治疗神经性病症的方法技术

公开了一种治疗具有以存在二肽重复蛋白为特征的神经性病症的受试者的方法，所述方法包括使受试者的脑脊液(CSF)与能够去除或降解该毒性蛋白的试剂接触。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】治疗神经性病症的方法相关申请的交叉引用本申请要求于2018年7月23日提交的美国临时申请62/702,186、于2019年3月7日提交的美国临时申请62/815,115的权益和优先权；出于所有目的通过引用将其各自的公开内容整体并入本文。序列表本申请包含序列表，该序列表已经以ASCII格式电子提交，并且通过引用整体并入本文。该ASCII副本创建于2019年7月22日，名为ECT-002WO_ST25.txt，大小为26,333字节。
本专利技术总体上涉及一种治疗患有以存在二肽重复蛋白为特征的神经性病症的受试者的方法，该方法包括使所述受试者的脑脊液(CSF)与能够去除或降解该二肽重复蛋白的试剂接触。
技术介绍
肌萎缩性侧索硬化(ALS)和额颞叶退化(FTLD)(包括额颞痴呆(FTD))是进行性末期神经系统疾病。100,000人中有2人受ALS影响，并且ALS曾经被表征为大脑和脊髓中的运动神经元退化，通常在症状发作后三年内导致进行性痉挛、肌无力和肌萎缩、并最终由于呼吸衰竭而死亡。最近，越来越多的人认为ALS是一种多系统病症，在最多50％的患者中都有额颞叶功能(例如认知和行为)受损(Giordana等,Neurol.Sci.,200132,9-16；Lomen-Hoerth等,Neurology,2003,59,1077-1079；Phukan等,LancetNeurol.,2007,6,994-1003)。额颞叶退化(FTLD)是老年性痴呆的第二最常见原因，其特征是大脑额叶和颞叶的退化，导致人格和行为的进行性改变，伴随语言障碍，但相对保留知觉和记忆(Graff-Radford和Woodruf，Neurol.2007,27,48-57)。这两种疾病的病因都很复杂，除了遗传因素外，环境因素也可能导致其发病(Andersen和Al-Chalabi,Nat.Rev.Neurol.2011,7,603-615；Paulson和Igo,SeminNeurol.,2011,31,449-360)。约十分之一的ALS患者和约一半的FTD患者具有这两种疾病中的一种或两种的家族史(ALS-FTD)，但可以解释这些家族性疾病形式的基因直到最近才得以知晓。2011年发表的两项独立研究发现，在具有ALS-FTD阳性史的两个不同家族中，在9号染色体开放阅读框72基因(C9orf72)的非编码区中存在六核苷酸GGGGCC重复扩张序列(DeJesus-Hernandez等,Neuron,2011,72,245-256；Renton等,Neuron,2011,72,257-268)。包含这些扩张序列的RNA转录物经过重复相关的非ATG(RAN)翻译形成五个二肽重复蛋白(GA，GP，GR，AP和PR)，这些蛋白在体外在神经元培养物中和体内表达时已显示会引起神经退行性变(Westergard等，CellRep.2016,17,645-652)。
技术实现思路
本专利技术的一个方面提供了一种治疗以脑脊液(CSF)中存在二肽重复蛋白为特征的神经性病症的方法，该方法包括使有此需要的受试者的CSF与有效量的能够去除或降解所述二肽重复蛋白的蛋白酶接触，其中所述二肽重复蛋白包含二肽氨基酸序列的两个或更多个重复。在某些实施方式中，二肽氨基酸序列选自甘氨酸-丙氨酸(GA)、甘氨酸-精氨酸(GR)、丙氨酸-脯氨酸(AP)、甘氨酸-脯氨酸(GP)和脯氨酸-精氨酸(PR)。在某些实施方式中，二肽氨基酸序列是甘氨酸-精氨酸(GR)。在某些实施方式中，二肽氨基酸序列是甘氨酸-丙氨酸(GA)。在某些实施方式中，二肽重复蛋白包含二肽氨基酸序列的四个或更多个重复。在某些实施方式中，二肽重复蛋白包含二肽氨基酸序列的六个或更多个重复。