一种基于基因重组蛋白Tat-hMsrA的眼用组合物及其制备方法技术

本发明专利技术涉及一种基于基因重组蛋白Tat

An ophthalmic composition based on gene recombinant protein Tat hMsrA and its preparation method

【技术实现步骤摘要】
一种基于基因重组蛋白Tat
‑
hMsrA的眼用组合物及其制备方法


[0001]本专利技术属生物医药
，具体涉及一种基于基因重组蛋白Tat
‑
hMsrA的眼用组合物及其制备方法。

技术介绍

[0002]大量现代神经科学研究表明，氧自由基介导的病理损伤参与多种神经系统重大疾病的发生和发展。脑部丰富的脂质含量和相对缺乏的抗氧化酶水平使其在氧化应激中更易受损。多种因素(如异常折叠蛋白积聚、缺血再灌注损伤等)通过线粒体有氧呼吸等途径诱导神经元产生更多的活性氧(ROS)，如O2‑
.、H2O2、OH
·
和1O2，而衰老过程中常伴有ROS清除系统(如谷胱甘肽还原系统、超氧化物歧化酶等)的减弱，从而导致氧自由基或氧化产物的异常积累，引发神经系统重大疾病的发生。
[0003]蛋氨酸亚砜还原酶A(methionine sulfoxide reductase A，MsrA)是目前发现的可在生物体内还原逆转蛋白质蛋氨酸残基氧化结构变化和功能损伤的主要抗氧化酶系统。MsrA在很多生物体中，从进化上非常古老的古细菌大肠杆菌到植物和哺乳动物中均有发现，其抗氧化作用对于生物体的生存具有特别重要的意义。大量研究表明，MsrA是一种存在于生物体中的抗氧化修复因子。过表达MsrA基因可以显著减轻氧化应激引起的人T细胞、人Lens细胞、PC12细胞和WI
‑
38SV40等细胞的损伤和凋亡。
[0004]目前，白内障和干眼症等眼部疾病的发病率较高，而且呈低龄化、发病率上升的趋势。目前对于上述疾病并没有较好的预防和早期干预措施。
[0005]中国专利“CN101974089B”就公开了融合有TAT蛋白转导结构域和人源性蛋氨酸亚砜还原酶hMsrA以及硫氧还原蛋白Trx所形成的融合蛋白及其制备方法和在神经细胞保护方面的应用。但是，目前上述蛋白的制备仅仅停留在实验室阶段，规模化量产很难。
[0006]目前还未有基因重组蛋白Tat
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hMsrA在眼用领域应用的文献报道。

