一种毛发毒品五联荧光检测试纸及其制备方法技术

本发明专利技术提出了一种毛发毒品五联荧光检测试纸及其制备方法。本发明专利技术阐述同时检测毛发中五个毒品项目的荧光五联检测试纸及其制备方法。所述五联检试纸包括五个检测项目：冰毒(MET)、氯胺酮(KET)、吗啡(MOP)、大麻(THC)、摇头丸(MDMA)。所述每个项目试纸包括PVC底板、样品垫、结合物垫、硝酸纤维素膜(NC膜)以及吸水纸几大组成部分。本发明专利技术的试纸利用免疫荧光层析技术，检测结果准确性强、灵敏度高、效率高、便携易操作，适合样本的现场批量筛查。组装至定制卡壳中，可人工判断也可使用配套自研设备，检测快速、精准，直接检测出毛发中五个毒品项目的含量情况。

【技术实现步骤摘要】
一种毛发毒品五联荧光检测试纸及其制备方法
本专利技术涉及生物检测领域，具体而言，本专利技术涉及同时检测毛发中五个毒品项目(包括冰毒、氯胺酮、吗啡、大麻、摇头丸)的荧光五联检测试纸及其制备方法。
技术介绍
一直以来，在吸毒检测领域，检材一般仅限于唾液、血液或尿液样本，相对于这些检材获取繁琐，毛发样本提取更简便，无需特殊场所，不会侵犯受检人隐私问题，在最大程度保证了受检人的公民权益。另外，毛发检测基于毒品代谢物会被毛发蛋白固定的原理，通过检测相应部位和长度的毛发，能够反映出较长一段时间内的被检测人是否具有吸毒行为，也就能确定吸毒人员是否具有吸毒成瘾的问题。不同于唾液、血液或尿液样本中毒品检出灵敏度μg/ml的检出级别，毛发中毒品检出灵敏度需达到ng/mg的检出级别，如冰毒在唾液中的最低检出含量为50ng/ml，在尿液中的最低检出含量为1000ng/ml，而在毛发中的检出含量0.2ng/mg。本专利技术采用荧光免疫层析技术对毛发中五种毒品进行检测，荧光免疫层析技术作为一项新型免疫检测技术，相对于传统胶体金免疫层析，荧光免疫层析技术保留了现场快速检测的特点，但同时也具备灵敏度更高、特异性更强，并且可以消除胶体金背景对检测结果影响的优势。
技术实现思路
针对现有技术，本专利技术提供了一种毛发毒品五联荧光检测试纸，该试纸可同时定性检测毛发中的冰毒、氯胺酮、吗啡、大麻、摇头丸五个项目，节省人力物力。采用了荧光免疫层析技术，可更稳定、更灵敏的得出检测结果。本专利技术采用定制卡壳组装装配试纸，可采用特定光源对结果进行人工判断，也可匹配使用自研配套设备进行结果读取，3～5分钟即可高速、精准的读取结果并出具规范的检测报告，操作人员经过简单培训即可自行进行操作，对于专业水平要求低。本专利技术五个项目试纸采用同一卡壳组装，每个项目试纸各自独立又相互连接。每个项目均各自有一条C线控制线，一条T线测试线，验证互不干扰；五个项目试纸使用样品连接垫进行连接，同一样本即可同时检测五个项目。本专利技术所述各荧光试纸包括PVC底板、样品垫、结合物垫、硝酸纤维素膜(NC膜)以及吸水纸。每个组成部分按照层析方向相互重叠组合在一起，再裁切成4mm宽的试纸小条，再将五个项目的试纸装至定制卡壳对应位置中，使用样品连接垫连接在一起，盖上上盖即得五联检测试纸。具体操作如下：1.将所述硝酸纤维素膜(NC膜)粘贴在所述PVC底板设定好的中部位置；2.将所述吸水纸粘贴在所述硝酸纤维素膜(NC膜)上侧并与硝酸纤维素膜之间保持1.5～0.2cm的重叠；3.将所述结合物垫粘贴在所述硝酸纤维素膜(NC膜)的另外一侧底板上，并与硝酸纤维素膜保持1.5～0.2cm的重叠；4.将所述样品垫粘贴在所述结合物垫的另一侧底板上，并与结合物垫保持1.5～0.2cm的重叠。本专利技术涉及的试纸NC膜上设置有一条测试线(T线)和一条控制线(C线)，C线喷涂有羊抗鼠或羊抗兔，T线喷涂有对应各项目BSA偶联的抗原。样品垫、结合垫都是经过了各自处理液浸泡再烘干的，其中结合垫上需要喷涂上对应项目的荧光微球-抗体结合物，经过烘干才能得到结合物垫。具体操作如下：选用Bangs粒径为200nm的荧光微球，分别使用兔IgG多克隆抗体、冰毒单抗、氯胺酮单抗、吗啡单抗、大麻单抗、摇头丸单抗进行标记，每个原料标记的终浓度不一样，先将原料稀释至中间浓度后再进行标记。其中中间浓度：兔IgG多克隆抗体为2.0mg/ml，冰毒单抗为1.0mg/ml，氯胺酮单抗1.0mg/ml，吗啡单抗为1.0mg/ml，大麻单抗为0.5mg/ml，摇头丸单抗为1.0mg/ml。1.取225μlMES溶液(浓度0.05M，PH值6.0)，加入25μl荧光微球，混匀后加入10μlEDC(15mg/ml)以及10μlNHS(15mg/ml)溶液，活化20分钟；2.