含有纳米包埋卵黄抗体的多效修护面膜液及其制备方法技术

本发明专利技术属于化妆品技术，公开了一种含有纳米包埋卵黄抗体的多效修护面膜液及其制备方法。本发明专利技术的目的在于提供一种安全有效，吸收效果明显，在修复滋养肌肤的同时，修护由肌肤过敏、细菌感染、皮脂腺角化异常、炎症等原因引起的痤疮的纳米修护面膜液。本发明专利技术选用明胶作为纳米粒的载体，采用溶剂挥发法制备出卵黄抗体纳米粒，由痤疮病原菌(痤疮丙酸杆菌、金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌)菌体抗原和蛋白质抗原免疫鸡制备特异性鸡卵黄抗体IgY，将IgY和纳米颗粒两者复配后制成多效修护面膜液，通过抗痤疮卵黄抗体纳米制剂治疗痤疮比传统治疗方法具有更快速有效的特点，其疗效高、副作用小及防止抗菌素耐药等特点使其具有更广阔的应用前景，具有较好的社会效益和经济效益。

【技术实现步骤摘要】
含有纳米包埋卵黄抗体的多效修护面膜液及其制备方法
本专利技术涉及化妆品
，具体是指一种含有纳米包埋卵黄抗体的多效修护面膜液及其制备方法。
技术介绍
痤疮是一种常发于青少年的慢性炎症性皮肤病，临床表现一般常见病况为粉刺、丘疹、炎症等皮损，发病病程长且不定，容易在面部遗留凹陷和增生瘢痕，因此对于青少年生活酬酢及心理影响很大。痤疮丙酸杆菌常驻在皮肤表面，和其他皮肤常驻菌一样，正常情况下对人体没有危害，这些皮肤常驻菌一同构成了皮肤的稳态环境。治疗痤疮通常是复杂的，可能涉及使用局部抗生素，激素等。当皮肤毛孔被过剩的油脂和死皮细胞阻碍时，就会产生一种厌氧环境，痤疮丙酸杆菌(Propionibacteriumacnes，Pacnes)可以加速生长。目前预防和治疗方法有限，缺乏安全可靠的疫苗诱导针对寻常痤疮的保护性免疫，市面上治疗痤疮基本是采用激素类药物，抗生素的使用破坏了正常菌群，容易引起菌群失调和耐药，对人体健康不利。
技术实现思路
为了克服现有技术存在的不足，本专利技术提供一种含有纳米包埋卵黄抗体的多效修护面膜液及其制备方法，本专利技术的上述目的是通过以下技术方案实现的：本专利技术的目的在于提供一种安全有效，吸收效果明显，在修复滋养肌肤的同时，修护由肌肤过敏、细菌感染、皮脂腺角化异常、炎症等原因引起的痤疮的纳米修护面膜液。由于痤疮会上调基质金属蛋白酶MMP-1的表达水平，从而降低皮肤真皮层的厚度，造成皮肤萎缩性瘢痕，即“痘坑”。而明胶的前体正是胶原蛋白，其降解后能促进皮肤伤口愈合、滋润皮肤，使皮肤得以修复。因此本专利技术选用明胶作为纳米粒的载体，采用溶剂挥发法制备出卵黄抗体纳米粒。含有纳米包埋卵黄抗体的多效修护面膜液，首先进行痤疮病原菌的培养，制备细菌抗原、卵黄抗体，然后提取卵黄抗体，制备纳米明胶颗粒，采用纳米明胶颗粒包裹卵黄抗体制成纳米卵黄抗体原液，最后添加保湿剂、流动调节剂、活性成分和增湿剂，制成面膜液。进一步的，所述的保湿剂为1，3-丁二醇、1，2-戊二醇、甘油；所述的流动调节剂为羟乙基纤维素、卡波姆、黄原胶；所述的活性成分为海藻糖、尿囊素、丝氨酸、谷氨酸；所述的增稠剂为PEG。含有纳米包埋卵黄抗体的多效修护面膜液的制备方法，包括如下步骤：步骤S1：痤疮病原菌的培养；步骤S2：三种细菌的蛋白质抗原和菌体抗原制备；步骤S3：卵黄抗体制备；步骤S4：卵黄抗体提取；步骤S5：纳米明胶颗粒制备；步骤S6：纳米明胶颗粒包裹卵黄抗体；步骤S7：制备面膜原液。进一步的，步骤S1包括：(1)葡萄球菌的培养利用LB培养基培养金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌，将LB培养基置于高压灭菌锅灭菌，待其冷却后在超净台中无菌接种，并放入恒温箱培养；(2)痤疮丙酸杆菌的培养将LB培养基调节pH6.8-7.0，随后与液体石蜡分别高温高压灭菌，待其冷却后在超净台中无菌接种痤疮丙酸杆菌，隔绝氧气迅速用橡胶塞塞紧瓶口，最后将接种后的LB培养基放在台式恒温振荡器中37℃培养。