在某些实施方式中，二肽重复蛋白包含二肽氨基酸序列的八个或更多个重复。在某些实施方式中，二肽重复蛋白包含二肽氨基酸序列的十个或更多个重复。在某些实施方式中，二肽重复蛋白包含二肽氨基酸序列的75个或更多个重复。在某些实施方式中，二肽重复蛋白包含二肽氨基酸序列的150个或更多个重复。在某些实施方式中，二肽重复蛋白包含二肽氨基酸序列的700个或更多个重复。在某些实施方式中，二肽重复蛋白是突变的染色体9开放阅读框72(C9orf72)蛋白。在某些实施方式中，神经性病症选自肌萎缩性侧索硬化(ALS)、额颞痴呆(FTD)和额颞叶退化(FTLD)。在某些实施方式中，蛋白酶选自由胰蛋白酶、凝血酶、蛋白酶K、弹性蛋白酶、因子Xa、激肽释放酶、梭菌蛋白酶、钙蛋白酶、组织蛋白酶和嗜热菌蛋白酶组成的组。在某些实施方式中，蛋白酶是胰蛋白酶。在某些实施方式中，蛋白酶是弹性蛋白酶。在某些实施方式中，蛋白酶是梭菌蛋白酶。在某些实施方式中，梭菌蛋白酶未被还原剂活化。在某些实施方式中，蛋白酶是激肽释放酶。在某些实施方式中，激肽释放酶是激肽释放酶-6(神经脉蛋白(neurosin))或激肽释放酶-5。在某些实施方式中，激肽释放酶6为前体形式，并且在本公开的治疗方法中使用之前或使用期间被赖氨酰内肽酶激活。在某些实施方式中，将蛋白酶固定在固体基体上。在某些实施方式中，固体基体包括多孔固体基体。在某些实施方式中，固体基体包括交联树脂。在某些实施方式中，交联树脂包括琼脂糖树脂。在某些实施方式中，通过共价交联将蛋白酶固定至固体基体。在某些实施方式中，使蛋白酶与CSF原位接触。在某些实施方式中，固体基体包含在植入受试者体内的系统中。在某些实施方式中，该系统被植入受试者的蛛网膜下腔中。在某些实施方式中，该系统进一步包括用于去除大生物分子的尺寸过滤器。在某些实施方式中，在与蛋白酶接触之前，从受试者中移出CSF，并且在与蛋白酶接触之后将CSF施用返回受试者。在某些实施方式中，该方法进一步包括在将CSF施用返回受试者之前过滤CSF以去除大生物分子的步骤。在某些实施方式中，该方法进一步包括检测受试者的CSF中的二肽重复蛋白的步骤。在某些实施方式中，该检测步骤在接触步骤之前进行，从而鉴定出适合治疗的受试者。在某些实施方式中，与没有任何神经性病症的受试者相比，被鉴定为适合治疗的受试者在CSF中具有升高水平的二肽重复蛋白。在某些实施方式中，受试者是人。通过考虑下文的具体实施方式、实施例和权利要求，其他目的和优点对于本领域技术人员将变得显而易见。附图说明图1A-1D是显示出在PBS缓冲液中胰蛋白酶消化(GR)10的结果(已归一化)的柱状图：图1A是对照固定化反应的柱状图，树脂，无蛋白酶。图1B是对照溶液反应的柱状图，缓冲液，无蛋白酶。图1C是显示出在PBS缓冲液中固定化胰蛋白酶和商购的固定化胰蛋白酶消化(GR)10的柱状图。图1D是显示出溶液中胰蛋白酶消化对(GR)10的柱状图。图2A-2D是显示出在PBS缓冲液中弹性蛋白酶消化(GR)10的结果(已归一化)的柱状图：图2A是对照固定化反应的柱状图，树脂，无蛋白酶。图2B是对照溶液反应的柱状图，缓冲液，无蛋白酶。图2C是显示出固定化的弹性蛋本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种治疗以脑脊液(CSF)中存在二肽重复蛋白为特征的神经性病症的方法，所述方法包括使有需要的受试者的CSF与有效量的能够去除或降解所述二肽重复蛋白的蛋白酶接触，其中，所述二肽重复蛋白包含二肽氨基酸序列的两个或更多个重复。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20180723 US 62/702,186;20190307 US 62/815,1151.一种治疗以脑脊液(CSF)中存在二肽重复蛋白为特征的神经性病症的方法，所述方法包括使有需要的受试者的CSF与有效量的能够去除或降解所述二肽重复蛋白的蛋白酶接触，其中，所述二肽重复蛋白包含二肽氨基酸序列的两个或更多个重复。


