一种用敏感频率电场抑制病变组织细胞生长的方法和装置制造方法及图纸

本发明专利技术提供了一种用敏感频率电场抑制病变组织细胞生长的方法和装置，所述方法包括以下步骤：获取所述病变组织细胞并进行培养；在所述培养后，测量病变组织细胞的细胞半径；基于测得的所述细胞半径来选择敏感频率，以及使用具有所述敏感频率的电场来处理病变组织。同时，还可以结合实测抑制病变组织细胞生长来选择最佳敏感频率。相比于现有技术中的电场抑制病变组织生长的方法，使用本发明专利技术的方法和装置能够更加快速准确地找到适用于特定病变组织细胞的敏感频率，还能够根据病变组织细胞的发展及时进行敏感频率的跟踪校正，处理效果较传统固定频率更加显著，从而开辟个体化应用方案。

【技术实现步骤摘要】
一种用敏感频率电场抑制病变组织细胞生长的方法和装置
本专利技术属于医疗生物
，更具体地，本专利技术通常涉及一种用敏感频率电场抑制病变组织细胞生长的方法和装置。
技术介绍
当恶性病变进入发展期时，病变组织细胞处于快速生长的状态，数量与时间呈指数关系。目前肿瘤电场治疗法的基本原理均建立在电场对肿瘤细胞有丝分裂具有阻碍破坏作用的基础上，使用200KHz的电信号产生的电场对患者肿瘤细胞的快速生长进行抑制，以达到治疗效果。在细胞实验中发现，用不同频率的电信号产生的电场对多位患者的肿瘤细胞快速生长进行抑制，抑制效果各不相同，有的150KHz效果好，有的180KHz效果好，有的200KHz效果好，有的220KHz效果好，有的240KHz效果好，200KHz是对肿瘤细胞快速生长有抑制作用频率段的中心频率，但对于个体患者而言，不一定是最好的，甚至有的患者的肿瘤细胞对200KHz电信号产生的电场不敏感，导致抑制效果达不到治疗的需要。通过进一步的实验表明，同一位患者的病情进展到不同阶段时，其病变组织细胞的敏感频率也有不同，多数患者的病变组织细胞的敏感频率是随着病情的进展有变低的趋势。使用敏感频率产生的电场对患者的病变组织细胞进行抑制，效果要比使用目前的统一固定频率好。如果能够根据病情的发展及时进行敏感频率跟踪校正，效果会更加显著。因此可以得出使用有针对性的敏感频率产生的电场对患者的病变组织进行抑制，效果比统一频率要好。因此，基于目前的情况来看，快速找到适用于不同患者在不同时期的敏感频率变成非常重要，这样可以大幅提高治疗的效率。然而，在现有技术中，在确定不同的病变组织最佳的抑制生长电场频率方面仍存在过程复杂或结果不准确等不足。使用敏感频率电场抑制病变组织细胞生长的治疗方法应用于临床后，将会明显提高肿瘤电场疗法的效果。
技术实现思路
本专利技术的目的在于克服目前的现有技术在抑制不同个体、不同阶段病变组织细胞使用统一频率而带来的效果不好，以及测量抑制细胞生长电场的敏感频率时存在过程复杂或结果不精确等缺陷，从而提供一种新型的用敏感频率电场抑制病变组织细胞生长的方法。本专利技术人发现，即便对半径相同的不同细胞系的细胞进行抑制增值电场敏感频率试验，半径相同的不同细胞系的细胞表现出基本相同的敏感频率，即细胞的敏感频率与细胞的半径(或者细胞体积)有关，与细胞的种类无明显关系，从而完成了本专利技术。为了实现上述目的，在一方面，本专利技术提供了一种用敏感频率电场抑制病变组织细胞生长的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：(1)获取所述病变组织细胞并进行培养；(2)在所述培养后，测量病变组织细胞的细胞半径；(3)基于测得的所述细胞半径来选择敏感频率；以及(4)使用具有所述敏感频率的电场来处理病变组织细胞。另一方面，本专利技术提供了一种选择电场抑制病变组织细胞生长的敏感频率的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：(1)获取所述病变组织细胞并进行培养；(2)在所述培养后，测量病变组织细胞的细胞半径；(3)基于测得的所述细胞半径来选择敏感频率。对于步骤(1)，在本专利技术的一个优选实施方式中，所述病变组织细胞可以是通过从病变组织样本中分离的方式来获取的。根据本专利技术，对所述分离的方式没有特别的限制，可以使用本领域中常见的细胞提取技术来实现。例如，在一个实施方式中，可以将病变组织样本尽量剪碎，以形成小碎块，然而向培养皿中加入Trypsin-EDTA(0.25％)，37℃下孵育2-3min，随后加入培养基(DMEM+10％FBS)终止消化，再将细胞过细胞筛网去除多余的组织残渣，将过滤后的细胞转移至离心管，以制备细胞悬液。其中，Trypsin-EDTA胰酶是本领域最常用的细胞分离试剂，为223个氨基酸组成的单链多肽，是胰蛋白酶原(zhitrypsinogen)在Lys6和Ile7之间切除氨基N末端6肽得到。在本专利技术的一个优选实施方式中，所述培养可以包括但不限于原代培养或PDX模型建立，从而获得可进行半径测量的细胞数量。在一个实施方式中，所述原代培养可以获得与病变组织样本中的病变组织细胞性能最匹配的细胞，相比之下，传代培养或细胞系培养往往与原代细胞有不一样的遗传和表型，比如某些基因表达会增高或降低，细胞表面抗原等都有可能发生变化，细胞系经过体外无数次培养传代，遗传性状已经与体内细胞发生了明显变化。另外，对培养后的细胞数量没有特殊的要求，只要能够用于进行后续的细胞半径(或细胞体积)测量即可。对于步骤(2)，在本专利技术的一个优选实施方式中，所述细胞半径(或细胞体积)的测量可以通过用流式细胞仪估算、细胞计数仪测量、或在显微镜下用目镜微尺测量的方式来进行，但不限于此，该测量也可以通过本领域中其他常用的细胞半径测量方法来进行。另外，所述细胞半径的测量可以通过测量单个细胞的半径、或通过测量多个细胞的半径然而除以细胞数量的方式来进行。进一步地，为了测得更准确的细胞半径，可以进行多次测量来得到一个更准确的结果值。例如，在本专利技术的另一个优选实施方式中，所述测量可以进行两次或更多次，并将所述两次或更多次的测量值计算平均值作为所述细胞半径的值。对于步骤(3)，由于本专利技术人发现细胞的敏感频率与细胞的半径有关，与细胞的种类无明显关系，因而可以基于测得的所述细胞半径来选择敏感频率。具体地，基于细胞半径和敏感频率试验的测试结果发现，细胞半径与电场频率存在一定的反比例关系，细胞半径越大，敏感频率越低；反之，细胞半径越小，敏感频率越高。在本专利技术的一个优选实施方式中，所述选择敏感频率可以包括：通过绘图法或计算法来确定所述敏感频率。图1示出了根据本专利技术一个实施方式得到的敏感频率与细胞半径的关系图。由于敏感频率与细胞半径二者之间的关系还可能受到不同实验人员或装置以及其他因素的影响，在进行步骤(3)时，可以使用如图1所示的关系图和公式来得到选择敏感频率，或者基于当前实验人员习惯的方式重新获得示出二者关系的标准曲线图和公式，然而再选择敏感频率。根据本专利技术，所述绘图法表示基于横坐标中的细胞半径对应地在曲线中寻找纵坐标中的频率值作为敏感频率，而所述计算法表示基于细胞半径和根据图像中敏感频率与细胞半径的公式直接计算频率值作为敏感频率。在本专利技术的一个优选实施方式中，所述计算法可以包括将测得的所述细胞半径代入公式f＝k/l中以得到所述敏感频率，其中l表示细胞半径，并且f表示敏感频率，k为常数。在一种优选的实施方式中，k可以为1700-2100KHz·μm、1800-2000KHz·μm、更优选地1900KHz·μm。由于患者病变组织细胞的大小不是均匀的，个体之间在形状大小都存在差异，因此本专利技术所提供的k值只是例示性的，对于其他瘤种的k值也会略微存在差异。另外，使用计算法与绘图法得到的结果可能略有误差，但二者非常接近，为实验和临床上便于操作，敏感频率通常可以取尾数为0或5的整数中间值。另外，本专利技术所提供的基于细胞半径选择敏感频率的方法还可以与敏感频率试验联合使用。例如，具体地，首先通过本专利技术提供的基于细胞半径选择敏感频率的方法寻找敏感频率的一个粗略本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用敏感频率电场抑制病变组织细胞生长的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：/n(1)获取所述病变组织细胞并进行培养；/n(2)在所述培养后，测量病变组织细胞的细胞半径；/n(3)基于测得的所述细胞半径来选择敏感频率；以及/n(4)使用具有所述敏感频率的电场来处理病变组织细胞。/n

