磷酸乙醇胺的定量方法、定量用的氧化还原酶、定量用组合物、定量用试剂盒和定量用传感器技术

提供对作为抑郁症的生物标志物的EAP浓度进行定量的新的定量方法、定量用的酶、定量用试剂盒以及定量用传感器。提供一种向含有磷酸乙醇胺的样品中添加氧化还原酶的磷酸乙醇胺的定量方法。可以通过添加所述氧化还原酶来还原介体，使还原后的所述介体与试剂反应，确定所述磷酸乙醇胺的浓度。或者，作为所述氧化还原酶，还可以使通过添加氧化酶而生成的过氧化氢与试剂反应，确定所述磷酸乙醇胺的浓度。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】磷酸乙醇胺的定量方法、定量用的氧化还原酶、定量用组合物、定量用试剂盒和定量用传感器
本专利技术涉及磷酸乙醇胺的定量方法、定量用的氧化还原酶、定量用组合物、定量用试剂盒或定量用传感器。
技术介绍
人的血液中含有磷酸乙醇胺(EAP)。在专利文献1中记载了EAP是用于诊断抑郁症的生物标志物。在非专利文献1中记载了能够以EAP浓度1.5μM以下作为基准值而诊断抑郁症的情况。另外，在专利文献2中记载了利用EAP磷酸化酶(phosphorylase)和乙醛脱氢酶(AcetaldehydeDehydrogenase)的EAP浓度的测定方法。(现有技术文献)(专利文献)专利文献1：国际公开2011/019072号专利文献2：国际公开2013/069645号(非专利文献)非专利文献1：KawamuraN，"Plasmametabolomeanalysisofpatientswithmajordepressivedisorder."PsychiatryClinNeurosci.2018May；72(5):349-361
技术实现思路
(专利技术所要解决的问题)到目前为止，尚未报道除专利文献2中公开的方法之外的EAP浓度的测定方法，期望开发新的测定方法。本专利技术的目的之一在于提供对作为抑郁症的生物标志物的EAP浓度进行定量的新的定量方法、定量用的酶、定量用组合物、定量用试剂盒或定量用传感器。(解决问题所采用的措施)根据本专利技术的实施方式之一，提供向含有磷酸乙醇胺的样品中添加氧化还原酶的磷酸乙醇胺的定量方法。可以通过添加氧化还原酶来还原介体，使还原后的介体与试剂反应，确定磷酸乙醇胺的浓度。根据本专利技术的实施方式之一，提供在磷酸乙醇胺的定量方法中使用的氧化还原酶。氧化还原酶可以是属于EC号1.4或EC号1.5的氧化还原酶。属于EC号1.4或EC号1.5的氧化还原酶可以是从伯胺脱氢酶、单胺脱氢酶、二胺脱氢酶、多胺脱氢酶、乙醇胺脱氢酶、酪胺脱氢酶、苯基乙胺脱氢酶、苄胺脱氢酶、组胺脱氢酶、5-羟色胺脱氢酶、精胺脱氢酶、亚精胺脱氢酶、β-丙氨酸脱氢酶、γ-氨基丁酸(GABA)脱氢酶、牛磺酸脱氢酶、尸胺酸脱氢酶以及胍丁胺脱氢酶中选择的氧化还原酶。牛磺酸脱氢酶也可以包含大亚基(largesubunit)。属于EC号1.4或EC号1.5的氧化还原酶也可以是EC号1.4.3或EC号1.5.3的氧化酶。氧化酶可以是从伯胺氧化酶、单胺氧化酶、二胺氧化酶、多胺氧化酶、乙醇胺氧化酶、酪胺氧化酶、苯基乙胺氧化酶、苄胺氧化酶、组胺氧化酶、5-羟色胺氧化酶、精胺氧化酶、亚精胺氧化酶、β-丙氨酸氧化酶、γ-氨基丁酸(GABA)氧化酶、牛磺酸氧化酶、尸胺酸氧化酶以及胍丁胺氧化酶中选择的氧化酶。根据本专利技术的实施方式之一，提供含有所述任一种氧化还原酶的磷酸乙醇胺的定量用组合物。磷酸乙醇胺的定量用组合物也可以含有通过添加氧化还原酶而被还原的介质和与被还原的所述介质反应的试剂。根据本专利技术的实施方式之一，提供一种磷酸乙醇胺的定量用试剂盒，其中含有所述任一种氧化还原酶、通过添加所述氧化还原酶而被还原的介质、和与被还原的所述介质反应的试剂。在所述磷酸乙醇胺的定量方法中，氧化还原酶是氧化酶，可以使通过添加氧化酶而产生的过氧化氢与试剂反应，确定磷酸乙醇胺的浓度。