一种索马鲁肽的制备方法技术

本发明专利技术涉及多肽合成技术领域，具体地，本发明专利技术涉及一种索马鲁肽的制备方法。本发明专利技术提供一种索马鲁肽的制备方法，该方法将索马鲁肽分成大小相近的两个片段，每一片段的氨基酸数目均在20个以内，对两个肽片段进行缩合反应，以制备索马鲁肽，这样既充分利用了固相多肽合成的优势，又保证了每一段多肽合成的产率。其中一条片段利用特殊的羧基端保护基，既保证了产物的纯度、产率，又节省操作步骤，降低了成本。降低了成本。

【技术实现步骤摘要】
一种索马鲁肽的制备方法


[0001]本专利技术涉及多肽合成
，具体地，本专利技术涉及一种索马鲁肽的制备方法。

技术介绍

[0002]由于生活水平的提高，饮食结构和生活方式的改变等诸多因素，全球糖尿病发病率逐年增高，糖尿病已成为继肿瘤和心血管疾病之后的第三大严重危害人类健康的疾病。尽管I型和Ⅱ型糖尿病的发病机理不同，但是，他们都以持续的高血糖作为基本的生化特征。Ⅱ型糖尿病人虽然自身能够产生胰岛素，但是由于胰岛素的抵抗使得自身对胰岛素的利用效率大打折扣，导致血糖升高。针对Ⅱ型糖尿病的降糖药物包括二甲双胍类药物、磺酰脲类药物以及胰高血糖样肽
‑
1(GLP
‑
1)的受体激动素类药物等，其中GLP
‑
1相关药物是近年来的研究热点。
[0003]索马鲁肽(Semaglutide)是由诺和诺德公司研发的一种新的长效GLP
‑
1类似物，被用于改善Ⅱ型糖尿病患者的血糖控制。通过每周皮下注射一次，可以实现患者血糖水平的大幅改善。除了在降血糖方面的有益功效，索马鲁肽在诱导减肥和减少患者重大心血管事件风险方面也有较好的临床效果。
[0004]索马鲁肽的氨基酸序列为：H
‑
His
‑
Aib
‑
Glu
‑
Gly
‑
Thr
‑
Phe
‑
Thr
‑
Ser
‑
Asp
‑
Val/>‑
Ser
‑
Ser
‑
Tyr
‑
Leu
‑
Glu
‑
Gly
‑
Gln
‑
Ala
‑
Ala
‑
Lys(AEEA
‑
AEEA
‑
γ
‑
Glu
‑
Otc)
‑
Glu
‑
Phe
‑
Ile
‑
Ala
‑
Trp
‑
Leu
‑
Val
‑
Arg
‑
Gly
‑
Arg
‑
Gly
‑
OH，分子式为C
187
H
291
N
45
O
59
，相对分子质量为4113.58，CAS号为910463
‑
68
‑
2。
[0005]目前索马鲁肽的合成主要存在三种常规策略。
[0006]策略一：通过基因重组技术，表达获得索马鲁肽主链第3
‑
31或5
‑
31片段，然后再分步连接上N端1
‑
2或1
‑
4片段和Lys20位侧链长效修饰基团。原研厂家诺和诺德早期即采用该策略获得目标索马鲁肽产品。在该策略下，由于存在多个活性位点，使得此工艺会产生较多的杂质，并且工艺操作过于复杂，不利于低成本的大规模化生产。
[0007]策略二：采用全固相多肽合成技术。固相多肽合成存在的巨大优势便是操作简便，可机械化流程化，更利于规模化生产。例如专利US8129343、US8536122、CN108059666、CN103848910、CN108203462、CN108359006、CN108676087、CN109021092、CN109311961、CN108059666、CN109180801、CN111217901、CN101133082、CN106478806、CN106928343、CN104356224所涉及的内容。由于固相合成的特有优势，原研厂家也在该领域进行了专利布局(CN101133082)。尽管固相合成优势巨大，然而仍存在一些固有问题，包括：树脂替代值的限制、物料及溶剂的浪费和大量废液的产生。所有的这些问题，在工业化生产中都归结为成本较为高昂。
[0008]为了有效降低成本以及发挥固相合成优势，固液相结合的方式成为可供选择的第三种策略。专利WO2016046753报道了多片段的固相合成及肽片段液相缩合来获取索马鲁肽主链的方法；专利CN106749613报道了三片段固液相结合策略来获取索马鲁肽的方法；专利CN109456401报道了液相合成六个主链片段，然后在固相上依次将6片段缩合上去获得索马
鲁肽的方法；专利CN109627317和CN106749613分别报道了三片段[(1
‑
12)+(13
‑
24)+(25
‑
31)]和[(1
‑
16)+(17
‑
22)+(23
‑
31)]固液相结合获取索马鲁肽的方法。然而，三片段或更多片段的合成方法，需要消耗过多的固相载体，过多的固相载体的使用使得成本高昂以及过多的肽片段也使得操作更为繁琐。
[0009]因此，亟需开发一种成本更低、产率高的索马鲁肽的制备方法。