【技术特征摘要】
1.一种用敏感频率电场抑制病变组织细胞生长的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：
(1)获取所述病变组织细胞并进行培养；
(2)在所述培养后，测量病变组织细胞的细胞半径；
(3)基于测得的所述细胞半径来选择敏感频率；以及
(4)使用具有所述敏感频率的电场来处理病变组织细胞。


2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述病变组织细胞是通过从病变组织样本中分离的方式来获取的。


3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述培养包括但不限于原代培养或PDX模型建立，从而获得可进行半径测量的细胞数量。


4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述细胞半径的测量通过用流式细胞仪估算、细胞计数仪测量、或在显微镜下用目镜微尺测量的方式来进行。


5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述测量进行两次或更多次，并将所述两次或更多次的测量值计算平均值作为所述细胞半径的值。


6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述选择敏感频率包括：通过绘图法或计算法来确定所述敏感频率。


7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述计算法包括将测得的所述细胞半径代入公式f＝k/l中以得到所述敏感频率，其中l表示细胞半径，f表示敏感频率，并且k为常数。


8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述选择敏感频率包括：通过绘图法或计算法来确定预敏感频率，并在预敏感频率±50％的频率范围内通过敏感频率试验确定所述敏感频率。


9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述敏感频率试验包括：设置具有在所述频率范围内的不同频率的多个电场来...

【专利技术属性】
技术研发人员：常九生，陈凌，陈迪康，周单，
申请(专利权)人：湖南安泰康成生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：湖南;43