一种靶向雌激素受体α的微小RNA及其抗肿瘤用途制造技术

本发明专利技术涉及一种微小RNA在抗肿瘤中的用途。更具体地，本发明专利技术涉及微小RNA‑3074‑5p在抗雌激素受体α(ERα)阳性肿瘤中的用途，及其在化疗增敏中的用途。本发明专利技术发现的微小RNA‑3074‑5p能够抑制ERα阳性乳腺癌细胞的增殖，以及乳腺癌细胞中ERα和抗凋亡蛋白Bcl‑2的表达水平，诱导ERα阳性乳腺癌细胞凋亡，还能增强化疗药物的抗肿瘤作用，为有效治疗ERα阳性肿瘤提供新的途径和手段。

【技术实现步骤摘要】
一种靶向雌激素受体α的微小RNA及其抗肿瘤用途
本专利技术属于医药学领域，更具体地涉及一种靶向雌激素受体α的微小RNA及其抗肿瘤用途。
技术介绍
乳腺癌是全球女性中最普遍发生的恶性肿瘤，2015年中国女性乳腺癌发生率约为15％。虽然乳腺癌的临床预后及五年生存率已有显著改善，但化疗耐药等问题仍使其死亡率高居女性癌症死亡率第二位。约70％的原位乳腺癌表达雌激素受体α(ERα)，ERα不仅是乳腺癌治疗的最佳预后指标，而且也是乳腺癌内分泌治疗的关键靶分子。ERα作为一种细胞核转录因子，能够介导受雌激素刺激的肿瘤细胞增殖。ERα在乳腺癌、子宫内膜癌及卵巢癌中高表达，并成为最早的治疗靶点之一。除此之外，有报道显示ERα促进男性肝癌发生发展，并且参与调节肝癌发生的主要危险因素，即HBV感染的病理过程。有研究用慢病毒介导的siRNA抑制ERα表达，能够有效抑制肝癌细胞增殖及侵袭能力，并诱导凋亡。微小RNA即microRNA或miRNA，一般为长19-23个核苷酸的单链非编码RNA序列，通过与靶基因mRNA的3’-UTR区，甚至与靶基因蛋白编码区互补结合，调控其转录或翻译。MicroRNA可通过与靶基因mRNA特定区域结合而调控其表达，具有广泛的生理调控作用。文献报道，miRNA在乳腺癌中表达异常，并参与调控乳腺癌细胞的增殖、凋亡和转移等。近年来，miRNAs在人类疾病临床诊治中的应用价值受到广泛关注，已证实，“致癌miRNAs”特异性抑制剂在小鼠体内能抑制肿瘤生长和转移，而“抑癌miRNAs”类似物也是潜在的新药，miR-34类似物MRX34作为抗肿瘤药物已进入临床试验阶段。目前，关于miRNA在癌症治疗中的应用的研究还有许多不足，本领域迫切需要对肿瘤组织中异常表达的miRNA进行进一步的研究。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种靶向雌激素受体α的微小RNA及其抗肿瘤用途。更具体地，本专利技术的目的在于提供microRNA-3074-5p在抗肿瘤耐药及抗肿瘤药物增敏中的应用在本专利技术的第一方面，提供了一种活性成分的用途，其中，所述的活性成分选自下组：(a)miRNA-3074-5p家族的微小RNA，所述miRNA-3074-5p家族的微小RNA包括：miRNA-3074-5p或经修饰的miRNA-3074-5p衍生物；(b)前体miRNA，所述的前体miRNA能在宿主内加工成(a)中所述的miRNA-3074-5p；(c)多核苷酸，所述的多核苷酸能被宿主转录形成(b)中所述的前体miRNA，并加工形成(a)中所述的微小RNA；(d)表达载体，所述表达载体含有(a)中所述的miRNA-3074-5p、或(b)中所述的前体miRNA、或(c)中所述的多核苷酸；所述活性成分用于制备增强肿瘤细胞对药物敏感性的组合物、或制备预防或治疗耐药性肿瘤的组合物。在另一优选例中，所述的miRNA-3074-5p的序列如SEQIDNO.:1所示。在另一优选例中，所述的经修饰的miRNA衍生物，其修饰选自下组的一种或多种修饰形式：核苷酸的糖基修饰、核苷酸之间连接方式的修饰、胆固醇修饰、锁核苷酸修饰、肽段修饰、脂类修饰、卤素修饰、烃基修饰、和核酸修饰。在另一优选例中，所述的核苷酸的糖基修饰包括2-O-甲基的糖基修饰、2-O-甲氧乙酯的糖基修饰、2-O-烷基的糖基修饰、2-氟代的糖基修饰、糖环修饰、锁核苷酸修饰；和/或所述的核苷酸之间连接方式的修饰包括硫代磷酸修饰、磷酸烷基化修饰；和/或所述的核酸修饰包括“TT”修饰。