一种适用于鼻粘膜递送流感疫苗的促进剂制造技术

本发明专利技术公开了一种适用于鼻粘膜递送流感疫苗的促进剂，由粘液分泌抑制剂和粘液溶解剂组成，粘液分泌抑制剂为ONO-5046、西维来司钠中的一种或几种，粘液溶解剂为溴环己胺醇和SP中的一种或几种；流感疫苗与促进剂的含量比为1:50。本发明专利技术提供的适用于鼻粘膜递送流感疫苗的促进剂，选择特定种类与含量的粘液分泌抑制剂和粘液溶解剂，使得鼻粘膜递送流感疫苗过程中疫苗更容易透过鼻粘液，且疫苗的活性不被破坏，大大提高了生物利用度。大大提高了生物利用度。

【技术实现步骤摘要】
一种适用于鼻粘膜递送流感疫苗的促进剂


[0001]本专利技术涉及流感疫苗给药
，具体涉及一种适用于鼻粘膜递送流感疫苗的促进剂，能够在流感疫苗活性不被破坏的条件下促进流感疫苗穿过鼻粘液的鼻粘膜递送。

技术介绍

[0002]许多目前批准的流感疫苗是注射剂，其主要诱导强烈的全身免疫应答。然而，大多数病原体优先通过胃肠道，呼吸道或泌尿生殖道或眼睛的延伸的粘膜表面感染它们的宿主，而使用针和注射器对传染病的常规全身递送疫苗不能诱导强烈的粘膜免疫应答。鼻疫苗不仅可以诱导全身性IgG抗体反应，还可以诱导粘膜IgA抗体反应。值得一提的是，鼻粘膜有M细胞相较于口腔粘膜，眼周粘膜等，更有利于抗原的捕获与呈递。
[0003]众所周知，鼻粘膜对药物的吸收量是有限的，如何提高鼻粘膜给药的生物利用度是在研究鼻粘膜疫苗时必须面对的问题。
[0004]目前已经有对提高鼻粘膜药物生物利用度的研究，但现有的改善方法主要针对提高药物透过粘膜进而被吸收。与普通的鼻粘膜药物不同的是，鼻粘膜流感疫苗抗原从上皮细胞的内侧到基底外侧吸收，然后将它们加工并由抗原呈递细胞(APC)如树突细胞(DC)呈递给免疫活性细胞，包括幼稚淋巴细胞。DC迁移至MALT的T细胞区域，然后将表位肽形式的摄取抗原呈递给幼稚T细胞。在B细胞区域，发生生发中心形成和抗体分泌(Sato S，Kiyono H.The mucosal immune system of the respiratory tract[J].Current Opinion in Virology，2012，2(3):0-0.)。简而言之，鼻流感疫苗刺激产生的免疫反应主要在粘膜上发生。因此，在设计流感疫苗促进剂的时候目标不在于使抗原穿透粘膜，而在于使抗原在粘膜表面滞留进而被抗原呈递细胞捕获。
[0005]目前常用的鼻粘膜流感疫苗制剂多为滴鼻剂。而滴鼻剂在给药时存在以下几种阻碍：
①
滴鼻给药的药液液滴较大，主要沉积在鼻咽部消除的较快；
②
气道上皮表面上覆盖着由95％水分、2％～3％粘液蛋白、0.1％～0.5％蛋白质、0.3％～0.5％脂质以及1％的无机盐的形成粘液毯，粘液中含有氧化酶、肽酶、聚合酶、蛋白酶等对流感病毒免疫活性造成影响；
③
粘液中含有黏蛋白，黏蛋白组成的网状结构不易于流感疫苗通过。
[0006]因此，寻找一种流感疫苗顺利穿过气道粘液进而滞留在鼻粘膜上的促进剂可以使鼻粘膜流感疫苗药效得到提高。
[0007]公开号CN108653719A的中国专利技术专利，涉及一种在口服时能抵抗胃酸及胃肠道酶对多肽蛋白类药物的降解，同时具有粘液穿透及结肠定位效果，能有效促进多肽蛋白在肠道的吸收。而本专利技术主要针对气道粘液纤毛清除(mucociliary clearance，MCC)对于流感疫苗鼻粘膜递送的影响，对鼻粘液的分泌和鼻粘液的流变学性质进行改变进而促进鼻粘膜流感疫苗的递送。
[0008]气道粘液能黏附吸入的尘粒和微生物等，进而通过纤毛转运系统清除，是呼吸系统的重要防御机制之一。气道粘液纤毛清除功能由粘液和纤毛两部分构成。生理条件下，气道表面分泌的粘液量较少，维持着正常粘液的黏弹性和MCC功能。气道炎症等病理状态下，
粘液流变学性质发生改变，即不但粘液分泌量增多，而且粘液的理化特性和成分也发生显著改变。粘液作为纤毛发挥作用的媒介，这些变化不但可以直接引起MCC功能障碍，而且可以影响纤毛运动频率、振幅及协调性，间接加重局部防御功能的损害，最终导致粘液滞留和炎症状态的持续和进展。黏蛋白是粘液的主要成分，是粘液理化特性的主要来源，对维持粘液的黏滞性、黏附性和弹性起重要作用，而且在以粘液分泌异常为主要特征的疾病中，粘液流变学性质的改变又各有不同。
[0009]因此本专利技术从抑制鼻粘液分泌和改变粘液流变学性质两个角度对比流感疫苗递送进行促进。
[0010]目前，抑制神经性粘液分泌是抑制鼻粘液分泌的主要方法之一，粘液分泌抑制剂根据抑制机制来分类，通常包括抗组胺药物、糖皮质激素、抗胆碱能药物、蛋白酶抑制剂等。其中蛋白酶抑制剂包括：弹力酶抑制剂(如：西维来司钠、ONO-5046)、胰蛋白酶抑制剂(如：乌司他丁)、丝氨酸蛋白抑制剂(如：亮抑蛋白酶肽)等。ONO-5046(N-2-4-2-2-二肟基-丙氧基苯基磺酰氨基苯甲酸)是一种特异性的中性粒细胞弹性酶抑制剂，根据文献(Neutrophil elastascinhibitor,ONO-5046suppresses ozone-induced airway rnucushypersecretion in guinea pigs)报道，ONO-5046可逆转臭氧诱导的豚鼠杯状细胞高分泌反应和中性粒细胞聚集进而抑制粘液分泌，但ONO-5046是否可以抑制人鼻粘液分泌，无法知悉。此外，流感病毒转录时需要借助蛋白酶的作用，因此考察蛋白酶抑制剂对流感疫苗活性的影响必不可少。
[0011]亦因此，选择何种蛋白酶抑制剂作为粘液分泌抑制剂需要慎重筛选，避免对流感疫苗活性、免疫原性等造成影响。
[0012]另一方面，粘液溶解剂能改变鼻粘液流变学性质，存在增加流感疫苗穿过鼻黏液的可能。常见的粘液溶解剂如：
①
N-乙酰半胱氨酸可利用自由的笳基破坏黏蛋白中的二硫键，使粘液黏度明显降低；
②
溴已新和溴环已胺醇可增加浆液分泌，增强纤毛运动，以改善粘液性质和促进外排作用而提高MCC功能；
③
鼻腔滴人高渗盐水，在渗透压作用下，使减少的纤毛周围液增加，也起到稀化粘液的作用，最终增加气道MCC功能。但前述的这三种粘液溶解剂或会破坏蛋白质二硫键，或会使流感疫苗失活，不适合应用于流感疫苗中。
④
肺表面活性物质(SP)可通过改变粘液的特性来影响气道功能(Rubin BK,Ramirez O,Heller J et al.Chest,1992；101(5):1080)，与安慰剂组患儿比较，经SP治疗过的NRDS患儿气道粘液的运输能力明显增强，降低粘滞度和增强弹力，水合度增强。但将SP应用于鼻粘膜的流感疫苗递送尚未有文献报道，存在不确定性。
[0013]综上所述，如何选择粘液分泌抑制剂和粘液溶解剂，使其与流感疫苗结合给药时，能够促进流感疫苗透过粘液层，以提高疫苗的生物利用度，是本领域技术人员尚未解决的技术难题。