2.如权利要求1所述的方法，其中所述二肽氨基酸序列选自甘氨酸-丙氨酸(GA)、甘氨酸-精氨酸(GR)、丙氨酸-脯氨酸(AP)、甘氨酸-脯氨酸(GP)和脯氨酸-精氨酸(PR)。


3.如权利要求2所述的方法，其中所述二肽氨基酸序列是甘氨酸-精氨酸(GR)。


4.如权利要求2所述的方法，其中所述二肽氨基酸序列是甘氨酸-丙氨酸(GA)。


5.如权利要求1至4中任一项所述的方法，其中所述二肽重复蛋白包含所述二肽氨基酸序列的4个或更多个重复。


6.如权利要求1至5中任一项所述的方法，其中所述二肽重复蛋白包含所述二肽氨基酸序列的6个或更多个重复。


7.如权利要求1至6中任一项所述的方法，其中所述二肽重复蛋白包含所述二肽氨基酸序列的8个或更多个重复。


8.如权利要求1至7中任一项所述的方法，其中所述二肽重复蛋白包含所述二肽氨基酸序列的10个或更多个重复。


9.如权利要求1至8中任一项所述的方法，其中所述二肽重复蛋白包含所述二肽氨基酸序列的75个或更多个重复。


10.如权利要求1至9中任一项所述的方法，其中所述二肽重复蛋白包含所述二肽氨基酸序列的150个或更多个重复。


11.如权利要求1至10中任一项所述的方法，其中所述二肽重复蛋白包含所述二肽氨基酸序列的700个或更多个重复。


12.如权利要求1至11中任一项所述的方法，其中所述二肽重复蛋白是突变的9号染色体开放阅读框72(C9orf72)蛋白。


13.如权利要求12所述的方法，其中所述神经性病症选自肌萎缩性侧索硬化(ALS)、额颞痴呆(FTD)和额颞叶退化(FTLD)。


14.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述蛋白酶选自胰蛋白酶、凝血酶、蛋白酶K、弹性蛋白酶、因子Xa、激肽释放酶、梭菌蛋白酶、钙蛋白酶、组织蛋白酶和嗜热菌蛋白酶。


15.如权利要求14所述的方法，其中所述蛋白酶是胰蛋白酶。


16.如权利要求14所述的方法，其中所述蛋白酶是弹性蛋白酶。


17.如权利要求14所述的方法，其中所述蛋白酶是梭菌蛋白酶。


18.如权利要求17所述的方法，其中所述梭菌蛋白酶未用还原剂活化。


19.如权利要求14所述的方法，其中所述蛋白酶是激肽释放酶。


20.如权利要求19所述的方法，其中所述激肽释放酶是激肽释放酶-6或激肽释放酶-5。


21.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述蛋白酶固定在固体基体上。


22.如权利要求21所述的方法，其中所述固体基体包含多孔固体基体。


23.如权利要求21所述的方法，其中所述固体基体包含交联树脂。


24.如权利要求23所述的方法，其中所述交联树脂包含琼脂糖树脂。


25.如权利要求21至24中任一项所述的方法，其中所述蛋白酶通过共价交联至所述固体基体来固定。


26.如权利要求1至25中任一项所述的方法，其中所述蛋白酶与所述CSF原位接触。


27.如权利要求26所述的方法，其中所述固体基体包含在植入所述受试者体内的系统中。


28.如权利要求27所述的方法，其中，所述系统被植入所述受试者的蛛网膜下腔中。


29.如权利要求27或28所述的方法，其中，所述系统还包括去除大生物分子的尺寸过滤器。


30.如权利要求1至25中任一项所述的方法，其中所述CSF在与所述蛋白酶接触之前从所述受试者中移出，并且在与所述蛋白酶接触之后被施用返回所述受试者。


31.如权利要求30所述的方法，其进一步包括：在将CSF施用返回所述受试者之前过滤CSF以去除大生物分子的步骤。


32.如前述权利要求中任一项所述的方法，其进一步包括从所述受试者的CSF中检测所述二肽重复蛋白的步骤。


33.如权利要求32所述的方法，其中，所述检测步骤在所述接触步骤之前进行，从而鉴定所述受试者适合于所述治疗。


34.如权利要求33所述的方法，其中，与没有任何神经性病症的受试者相比，被鉴定为适合于所述治疗的受试者在CSF中具有升高水平的二肽重复蛋白。


35.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述受试者是人。


36.能够去除或降解二肽重复蛋白的蛋白酶在治疗以脑脊...

【专利技术属性】
技术研发人员：M·A·纳维亚，K·罗伊特，J·J·佛莱明，
申请(专利权)人：因柯利尔疗法公司，
类型：发明
国别省市：美国;US