在另一优选例中，(a)中所述经修饰的miRNA衍生物是具有式I所示结构的化合物单体或其多聚体：(X)n-(Y)m式I，在式I中，各X为(a)中所述的微小RNA；各Y独立地为促进微小RNA施药稳定性的修饰物；Y连接于X的左侧、右侧或中间；n为1-100的(较佳地1-20)正整数(较佳地n为1、2、3、4或5)；m为1-1000的(较佳地1-200)正整数；各“-”表示接头、化学键、或共价键。在另一优选例中，所述的接头是长度为1-10个碱基的核酸序列。在另一优选例中，所述的Y包括(但不限于)胆固醇、类固醇、甾醇、醇、有机酸、脂肪酸、酯、单糖、多糖、氨基酸、多肽、单核苷酸、多核苷酸。在另一优选例中，(c)中所述的多核苷酸具有式II所示的结构：Seq正向-X-Seq反向式II，式II中，Seq正向为能在宿主中被加工成所述的微小RNA核苷酸序列；Seq反向为与Seq正向基本上互补或完全互补的核苷酸序列；X为位于Seq正向和Seq反向之间的间隔序列，并且所述间隔序列与Seq正向和Seq反向不互补；并且式II所示的结构在转入宿主细胞后，形成式III所示的二级结构：式III中，Seq正向、Seq反向和X的定义如上述，||表示在Seq正向和Seq反向之间形成的碱基互补配对关系。在另一优选例中，所述的miR-3074-5p为双链形式(即miR-3074-5pmimic)，其序列为：5’-GUUCCUGCUGAACUGAGCCAG-3’5’-GGCUCAGUUCAGCAGGAACUU-3’在另一优选例中，(d)中所述的表达载体包括：病毒载体和非病毒载体。在另一优选例中，(d)中所述的表达载体包括：腺病毒表达载体、慢病毒表达载体。在另一优选例中，(e)中所述miRNA-3074-5p的激动剂包括：促进miRNA-3074-5p表达的物质、提高miRNA-3074-5p活性的物质。在另一优选例中，所述药物(敏感性增强的药物)选自下组：他莫昔芬、多柔比星、紫杉醇、曲妥珠单抗、多西他赛、或其组合。在另一优选例中，所述耐药性肿瘤是对他莫昔芬产生耐药性的肿瘤。在另一优选例中，所述的肿瘤为雌激素受体α阳性肿瘤。在另一优选例中，所述的肿瘤选自下组：乳腺癌、子宫内膜癌、卵巢癌、子宫颈癌肺癌、肝癌、肾癌、胃癌、肠癌、头颈癌、或其组合。在本专利技术的第二方面，提供了一种药物组合物，所述药物组合物包括药学上可接受的载体和有效量的选自下组的一种或多种活性成分：(a)miRNA-3074-5p家族的微小RNA，所述miRNA-3074-5p家族的微小RNA包括：miRNA-3074-5p或经修饰的miRNA-3074-5p衍生物；(b)前体miRNA，所述的前体miRNA能在宿主内加工成(a)中所述的miRNA-3074-5p；(c)多核苷酸，所述的多核苷酸能被宿主转录形成(b)中所述的前体miRNA，并加工形成(a)中所述的微小RNA；(d)表达载体，所述表达载体含有(a)中所述的miRNA-3074-5p、或(b)中所述的前体miRNA、或(c)中所述的多核苷酸；(e)(a)中所述的微小RNA的激本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种活性成分的用途，其中，所述的活性成分选自下组：/n(a)miRNA-3074-5p家族的微小RNA，所述miRNA-3074-5p家族的微小RNA包括：miRNA-3074-5p或经修饰的miRNA-3074-5p衍生物；/n(b)前体miRNA，所述的前体miRNA能在宿主内加工成(a)中所述的miRNA-3074-5p；/n(c)多核苷酸，所述的多核苷酸能被宿主转录形成(b)中所述的前体miRNA，并加工形成(a)中所述的微小RNA；/n(d)表达载体，所述表达载体含有(a)中所述的miRNA-3074-5p、或(b)中所述的前体miRNA、或(c)中所述的多核苷酸；/n其特征在于，所述活性成分用于制备增强肿瘤细胞对药物敏感性的组合物、或制备预防或治疗耐药性肿瘤的组合物。/n