根据本专利技术的实施方式之一，提供在磷酸乙醇胺的定量方法中作为氧化还原酶而使用的氧化酶。氧化酶也可以是属于EC号1.4.3或EC号1.5.3的氧化酶。氧化酶可以是从伯胺氧化酶、单胺氧化酶、二胺氧化酶、多胺氧化酶、乙醇胺氧化酶、酪胺氧化酶、苯基乙胺氧化酶、苄胺氧化酶、组胺氧化酶、5-羟色胺氧化酶、精胺氧化酶、亚精胺氧化酶、β-丙氨酸氧化酶、γ-氨基丁酸(GABA)氧化酶、牛磺酸氧化酶、尸胺酸氧化酶以及胍丁胺氧化酶中选择的氧化酶。根据本专利技术的实施方式之一，提供含有所述任一种氧化酶的磷酸乙醇胺的定量用组合物。磷酸乙醇胺的定量用组合物也可以含有与通过添加氧化酶而产生的过氧化氢反应的试剂。根据本专利技术的实施方式之一，提供一种磷酸乙醇胺的定量用试剂盒，其中含有所述任一种氧化酶和与通过添加氧化酶而生成的过氧化氢反应的试剂。根据本专利技术的实施方式之一，提供含有所述任一项所述的氧化还原酶或所述任一项所述的氧化酶的电极。根据本专利技术的实施方式之一，提供一种具备所述电极作为工作电极的传感器芯片。根据本专利技术的实施方式之一，提供一种具备所述传感器芯片的传感器。(专利技术的效果)根据本专利技术，提供对作为抑郁症的生物标志物的EAP浓度进行定量的新的定量方法、定量用的酶、定量用组合物、定量用试剂盒或定量用传感器。附图说明图1是表示本专利技术的实施例的EAP浓度与酶活性(U/ml)的相关性的图。图2是表示本专利技术的实施例的EAP浓度与吸光度(A438、mAbs)的关系的图。图3是表示本专利技术的实施例的酶促反应的pH依赖性的图。图4是表示本专利技术的实施例的EAP浓度与吸光度(A555、mAbs)的关系的图。图5是表示本专利技术的实施例的EAP浓度与吸光度(A555、mAbs)的关系的图。图6是表示本专利技术的实施例的EAP浓度与电流值(μA)的关系的图。图7是表示本专利技术的实施例的EAP浓度与电流值(μA)的关系的图。图8的(a)是本专利技术的实施方式之一的传感器芯片10的示意图，图8的(b)～(d)是表示构成传感器芯片10的部件的示意图。图9的(a)是本专利技术的实施方式之一的传感器100的示意图，图9的(b)是本专利技术的实施方式之一的传感器100的框结构图。具体实施方式以下，说明本专利技术的对作为抑郁症的生物标志物的EAP浓度进行定量的新的定量方法、定量用的酶、定量用组合物、定量用试剂盒以及定量用传感器。但是，本专利技术的对作为抑郁症的生物标志物的EAP浓度进行定量的新的定量方法、定量用的酶、定量用组合物、定量用试剂盒以及定量用传感器并不限定于以下所示的实施方式以及实施例的记载内容来解释。在实施方式之一中，本专利技术中使用的氧化还原酶是作为底物作用于EAP的脱氢酶。本专利技术中使用的氧化还原酶被认为最适合使用EAP脱氢酶。然而，直到提交本申请时，EAP脱氢酶尚未被鉴别。因此，可以使用有效地作用于具有与EAP类似结构的底物的脱氢酶作为本专利技术中使用的氧化还原酶的替代物。类似结构是指从结构、电子、立体化学的观点等来看被认为是类似的物理化学结构。例如，作为在结构上类似于EAP的底物，存在具有CH-NH2键或CH-NH键的底物，作为该底物的酶，存在属于EC号1.4或EC号1.5的氧化还原酶。例如，作为属于EC号1.4或EC号1.5的氧化还原酶，有伯胺脱氢酶、单胺脱氢酶、二胺脱氢酶、多胺脱氢酶、乙醇胺脱氢酶、酪胺脱氢酶、苯基乙胺脱氢酶、苄胺脱氢酶、组胺脱氢酶本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种磷酸乙醇胺的定量方法，其中，/n向含有磷酸乙醇胺的样品中添加氧化还原酶。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20181213 JP 2018-2334401.一种磷酸乙醇胺的定量方法，其中，
向含有磷酸乙醇胺的样品中添加氧化还原酶。


