一种甜菊糖苷生产过程样品即时检测的方法技术

本发明专利技术公开了一种甜菊糖苷生产过程样品即时检测的方法，属于检测分析技术领域。其步骤：（1）取已知含量的甜菊糖苷，配制成不同糖苷含量的溶液，于紫外分光光度计210nm处测定吸光度，绘制标准曲线并得出糖苷含量和吸光度关系的计算公式；（2）取甜菊糖苷生产过程中的样品，经SPE小柱除杂后，于紫外分光光度计在210nm波长处检测吸光度，通过步骤（1）中的公式计算出糖苷的含量。本发明专利技术检测方法糖苷含量在0.01

【技术实现步骤摘要】
一种甜菊糖苷生产过程样品即时检测的方法


[0001]本专利技术属于检测分析
，具体涉及一种甜菊糖苷生产过程样品即时检测的方法。

技术介绍

[0002]甜叶菊（Stevia rebaudiana）属菊科多年生草本植物，原产于南美巴拉圭和巴西，是目前已知甜度较高的糖料植物之一，已成为继蔗糖、甜菜糖之后的第三种天然糖源。甜菊糖苷为甜叶菊中的主要有效成分，为贝壳杉烯二萜苷类物质，分子中含有多个糖基片段，易溶于水，是一种零热量的高倍甜味剂（其热量为蔗糖的300
‑
500倍）。目前，中国是世界最大的甜叶菊种植国和甜菊糖苷生产供应国，2017年出口额达15亿人民币，国内甜菊总量占全球总量的80%以上。
[0003]目前，甜菊糖苷含量或方法的检测主要为HPLC法，如GB 8270
‑
2014。文献研究也多集中于甜菊糖苷高精度检测方法的开发，如Caroline等研究的HILIC
‑
MS/MS方法（J. Agric. Food Chem.2013614711312
‑
11320）对主要甜菊糖苷进行定量分析2011年，Valerio Pieri等采用1H NMR对主要甜菊糖苷成分进行定量等。该类方法主要针对甜菊糖苷成品，检测方法精度高，可满足甜菊糖市场的交易公平性及科学研究数据的准确性。
[0004]甜菊糖生产过程很多环节甜菊糖苷需要即时检测，如甜菊糖提取后富集，行业内均采用吸附树脂完成。树脂吸附过程需尽量减少杂质在吸附树脂上的吸附，通常吸附树脂透甜，即甜菊糖苷泄漏临界点，切换吸附系统，启用下一套吸附树脂，进行单独或串联吸附。而树脂解析过程，则是使用尽量少的解析溶剂将糖苷解析完全，解析溶剂进液完成后，树脂柱孔穴中会残留一定体积的溶剂，需要使用水将该部分解析溶剂顶出，顶出液也称作解析尾液，解析尾液接收终点通常通过测量解析用溶剂的密度来判断，但溶剂中含有不同量的糖苷对溶剂密度影响较大。但目前，吸附过程中糖苷泄漏临界点和解析终点的判断多依靠工人口尝判断，一方面因味觉差异每个工人判断标准不统一，影响工艺稳定性，且该方法无法实现自动化控制，限制甜菊糖行业的发展。
[0005]现有甜菊糖苷检测方法主要为高效液相色谱法，通过不同物质极性不同，在液相分离柱上保留时间不同，将甜菊糖苷产品和其它杂质成分分离后，进行定量分析。该类方法虽检测精度高，但检测运行时间至少需要30min，无法满足生产即时检测的需求。