进一步的，步骤S2包括：利用甲醛法和煮法分别灭活这三种菌体，分别得到金黄色葡萄球菌蛋白质抗原、金黄色葡萄球菌菌体抗原、表皮葡萄球菌蛋白质抗原、表皮葡萄球菌菌体抗原、痤疮丙酸杆菌蛋白质抗原、痤疮丙酸杆菌菌体抗原。进一步的，步骤S3包括：从鸡场购入产蛋母鸡，不注射抗原饲养一周，确保产蛋母鸡能正常下蛋后，在鸡的颈部和翅膀皮下多点分别注射80μg步骤S2的细菌抗原，在初次免疫两周后进行第二次免疫，之后每间隔一周免疫一次，加强免疫三次。进一步的，步骤S4包括：采用水稀释-硫酸铵法：取免疫后的蛋黄，用超纯水稀释卵黄，卵黄和水体积比为1:8，混匀等待分层，取上清液加入等体积的饱和硫酸铵，调节pH为5.0；随后，离心后弃上清，用PBS溶解悬浮沉淀，将抗体装入透析袋中，将透析袋放入透析液里，4℃环境下持续搅拌除盐，每2h更换一次透析液，一共透析24h，制备PartD纳米卵黄抗体原液。进一步的，步骤S5包括：称取0.416-0.832g明胶于100mL烧杯中，加入8.3mL双蒸水，于50℃，400rpm搅拌溶解，边搅拌边加入8.3-16.6mL丙酮，室温静置20min，弃去上清液，加入10mL双蒸水，50℃，200rpm彻底溶解底部沉淀，加入1mol/L的HCl调节pH至2.5；滴加丙酮30-60mL，再加入以戊二醛和丙酮体积比为1:1000配置的溶液2-4mL，室温1000rpm持续搅拌5h，挥发丙酮及戊二醛，用双蒸水稀释10倍，使用40KD透析袋，在双蒸水中透析24h后，在-4℃静置保存。进一步的，步骤S6包括：调节明胶纳米颗粒溶液pH7.0，向浓度为1mg/mL的纳米颗粒中加入终浓度为45μg/mL卵黄抗体，室温震荡2h后，进行包封率鉴定，检测释放速率。进一步的，步骤S7包括：(1)制备PartA：称取体积百分数为6％的1，3-丁二醇、4％的1，2-戊二醇、8％的甘油、2％的泛醇和质量百分数为0.2％的羟乙基纤维素、0.1％的卡波姆、0.2％的黄原胶、0.2％的尿囊素、1％的海藻糖、0.1％的EDTA二钠、0.5％的丝氨酸于烧杯中，混匀备用；(2)将PartA搅拌，分散均匀至无不溶物，加热至80-85℃，转速为500rpm，保温20min，开始降温；(3)降温至45℃，加入PartB原料：质量百分数为2％的甜菜碱和0.25％的谷氨酸，搅拌至无不溶物；(4)加入PartC：质量百分数为0.5％的PEG，至A和B混合液中，搅拌至均匀透明，置于室温条件下，待其正常散热降温；(5)将PartA、PartB和PartC混合，加入已制备的PartD：纳米卵黄抗体原液，搅拌均匀，三者混合液与PartD的体积比为10:1；(6)使用300目滤布过滤出料；(7)基础面膜稳定性测定。本专利技术与现有技术相比的有益效果是：(1)卵黄抗体易制备、成本低廉，适合量产，是良好的抗生素替代品，抗生素已对我们日常生活产生重大的危害，许多微生物都对其产生了强耐药性，若任其滥用，后果不堪设想，使用卵黄抗体可以避免使用抗生素带来的耐药危害，抗菌效果优良，在不久的未来以卵黄抗体为代表的抗生素替代品将会成为治疗疾病的主流。(2)通过对提取出的抗体进行蛋白质纯度的检测发现水稀释-硫酸铵法提取出的IgY，条带清晰，无拖尾现象，杂蛋白少，卵黄抗体纯度高，证明水稀释-硫酸铵法优于水稀释-氯化钠法，更优于盐析法、有机溶剂沉淀法、等电点沉淀法、重金属离子沉淀法等现有技术。(3)通过设计出抗痤疮卵黄抗体纳米制剂，卵黄抗体治疗痤疮比起传统方法有更快速的效果，其高疗效、副作用小的特点使其具有广阔的市场，具有广阔的发展前景。(4)添加纳米颗粒，给药量少，对皮肤刺激减少，便于透皮吸收和缓释的作用。成本价格低廉，原材料易制取，适用于大量制取。(5)将纳米卵黄制剂与面膜精华液混合，有本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.含有纳米包埋卵黄抗体的多效修护面膜液，其特征是，首先进行痤疮病原菌的培养，制备细菌菌体抗原和蛋白质抗原，免疫鸡制备高效卵黄抗体，提取卵黄抗体IgY；制备纳米明胶颗粒，用纳米明胶颗粒包裹卵黄抗体制成纳米卵黄抗体原液，最后添加保湿剂、流动调节剂、活性成分和增湿剂，制成多效修护面膜液。/n