技术实现思路

[0010]本专利技术旨在至少在一定程度上解决相关技术中的技术问题之一。为此，本专利技术的一个目的在于提供一种索马鲁肽的制备方法，该方法将索马鲁肽分成大小相近的两个片段，每一片段的氨基酸数目均在20个以内。这样既充分利用了固相多肽合成的优势，又保证了每一段多肽合成的产率。
[0011]为此，本专利技术一方面提供了一种索马鲁肽的制备方法。根据本专利技术的实施例，所述制备方法包括步骤：
[0012](1)固相合成获得全保护的第一肽段，所述第一肽段的氨基酸序列为R
‑
His(R1)
‑
Aib
‑
Glu(R2)
‑
Gly
‑
Thr(R3)
‑
Phe
‑
Thr(R3)
‑
Ser(R3)
‑
Asp(R2)
‑
Val
‑
Ser(R3)
‑
Ser(R3)
‑
Tyr(R3)
‑
Leu
‑
Glu(R2)
‑
Gly
‑
Gln(R1)
‑
Ala
‑
COOH；
[0013](2)固相合成获得全保护的第二肽段，所述第二肽段的氨基酸序列为NH2‑
Ala
‑
Lys[AEEA
‑
AEEA
‑
γ
‑
Glu(R2)
‑
Otc(R2)]‑
Glu(R2)
‑
Phe
‑
Ile
‑
Ala
‑
Trp(R4)本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种索马鲁肽的制备方法，其特征在于，包括步骤：(1)固相合成获得全保护的第一肽段，所述第一肽段的氨基酸序列为R
‑
His(R1)
‑
Aib
‑
Glu(R2)
‑
Gly
‑
Thr(R3)
‑
Phe
‑
Thr(R3)
‑
Ser(R3)
‑
Asp(R2)
‑
Val
‑
Ser(R3)
‑
Ser(R3)
‑
Tyr(R3)
‑
Leu
‑
Glu(R2)
‑
Gly
‑
Gln(R1)
‑
Ala
‑
COOH；(2)固相合成获得全保护的第二肽段，所述第二肽段的氨基酸序列为NH2‑
Ala
‑
Lys[AEEA
‑
AEEA
‑
γ
‑
Glu(R2)
‑
Otc(R2)]
‑
Glu(R2)
‑
Phe
‑
Ile
‑
Ala
‑
Trp(R4)
‑
Leu
‑
Val
‑
Arg(R5)
‑
Gly
‑
Arg(R5)
‑
Gly
‑
R6；(3)将所述全保护的第一肽段与所述全保护的第二肽段混合，发生缩合反应，以便获得全保护的索马鲁肽中间体；(4)利用切割试剂切割所述全保护的索马鲁肽中间体，获得切割液，以便获取索马鲁肽粗品；其中，R选自Boc、Fmoc、Alloc、Cbz...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈晨晨，吴壮生，周莉，
申请(专利权)人：合肥科生景肽生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：