【技术特征摘要】
20200120 CN 20201006772771.一种活性成分的用途，其中，所述的活性成分选自下组：
(a)miRNA-3074-5p家族的微小RNA，所述miRNA-3074-5p家族的微小RNA包括：miRNA-3074-5p或经修饰的miRNA-3074-5p衍生物；
(b)前体miRNA，所述的前体miRNA能在宿主内加工成(a)中所述的miRNA-3074-5p；
(c)多核苷酸，所述的多核苷酸能被宿主转录形成(b)中所述的前体miRNA，并加工形成(a)中所述的微小RNA；
(d)表达载体，所述表达载体含有(a)中所述的miRNA-3074-5p、或(b)中所述的前体miRNA、或(c)中所述的多核苷酸；
其特征在于，所述活性成分用于制备增强肿瘤细胞对药物敏感性的组合物、或制备预防或治疗耐药性肿瘤的组合物。


2.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述的经修饰的miRNA衍生物，其修饰选自下组的一种或多种修饰形式：核苷酸的糖基修饰、核苷酸之间连接方式的修饰、胆固醇修饰、锁核苷酸修饰、肽段修饰、脂类修饰、卤素修饰、烃基修饰、和核酸修饰。


3.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述的核苷酸的糖基修饰包括2-O-甲基的糖基修饰、2-O-甲氧乙酯的糖基修饰、2-O-烷基的糖基修饰、2-氟代的糖基修饰、糖环修饰、锁核苷酸修饰；和/或
所述的核苷酸之间连接方式的修饰包括硫代磷酸修饰、磷酸烷基化修饰；和/或
所述的核酸修饰包括“TT”修饰。


4.如权利要求1所述的用途，其特征在于，(a)中所述经修饰的miRNA衍生物是具有式I所示结构的化合物单体或其多聚体：
(X)n-(Y)m
式I，
在式I中，
各X为(a)中所述的微小RNA；
各Y独立地为促进微小RNA施药稳定性的修饰物；
Y连接于X的左侧、右侧或中间；
n为1-100的(较佳地1-20)正整数(较佳地n为1、2、3、4或5)；
m为1-1000的(较佳地1-200)正整数；
各“-”表示接头、化学键、或共价键。


5.如权利要求1所述的用途，其特征在于，(c)中所述的多核苷酸具有式II所示的结构：
Seq正向-X-Seq反向
式II，
式II中，
Seq正向为能在宿主中被加工成所述的微小RNA核苷酸序列；
Seq反向为与Seq正向基本上互补或完全互补的核苷酸序列；
X为位于Seq正向和Seq反向之间的间隔序列，并且所述间隔序列与Seq正向和Seq反向不互补；
并且，式II所示的...

【专利技术属性】
技术研发人员：顾文文，张璇，杨龙，甄兴兴，顾一骅，王健，
申请(专利权)人：上海市计划生育科学研究所，
类型：发明
国别省市：上海;31