2.根据权利要求1所述的磷酸乙醇胺的定量方法，其中，
通过添加所述氧化还原酶来还原介体，
使还原后的所述介体与试剂反应，确定所述磷酸乙醇胺的浓度。


3.一种在权利要求1或2所述的磷酸乙醇胺的定量方法中使用的氧化还原酶。


4.根据权利要求3所述的氧化还原酶，其中，
所述氧化还原酶是属于EC号1.4或EC号1.5的氧化还原酶。


5.根据权利要求4所述的氧化还原酶，其中，
所述属于EC号1.4或EC号1.5的氧化还原酶是从伯胺脱氢酶、单胺脱氢酶、二胺脱氢酶、多胺脱氢酶、乙醇胺脱氢酶、酪胺脱氢酶、苯基乙胺脱氢酶、苄胺脱氢酶、组胺脱氢酶、5-羟色胺脱氢酶、精胺脱氢酶、亚精胺脱氢酶、β-丙氨酸脱氢酶、γ-氨基丁酸(GABA)脱氢酶、牛磺酸脱氢酶、尸胺酸脱氢酶以及胍丁胺脱氢酶中选择的氧化还原酶。


6.根据权利要求5所述的氧化还原酶，其中，
所述牛磺酸脱氢酶包含大亚基。


7.根据权利要求4所述的氧化还原酶，其中，
所述氧化还原酶是指属于EC号1.4.3或EC号1.5.3的氧化还原酶。


8.根据权利要求7所述的氧化还原酶，其中，
所述氧化还原酶是从伯胺氧化酶、单胺氧化酶、二胺氧化酶、多胺氧化酶、乙醇胺氧化酶、酪胺氧化酶、苯基乙胺氧化酶、苄胺氧化酶、组胺氧化酶、5-羟色胺氧化酶、精胺氧化酶、亚精胺氧化酶、β-丙氨酸氧化酶、γ-氨基丁酸(GABA)氧化酶、牛磺酸氧化酶、尸胺酸氧化酶以及胍丁胺氧化酶中选择的氧化还原酶。


9.一种磷酸乙醇胺的定量组合物，含有：
权利要求3至8中任一项所述的氧化还原酶。


10.根据权利要求9所述的磷酸乙醇胺的定量用组合物，含有:
通过...

【专利技术属性】
技术研发人员：一柳敦，钺阳介，平口遥香，
申请(专利权)人：龟甲万株式会社，
类型：发明
国别省市：日本;JP