技术实现思路

[0006]为解决以上技术问题，本专利技术提供一种甜菊糖苷生产过程样品即时检测的方法，其技术方案是：一种甜菊糖苷生产过程样品即时检测的方法，包括以下步骤：（1）取已知含量的甜菊糖苷，配制成不同糖苷含量的溶液，于紫外分光光度计210nm处测定吸光度，绘制标准曲线并得出糖苷含量和吸光度关系的计算公式；（2）取甜菊糖苷生产过程中的样品，经SPE小柱除杂后，于紫外分光光度计在210nm
波长处检测吸光度，通过步骤（1）中的公式计算出糖苷的含量。
[0007]所述甜菊糖苷生产过程中的样品为树脂处理过程中样品，包括吸附树脂下柱液和解析尾液。
[0008]所述甜菊糖苷生产过程中的样品糖苷含量为0.01～0.5mg/mL。
[0009]所述SPE小柱的填料为离子交换树脂，包括强碱交阴离子交换树脂、强碱交阴离子和阳离子交换树脂混床。
[0010]所述SPE小柱直径为1cm，装填高度为1～2cm。
[0011]所述吸光度测定过程中的溶剂体系为水、甲醇、乙醇或其任意组合。
[0012]该检测方法实现了甜菊糖苷生产过程样品的即时检测，将检测时间由30min以上缩短至3min以内，糖苷含量0.01
‑
0.5mg/mL范围内线性范围良好，日间精密度＜10%，可满足生产过程糖苷含量即时检测需求，指导生产过程吸附树脂环节控制，为吸附树脂自动化控制提供即使检测手段。
附图说明
[0013]图1为糖苷含量和吸光度关系的标准曲线。
具体实施方式
[0014]下面结合具体实施例对本专利技术做进一步详细的说明。
[0015]本专利技术甜菊糖苷生产过程样品即时检测的方法，具体步骤为：（1）取已知含量的甜菊糖苷，用水溶解配制成不同糖苷含量的溶液。本专利技术以糖苷含量91.62%的甜菊糖苷为例进行说明，准确称量该甜菊糖苷12.5g，用水溶解，转移至250mL容量瓶中，定容，配制成糖苷含量40
‑
50mg/mL标准溶液，用水稀释标准溶液至糖苷含量分别为0.01mg/mL、0.05mg/mL、0.10mg/mL、0.25mg/mL、0.50mg/mL，于紫外分光光度计210nm处检测紫外吸光度，绘制糖苷含量和吸光度关系的标准曲线并得出二者的关系公式。
[0016]表1、不同糖苷含量的溶液210nm处的吸光度数据分析：通过绘制上述糖苷含量和吸光度的标准曲线，糖苷含量在0.01～0.5mg/mL范围时，糖苷含量和吸光度的线性关系良好，其线性关系见图1，二者的关系公式为：y=3.5116x+0.0395
ꢀꢀꢀ
R2=0.9985其中，x:溶液的糖苷含量，mg/mL；y：210nm处的比吸光值，L/g
·
cm。
[0017]（2）取已知含量糖苷，分别以水和乙醇水溶液配置特定含量糖苷溶液，于210nm处检测吸光度，判断日间检测偏差。
[0018]表2、日间精密度测定表2中，第1日是指标准曲线绘制的次日。
[0019]数据分析：该方法日间偏差＜10%，方法可满足生产需求。
[0020]（3）取甜菊糖苷生产时树脂处理过程中样品，包括吸附树脂下柱液和解析尾液。对吸附树脂下柱液及解析尾液的成分进行分析，明确其中检测干扰成分类别。其中，吸附树脂下柱液中主要杂质成分为无机盐、多糖、酚酸类物质。解析尾液中杂质成分主要为酚酸类物质。而酚酸类物质210nm下有吸收，干扰甜菊糖苷含量检测。
[0021]（4）根据两类样品中的杂质成分，分别使用不同填料的SPE小柱除杂。吸附树脂下柱液使用强碱交阴离子交换树脂和阳离子交换树脂混床SPE小柱除杂；吸附树脂解析尾液使用强碱交阴离子交换树脂SPE小柱除杂。SPE小柱直径为1cm，填料高度为1～2cm。
[0022]除杂后的样品于紫外分光光度计210nm处测定吸光度，通过步骤（1）中的公式即可计算出糖苷的含量。
[0023]若样品中糖苷含量＞0.5mg/mL即210nm处的比吸光值＞1.780L/g
·
cm时，说明样品中糖苷含量较多，如样品为吸附树脂下柱液则生产车间应切换吸附系统启用下一套吸附树脂，继续进行树脂吸附；如样品为解析尾液则生产车间应继续用水将解析溶剂顶出。
[0024]采用上述方法，对生产车间吸附树脂下柱液和解析尾液中的糖苷含量进行检测，检测结果见表3。
[0025]表3、实施例1
‑
4糖苷含量检测结果由表3可知，本专利技术与HPL本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.甜菊糖苷生产过程样品即时检测的方法，其特征在于，其步骤包括：（1）取已知含量的甜菊糖苷，配制成不同糖苷含量的溶液，于紫外分光光度计210nm处测定吸光度，绘制标准曲线并得出糖苷含量和吸光度关系的计算公式；（2）取甜菊糖苷生产过程中的样品，经SPE小柱除杂后，于紫外分光光度计在210nm波长处检测吸光度，通过步骤（1）中的公式计算出糖苷的含量。2.根据权利要求1所述的甜菊糖苷生产过程样品即时检测的方法，其特征在于，所述甜菊糖苷生产过程中的样品为树脂处理过程中样品，包括吸附树脂下柱液和解析尾液。3.根据权利要求2所述的甜菊糖苷生产过程样品即时检测的方...

【专利技术属性】
技术研发人员：连运河，徐美利，王寒菊，韩晓冉，张春雨，杨清山，
申请(专利权)人：曲周县农业农村局，
类型：发明
国别省市：