技术实现思路

[0007]本专利技术针对现有技术中存在的技术问题，提供一种基于基因重组蛋白Tat
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hMsrA的眼用组合物及其制备方法，具有抗氧化、清除自由基的功效，能够较好地保持基因重组蛋白Tat
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hMsrA的活性，而且具有较佳的保湿效果，对于干眼症和白内障有较佳的预防和缓解症状的效果。
[0008]本专利技术解决上述技术问题的技术方案如下：一种基于基因重组蛋白Tat
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hMsrA的眼用组合物，包括有基因重组蛋白Tat
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hMsrA，所述组合物的各组分质量配比包括：海藻糖2～8份、基因重组蛋白Tat
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hMsrA5～10份，小牛血清5～10份，以及稀释液50～70份。
[0009]在上述技术方案的基础上，本专利技术还可以做如下改进。
[0010]进一步，所述基因重组蛋白Tat
‑
hMsrA的添加量为6～8份。
[0011]进一步，所述海藻糖的添加量为4～5份。
[0012]进一步，所述稀释液为添加了水溶性羧甲基壳聚糖的电解质溶液。
[0013]优选的，所述稀释液中，水溶性羧甲基壳聚糖的质量百分比为0.1～1％。
[0014]优选的，所述稀释液中的电解质溶液为氯化钠和氯化钾的混合溶液。
[0015]更优选的，所述电解质溶液中氯化钠的质量百分比为0.6～0.85％。
[0016]更优选的，所述电解质溶液中氯化钾的质量百分比为0.03～0.05％。
[0017]本专利技术还保护上述眼用组合物的制备方法，包括以下步骤：
[0018]步骤1)，将配方量的基因重组蛋白Tat
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hMsrA加入到配方量的小牛血清中，低温保存备用；
[0019]步骤2)，配置稀释液；
[0020]步骤3)，将取配方量的稀释液，加入配方量的海藻糖，混合均匀；
[0021]步骤4)，将步骤1)得到的基因重组蛋白Tat
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hMsrA和小牛血清的混合液，取配方量，加入到步骤3)制得的添加了海藻糖的稀释液中，混合均匀；
[0022]步骤5)，将步骤4)制得的眼用组合物通过滤膜除菌，而后灌装，制得基于基因重组蛋白Tat
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hMsrA的眼用组合物。
[0023]在上述技术方案的基础上，本专利技术还可以做如下改进。
[0024]进一步，所述步骤2)中，所述稀释液的配置采用以下步骤：首先，取配方量的水溶性羧甲基壳聚糖，加注射用水，浸泡溶胀，直至充分溶解；其次，取配方量的电解质，直接溶解于羧甲基壳聚糖溶液中；最后，加入注射用水，直至各成分至配比浓度，而后将溶液搅拌均匀，制得稀释液。
[0025]本专利技术的有益效果是：本专利技术产品含有基因重组蛋白Tat
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hMsrA，具有抗氧化、消除自由基、抗老化等多种功效，其特殊活性能够有效消除人体眼球细胞的自由基，修复因氧化而导致损伤的眼部细胞，能够对白内障起到预防作用；同时，本专利技术产品还包括一定含量的海藻糖和稀释液，可以有效保持基因重组蛋白Tat
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hMsrA的活性，在常温条件下，能够保障基因重组蛋白Tat
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hMsrA在较长时间内具有活性，便于本专利技术产品的运输和保存；本专利技术稀释液的比例较高，并且含有小牛血清，能够有效对眼部补液，可以缓解眼部干眼症症状，同时基因重组蛋白Tat
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hMsrA的修复作用，对于干眼症也能起到预防和缓解症状的较佳效果。
具体实施方式
[0026]以下对本专利技术的原理和特征进行描述，所举实例只用于解释本专利技术，并非用于限定本专利技术的范围。
[0027]本专利技术所设计的一种基于基因重组蛋白Tat
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hMsrA的眼用组合物，包括有基因重组蛋白Tat
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hMsrA，所述组合物的各组分质量配比包括：海藻糖2～8份、基因重组蛋白Tat
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hMsrA 5～10份，小牛血清5～10份，以及稀释液50～70份。
[0028]基因重组蛋白Tat
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hMsrA是本专利技术的核心成分，具有抗氧化、修复细胞等多种功效，其特殊活性能够有效消除人体皮肤的自由基，修复因氧化而导致损伤的细胞。本专利技术所使用的基因重组蛋白Tat
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hMsrA的批量化生产可以采用枯草芽孢杆菌增殖的方式生产。具体生产方法可以采用公开号为“CN110387380A”，专利技术名称为“一种基因重组蛋白Tat
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hMsrA的生产方法”中记载的方法生产。
[0029]而基因重组蛋白Tat
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hMsrA的纯化可以采用公开号为“CN110283798A”，名称为“一种基因重组蛋白Tat
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hMsrA的纯化方法”中记载的方法。...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种基于基因重组蛋白Tat
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hMsrA的眼用组合物，其特征在于，包括有基因重组蛋白Tat
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hMsrA，所述组合物的各组分质量配比包括：海藻糖2～8份、基因重组蛋白Tat
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hMsrA 5～10份，小牛血清5～10份，以及稀释液50～70份。2.根据权利要求1所述一种基于基因重组蛋白Tat
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hMsrA的眼用组合物，其特征在于：所述基因重组蛋白Tat
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hMsrA的添加量为6～8份。3.根据权利要求1所述一种基于基因重组蛋白Tat
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hMsrA的眼用组合物，其特征在于：所述海藻糖的添加量为4～5份。4.根据权利要求1所述一种基于基因重组蛋白Tat
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hMsrA的眼用组合物，其特征在于：所述稀释液为添加了水溶性羧甲基壳聚糖的电解质溶液。5.根据权利要求4所述一种基于基因重组蛋白Tat
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hMsrA的眼用组合物，其特征在于：所述稀释液中，水溶性羧甲基壳聚糖的质量百分比为0.1～1％。6.根据权利要求4所述一种基于基因重组蛋白Tat
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hMsrA的眼用组合物，其特征在于：所述稀释液中的电解质溶液为氯化钠和氯化钾的混合溶液。7.根据权利要求6所述一种基于基因重组蛋白Tat
‑
hMsrA的眼用组合物，其...

【专利技术属性】
技术研发人员：曾建华，闫云云，胡雪平，
申请(专利权)人：嘉兴玖肽生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：