGD)对神经元的损伤作用，具有预防和/或治疗脑缺血后神经元损伤和死亡的作用。本专利技术开拓了水飞蓟亭的新用途，为防治防治帕金森病这一影响老年人生存质量的神经系统常见疾病提供了新的防治途径和防治方法。附图说明图1为实施例1中水飞蓟亭抑制鱼藤酮对人SH-SY5Y细胞的杀伤作用的结果。图2为实施例2中水飞蓟亭抑制鱼藤酮所导致的人SH-SY5Y细胞DNA双链断裂的结果。图3为实施例2中水飞蓟亭抑制鱼藤酮所导致的人SH-SY5Y细胞DNA双链断裂的结果。图4为实施例2中水飞蓟亭抑制鱼藤酮所导致的人SH-SY5Y细胞DNA双链断裂的结果。图5为实施例3中水飞蓟亭抑制鱼藤酮所导致的内质网应激反应的结果。图6为实施例4中水飞蓟亭抑制鱼藤酮所导致的蛋白聚集的结果。具体实施方式本专利技术通过实验证实水飞蓟亭能够抑制鱼藤酮对神经元的杀伤作用，而且两者之间具有量效关系。体外研究实验显示，采用2.0mmol/L和4.0mmol/L水飞蓟亭处理人SH-SY5Y细胞以及胎鼠皮层神经元1小时，能够显著抑制鱼藤酮所诱导的神经元损伤及死亡，其机制与抑制DNA断裂、蛋白聚集和内质网应激反应有关。下面将结合本专利技术实施例，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。实施例1水飞蓟亭抑制鱼藤酮对人SH-SY5Y细胞的杀伤作用水飞蓟亭(购自成都瑞芬思公司)，使用时用DMSO配制成母液，稀释后给药。人SH-SY5Y细胞(购自中国吉凯生物技术公司)，采用鱼藤酮(购自Sigma公司)制作“帕金森所致神经元损伤”的细胞模型。将人SH-SY5Y细胞接种于96孔板中的DMEM培养基中，二氧化碳孵箱过夜，提前1小时分别与不同浓度的水飞蓟亭(2.0mmol/L和4.0mmol/L)一起孵育，再加入鱼藤酮(30μmol/L)，8小时后采用LDH(乳酸脱氢酶)释放法检测细胞死亡率。实验结果如图1所示。结果显示：单独使用水飞蓟亭对人SH-SY5Y细胞无杀伤作用，单独使用鱼藤酮对人SH-SY5Y细胞的杀伤率大约为30.30％，水飞蓟亭对鱼藤酮所致人SH-SY5Y细胞死亡的抑制作用呈浓度依赖性，即随着水飞蓟亭浓度的增加，鱼藤酮对人SH-SY5Y细胞的杀伤作用下降到27.05％和24.00％。实验数据结果见表1。表1**：P<0.01，水飞蓟亭+鱼藤酮与鱼藤酮单独治疗组比较。经过上述实验证实，水飞蓟亭能够抑制鱼藤酮对人SH-SY5Y细胞的杀伤作用。实施例2水飞蓟亭抑制鱼藤酮所导致的人SH-SY5Y细胞DNA双链断裂DNA是遗传信息的载体，DNA的双链断裂是导致DNA溶解和细胞死亡的基础。为了说明水飞蓟亭对细胞的保护作用，本实验检测了水飞蓟亭对鱼藤酮所诱导的DNA双链断裂的影响。(1)将人SH-SY5Y细胞接种于直径6cm培养皿的DMEM培养基中，二氧化碳孵箱过夜，提前1小时与水飞蓟亭(2.0mmol/L和4.0mmol/L)一起孵育，再加入鱼藤酮(30μmol/L)，8小时后收集细胞。将收集的细胞匀浆，差速离心，分离细胞浆组分，线粒体组分以及细胞核组分，BCA法测定各组分的蛋白浓度，进行Westernblotting分析。采用的一抗为DNA双链断链的标志蛋白：γ-H2AX，内参为H2A。实验结果如图2所示。结果显示：鱼藤酮能够显著地上调水γ-H2AX的蛋白水平，但是水飞蓟亭以浓度依赖的方式抑制了鱼藤酮诱导的γ-H2AX的表达上调。这说明水飞蓟亭能够抑制鱼藤酮所导致的DNA双链损伤。(2)为了进一步说明水飞蓟亭能够抑制鱼藤酮所导致的DNA双链损伤，进一步将人SH-SY5Y细胞接种于直径3cm培养皿的DMEM培养基中，二氧化碳孵箱过夜，提前1小时与水飞蓟亭(4.0mmol/L)一起孵育，再本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.水飞蓟亭在制备预防和/或治疗帕金森病药物中的应用。/n

【技术特征摘要】
1.水飞蓟亭在制备预防和/或治疗帕金森病药物中的应用。


2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述水飞蓟亭的浓度为2.0～4.0mmol/L。

【专利技术属性】
技术研发人员：葛鹏飞，罗天飞，孟繁凯，华聪，
申请(专利权)人：葛鹏飞，
类型：发明
国别省市：吉林;22