技术实现思路

[0014]本专利技术要解决的技术问题在于，提供了一种适用于鼻粘膜递送流感疫苗的促进剂，通过选择合适的粘液分泌抑制剂、粘液溶解剂，来实现促进流感疫苗在鼻粘膜的递送中透过粘液层，提高疫苗的生物利用度，解决上述现有技术存在的不足之处。
[0015]为此，本专利技术采取了以下技术方案：
[0016]一种适用于鼻粘膜递送流感疫苗的促进剂，由粘液分泌抑制剂和粘液溶解剂组成，其中，粘液分泌抑制剂为ONO-5046、西维来司钠中的一种或几种，粘液溶解剂为溴环己胺醇和SP中的一种或几种；流感疫苗与促进剂的含量比为1:50。
...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种适用于鼻粘膜递送流感疫苗的促进剂，其特征在于，所述的促进剂由粘液分泌抑制剂和粘液溶解剂组成，其中，粘液分泌抑制剂为ONO-5046、西维来司钠中的一种或几种，粘液溶解剂为溴环己胺醇和SP中的一种或几种；流感疫苗与促进剂的含量比为1:50。2.根据权利要求1所述的适用于鼻粘膜递送流感疫苗的促进剂，其特征在于，所述的粘液分泌抑制剂为ONO-5046。3.根据权利要求1所述的适用于鼻粘膜递送流感疫苗的促进剂，其特征在于，所述的粘液溶解剂为SP。4.根据权利要求1...

【专利技术属性】
技术研发人员：周荔葆，张庶民，马凤森，吴琼，吴铮，廖辉，修雪亮，刘苗苗，王一平，杨文腰，
申请(专利权)人：辽宁成大生物股份有限公司，
类型：发明
国别省市：