一种聚合物、纳米自组装体、药物递送系统及其制备方法和应用技术方案

本发明专利技术提供一种聚合物、纳米自组装体、药物递送系统及其制备方法和应用，属于医药技术领域。本发明专利技术将透明质酸修饰壳聚糖共载miR34a和Dox纳米自组装体用于逆转乳腺癌阿霉素耐药，所制备的透明质酸修饰壳聚糖共载miR34a和Dox纳米自组装体一方面可保护miR34a避免其降解，提高其体内稳定性，另一方面该纳米组装体可特异性靶向于CD44高表达且miR34a低表达的肿瘤细胞，能够显著增强Dox的抗肿瘤效果，因此具有良好的实际应用之价值。提供能够用于治疗或缓解良性肿瘤或恶性肿瘤，因此具有良好的实际应用之价值。际应用之价值。际应用之价值。

【技术实现步骤摘要】
一种聚合物、纳米自组装体、药物递送系统及其制备方法和应用


[0001]本专利技术属于医药
，具体涉及一种聚合物、纳米自组装体、药物递送系统及其制备方法和应用。

技术介绍

[0002]公开该
技术介绍
部分的信息仅仅旨在增加对本专利技术的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。
[0003]乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一。近年来，尽管乳腺癌患者的总生存率有一定程度的提高，但是化疗耐药仍是影响乳腺癌患者复发及总生存率降低的主要因素。肿瘤的多药耐药已成为阻碍肿瘤化疗和预后的最严重问题。
[0004]盐酸阿霉素(Dox
·
HCl)属于蒽环类抗肿瘤药物，通过靶向拓扑异构酶II抑制肿瘤细胞的生长。Dox是临床治疗乳腺癌的一线化疗药物，但其单用抑制肿瘤效果并不完全，尤其在乳腺癌晚期，乳腺癌细胞发生耐药后，更易发生侵袭转移，给临床治疗增加了难度且预后较差。
[0005]microRNA是一类长度约为18～25个核苷酸左右的小分子非编码RNA，通过与靶基因结合而抑制其功能。microRNA的表达失衡与多种疾病存在相关性。miR34a是一种抑癌基因，已被证实可通过多个靶点如Bcl
‑
2,CD44，c
‑
met，myc等参与各种肿瘤的进展，最近研究显示miR34a的表达水平在耐药的乳腺癌中显著下调，恢复其表达可显著抑制耐药乳腺癌的侵袭转移能力。但是作为一种microRNA,miR34a本身极易降解不稳定，且由于其带负电不易进入细胞膜，故在体内应用时受到很大限制。