【技术特征摘要】
1.含有纳米包埋卵黄抗体的多效修护面膜液，其特征是，首先进行痤疮病原菌的培养，制备细菌菌体抗原和蛋白质抗原，免疫鸡制备高效卵黄抗体，提取卵黄抗体IgY；制备纳米明胶颗粒，用纳米明胶颗粒包裹卵黄抗体制成纳米卵黄抗体原液，最后添加保湿剂、流动调节剂、活性成分和增湿剂，制成多效修护面膜液。


2.如权利要求1所述的含有纳米包埋卵黄抗体的多效修护面膜液，其特征是，所述的保湿剂为1，3-丁二醇、1，2-戊二醇、甘油；所述的流动调节剂为羟乙基纤维素、卡波姆、黄原胶；所述的活性成分为海藻糖、尿囊素、丝氨酸、谷氨酸；所述的增稠剂为PEG。


3.含有纳米包埋卵黄抗体的多效修护面膜液的制备方法，包括如下步骤：
步骤S1：痤疮病原菌的培养；
步骤S2：三种细菌的蛋白质抗原和菌体抗原制备；
步骤S3：卵黄抗体制备；
步骤S4：卵黄抗体提取；
步骤S5：纳米明胶颗粒制备；
步骤S6：纳米明胶颗粒包裹卵黄抗体；
步骤S7：制备面膜原液。


4.如权利要求3所述的含有纳米包埋卵黄抗体的多效修护面膜液制备方法，其特征是，所述的步骤S1包括：
(1)葡萄球菌的培养
利用LB培养基培养金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌，将LB培养基置于高压灭菌锅灭菌，待其冷却后在超净台中无菌接种，并放入恒温箱培养；
(2)痤疮丙酸杆菌的培养
将LB培养基调节pH6.8-7.0，随后与液体石蜡分别高温高压灭菌，待其冷却后在超净台中无菌接种痤疮丙酸杆菌，隔绝氧气迅速用橡胶塞塞紧瓶口，最后将接种后的LB培养基放在台式恒温振荡器中37℃培养。


5.如权利要求3所述的含有纳米包埋卵黄抗体的多效修护面膜液制备方法，其特征是，所述的步骤S2包括：
利用甲醛法和煮法分别灭活这三种菌体，分别得到金黄色葡萄球菌蛋白质抗原、金黄色葡萄球菌菌体抗原、表皮葡萄球菌蛋白质抗原、表皮葡萄球菌菌体抗原、痤疮丙酸杆菌蛋白质抗原、痤疮丙酸杆菌菌体抗原。


6.如权利要求3所述的含有纳米包埋卵黄抗体的多效修护面膜液制备方法，其特征是，所述的步骤S3包括：
从鸡场购入产蛋母鸡，不注射抗原饲养一周，确保产蛋母鸡能正常下蛋后，在鸡的颈部和翅膀皮下多点分别注射80μg步骤S2的各种细菌抗原，在初次免疫两周后进行第二次免疫，之后每间隔一周免疫一次，加强免疫三次。


7.如权利要求3所述的含有纳米包埋卵黄抗体的多效修护面膜液制备方法，其特征是，所述的步骤S4包括：<...

【专利技术属性】
技术研发人员：王钦富，周诗洁，黄晶，王芷怡，柏显昌，詹宁薇，王美辰，
申请(专利权)人：大连大学，
类型：发明
国别省市：辽宁;21