使用高速冷冻离心机进行离心，温度4℃，转速12000转/分钟；3.去除上清，加入225μlBB溶液(浓度0.05M，PH6.0)，加入中间浓度的抗体25μl，超声分散后标记3小时；4.使用高速冷冻离心机进行离心，温度4℃，转速12000转/分钟；5.去除上清，加入250μl封闭液，封闭1小时；6.使用高速冷冻离心机进行离心，温度4℃，转速12000转/分钟；7.去除上清，加入250μl复溶液，超声分散；8.所得标记好的荧光微球-抗体结合物喷涂至经过处理的结合垫片上，喷量控制在2～5μl/cm之间，经烘箱37℃烘干8～12小时即得喷涂有荧光微球-抗体结合物的结合物垫，取出后密封室温保存备用。需要说明的是，一种毛发毒品五联荧光检测试纸为五联检测试纸，可同时检测五个不同项目，组装至定制卡壳，五联检测试纸只需要一次性加600μl～800μl毛发提取液至加样口，试纸层析3～5min后，即可匹配特定光源照射然后人工进行判断结果，也可以通过自研配套设备进行结果读取，可根据实际情况需求、结果保存需求、成本预算等进行选择。另外，一种毛发毒品五联荧光检测试纸采用的荧光免疫层析技术，是将免疫荧光与免疫层析技术相结合，利用抗原抗体特异性反应而建立的，相对于胶体金试纸，荧光检测试纸对于样本的抗干扰性能更强，检出灵敏度更高，结果重复性也更好。另一方面，相对于其他毒品检测技术，如气相色谱、液相色谱、气质联用等方法，五联免疫荧光层析试纸既解决了大型仪器无法现场及即时检测的问题，也节约了检测时间以及经费成本。附图说明为了更清楚地说明本专利技术产品、产品制备以及使用，下面给出产品相应附图，以下为附图的简单的介绍：图1是本专利技术荧光免疫检试纸的侧面结构示意图；图2是本专利技术荧光五联卡的装配后的内部结构示意图；图3是本专利技术荧光五联卡的装配后的外部结构示意图；图4是本专利技术产品制备过程图；图5是本专利技术试纸结果判断图。具体实施方式本专利技术所提供一种毛发毒品五联荧光检测试纸可同时定性检测毛发中的冰毒、氯胺酮、吗啡、大麻、摇头丸。此五联荧光检测试纸包含五个项目试纸，通过样品连接垫连接组合在一起得到五联检测试纸，每一个项目试纸包括硝酸纤维素膜(NC膜)、吸水纸、样品垫、结合物垫等重要组成部分。其中NC膜上设置有一条测试线(T线)和一条控制线(C线)，C线喷涂有羊抗鼠或羊抗兔，T线喷涂有对应各项目BSA偶联的抗原，结合物垫上喷涂有荧光微球-抗体标记物。下面通过具体实施例和附图对本专利技术申请进一步详细说明实施例1本专利技术可同时检测五个项目，包括冰毒、氯胺酮、吗啡、大麻、摇头丸，每一个项目试纸包含PVC底板、样品垫、结合物垫、硝酸纤维素膜(NC膜)以及吸水纸几个重要组成部分，每个部分按照层析方向按顺序重叠组合在一起，形成五个不同项目的试纸，详细操作如下：步骤1)将所述喷涂有C/T线的硝酸纤维素膜(NC膜)粘贴在所述PVC底板固定位置；步骤2)将所述吸水纸粘贴在所述硝酸纤维素膜(NC膜)上部，吸水纸与硝酸纤维素膜之间保持1.5～2mm的重叠；本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种毛发毒品五联荧光检测试纸，其特征在于，所述荧光试纸组成部分包括PVC底板、样品垫、结合物垫、硝酸纤维素膜(NC膜)以及吸水纸。/n

【技术特征摘要】
1.一种毛发毒品五联荧光检测试纸，其特征在于，所述荧光试纸组成部分包括PVC底板、样品垫、结合物垫、硝酸纤维素膜(NC膜)以及吸水纸。


2.一种毛发毒品五联荧光检测试纸，其特征在于，采用了荧光免疫层析技术，根据不同待测项目，采用不同的单克隆抗体和抗原，可定性检测毛发中五个毒品项目的含量情况。


3.一种毛发毒品五联荧光检测试纸，其特征在于，产品包括五个项目试纸，五个项目试纸组装至定制卡壳内，检测卡可匹配自研配套设备进行结果读取，直接出具规范的检测报告。


4.一种毛发毒品五联荧光检测试纸，其特征在于，所测的五个项目包括冰毒(MET)、氯胺酮(KET)、吗啡(MOP)、大麻(THC)、摇头丸(MDMA)。


5.一种毛发毒品五联荧光检测试纸，其特征在于，仅需3～5分...

【专利技术属性】
技术研发人员：王泳钦，曹佳坤，王丽娜，刘卓，彭媛媛，
申请(专利权)人：古镜科技深圳有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44