技术实现思路

[0006]针对现有技术的不足，本专利技术提供一种聚合物、纳米自组装体、药物递送系统及其制备方法和应用。本专利技术将透明质酸修饰壳聚糖共载miR34a和Dox纳米自组装体用于逆转乳腺癌阿霉素耐药，所制备的透明质酸修饰壳聚糖共载miR34a和Dox纳米自组装体一方面可保护miR34a避免其降解，提高其体内稳定性，另一方面该纳米组装体可特异性靶向于CD44高表达且miR34a低表达的肿瘤细胞，能够显著增强Dox的抗肿瘤效果，因此具有良好的实际应用之价值。
[0007]为实现上述技术目的，本专利技术采用的技术方案如下：
[0008]本专利技术的第一个方面，提供一种聚合物，所述聚合物具有如下所示结构：
[0009][0010]其中，m为不为0的自然数，进一步的，m的取值范围为80～150。
[0011]本专利技术的第二个方面，提供上述聚合物的制备方法，所述聚合物制备方法包括：
[0012]壳聚糖(CS)与共轭亚油酸(CLA)通过反应得到上述第一方面所述聚合物即CLA
‑
CS。
[0013]具体的，所述制备方法包括：
[0014]向壳聚糖中加酸溶解并溶胀，与活化后共轭亚油酸反应，透析纯化后即得。壳聚糖与共轭亚油酸反应制备CLA
‑
CS共聚物由于具有CLA疏水端和CS的亲水端，在微酸性水溶液中经超声分散或高速搅拌即能自发形成粒径约200
‑
300nm的纳米粒，制备方法简单，原料经济易得，产物具有良好的生物相容性和生物可降解性。
[0015]本专利技术的第三个方面，提供上述聚合物在制备纳米自组装体中的应用。
[0016]本专利技术的第四个方面，提供一种纳米自组装体，所述纳米自组装体具体为透明质酸(HA)修饰的共载Dox和miR34a的纳米自组装体(HA
‑
(Dox+miR34a)NPs)，其经由上述聚合物(CLA
‑
CS)包载Dox和miR34a并修饰透明质酸制备得到。
[0017]本专利技术的第五个方面，提供上述纳米自组装体的制备方法，所述制备方法包括：将去除HCl得到的Dox加入含有CLA
‑
CS的溶液中，超声搅拌得Dox@CLA
‑
CS溶液，透析、过滤后即得包载Dox的CLA
‑
CS纳米粒(Dox NPs)。将miR34a加入含有Dox NPs的体系中，高速斡旋后静置，然后向其中加入透明质酸继续高速斡旋后即得HA
‑
(Dox+miR34a)NPs。
[0018]需要说明的是，本专利技术提供的透明质酸修饰壳聚糖共载miR34a和Dox纳米自组装体用于逆转乳腺癌阿霉素耐药，在本专利技术的专利技术构思下，本领域技术人员有可能尝试其他抗肿瘤药物与抑癌基因用于制备纳米自组装体；如果存在，在实现本专利技术所公开的技术效果下，这些技术方案均应视为本专利技术构思下合理延展，因此应视为包含在本专利技术的技术方案中。
[0019]本专利技术的第六个方面，提供一种药物递送系统，其包含上述聚合物和/或上述纳米自组装体。
[0020]本专利技术的第七个方面，提供上述聚合物、上述纳米自组装体和/或上述药物递送系统在制备用于预防和/或治疗癌症和/或肿瘤的药物中的应用。
[0021]与现有技术相比，上述一个或多个技术方案存在如下有益技术效果：
[0022](1)上述技术方案中首次制备了透明质酸靶向共轭亚油酸修饰的共载Dox和miR34a壳聚糖纳米粒，该纳米制剂不仅解决了miR34a易降解，不稳定，体内递送困难的难点，增加了药物在肿瘤部位的蓄积，抑制了耐药肿瘤细胞的生长，抑制了耐药肿瘤细胞的侵袭转移和粘附，还可进一步增加体内抗肿瘤药效。
[0023](2)上述技术方案制得的纳米制剂形态均匀，粒径在200nm左右，适合静脉注射，可
以通过主动靶向作用蓄积于肿瘤部位。
[0024](3)上述技术方案的HA
‑
(Dox+miR34a)NPs具有主动靶向效应，能够蓄积于高表达CD44的阿霉素耐药的肿瘤部位。HA
‑
(Dox+miR34a)NPs到达肿瘤部位后，与具有负电荷的肿瘤细胞膜结合，在内吞作用下入胞，之后经溶酶体摄取释放出miR34a和Dox，二者在协同作用下发挥抗肿瘤作用，因此具有良好的实际应用之价值。
附图说明
[0025]构成本专利技术的一部分的说明书附图用来提供对本专利技术的进一步理解，本专利技术的示意性实施例及其说明用于解释本专利技术，并不构成对本专利技术的不当限定。
[0026]图1为本专利技术实施例1中制备的CLA
‑
CS相关图，其中a)为制备流程图，b)为核磁氢谱图，c)为红外谱图。
[0027]图2为实施例2制备的HA(Dox+miR34a)NPs的TEM图。
[0028]图3为实施例3制备的HA(Dox+miR34a)NPs对MCF
‑
7/A细胞生长抑制试验中肿瘤细胞的存活率实验结果。
[0029]图4为实施例4制备的HA(Dox+miR34a)NPs对MCF
‑
7/A细胞的侵袭转移粘附实验结果。
[0030]图5为实施例5对HA(Dox+miR34a)NPs对荷MCF
‑
7/A瘤细胞的裸鼠体内本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种聚合物，其特征在于，所述聚合物具有如下所示结构：其中，m为不为0的自然数。2.权利要求1所述的聚合物的制备方法，其特征在于，包括：壳聚糖与共轭亚油酸通过反应得到所述聚合物即CLA
‑
CS；优选的，所述制备方法包括：向壳聚糖中加酸溶解并溶胀，与活化后共轭亚油酸反应，透析纯化后即得。3.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，壳聚糖分子量为3～5万，所述酸为冰醋酸，所述壳聚糖溶液浓度为1～5mg/ml，优选为4mg/ml，溶胀时间为1
‑
48小时，优选为24小时；共轭亚油酸活化具体方法为：将共轭亚油酸溶于二甲基甲酰胺中，向其中加入1
‑
(3
‑
二甲氨基丙基)
‑3‑
乙基碳二亚胺盐酸盐和N
‑
羟基琥珀酰亚胺进行活化；其中，所述1
‑
(3
‑
二甲氨基丙基)
‑3‑
乙基碳二亚胺盐酸盐和N
‑
羟基琥珀酰亚胺的摩尔比为1:0.5～2，优选为1:1；所述共轭亚油酸中羧基(
‑
COOH)与N
‑
羟基琥珀酰亚胺的摩尔比为1:1～2，优选为1:1.5；所述共轭亚油酸中的羧基和壳聚糖中的氨基(
‑
NH2)的摩尔比为0.1～1:1，优选为0.5:1。4.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，向活化后的共轭亚油酸加入乙酸乙酯和生理盐水进行萃取，将萃取后的乙酸乙酯层蒸发得到产物再次溶于DMF中即得，然后加入溶胀后的壳聚糖和三乙胺，在室温下反应1
‑
48小时，优选为24小时，取出产物后透析24
‑
72小时，优选为48小时，透析截留分子量8000～12000D，每4～5小时换水，离心除沉淀，冷冻干燥后即得。5.权利要求1所述聚合物在制备纳米自组装体中的应用。6.一种纳米自组装体，其特征在于，所述纳米自组装体具体为透明质酸修饰的共载Dox和miR34a的纳米自组装体，其经由上述聚...

【专利技术属性】
技术研发人员：郭秀丽，杨晓霞，尚鹏飞，
申请(专利权)人：山东大学，
类型：发明
国别省市：