一株具有较强抑菌作用的新种芽孢杆菌X901株及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一株具有较强抑菌作用的新种芽孢杆菌X901株及其应用。菌种保藏号为GDMCC No：61472。芽孢杆菌X901株是国内首次分离鉴定具有抑菌活性的新种芽孢杆菌菌株，培养整个过程都可产生抑菌性物质。抑菌产物粗品和胞外多糖提取物对革兰氏阴性细菌（大肠杆菌、副猪嗜血杆菌和维氏气单胞菌）和革兰氏阳性细菌（金黄色葡萄球菌、猪链球菌和枯草杆菌）均产生较为明显的抑菌作用。菌株本身不具有耐药性或抗药性，口服无致病性，安全。在畜禽、水产等动物养殖生产中，可以作为益生素菌种或饲用微生物添加剂使用，减少抗生素的使用，提高动物的抗病力，具有非常高的应用价值。具有非常高的应用价值。具有非常高的应用价值。

【技术实现步骤摘要】
一株具有较强抑菌作用的新种芽孢杆菌X901株及其应用


[0001]本专利技术涉及微生物领域，特别涉及一株具有较强抑菌作用的新种芽孢杆菌X901株及其应用。

技术介绍

[0002]目前，因抗生素滥用导致的畜禽产品药物残留超标、耐药致病菌株大量增加等问题引起人们高度重视。我国是世界上最大的抗生素生产国和使用国，同时也是抗生素滥用和细菌耐药性的重灾区，特别是畜牧业领域最为严重，严重危害人们的食品健康。在国家减抗限抗的倡导下，养殖场尝试使用替抗产品，但是效果并不显著，所以，寻求饲用抗生素替代品迫在眉睫。
[0003]目前，现有饲料添加剂中，使用的芽孢杆菌有枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、蜡样芽孢杆菌等，其具有耐高温、耐酸碱、耐压等优点，随着芽孢杆菌在饲料添加剂中的应用越来越广泛，抑菌活性较高的芽孢杆菌的研究与开发意义重大，市场前景广阔。
[0004]芽孢杆菌(Bacillus)是一类好氧或兼性厌氧、革兰氏染色阳性、产芽孢的杆状细菌。芽孢杆菌由于产生芽孢，具有较强的抵抗外界环境压力的能力，能够抵抗所生存的环境中由于干燥、热和紫外线辐射等所造成的伤害，维持自身能力不受影响。芽孢杆菌种类繁多、数量庞大，是自然界中广泛存在的非致病性细菌，对人畜无害，自然环境友好。鉴于芽孢杆菌的生物学特性使芽孢杆菌具有良好的应用前景，特别是在使用活菌制剂及其产物应用中表现出强大的生命力。芽孢杆菌在农业方面有着广泛的应用，很多生物农药是用芽孢杆菌制成的；有些菌株可用于养殖业上，提高畜禽产品的品质，由于芽孢的耐热性，又可以耐受胃中pH较低的酸性环境，芽孢杆菌作为饲料添加剂等可提高饲料利用率，降低饲养成本，同时可预防和减少疾病发生。养猪生产中减少抗生素生长促进剂或减少某些抗生素的使用，以不影响生猪生产又保证产品质量，有些芽孢杆菌是重要的候选者，目前已有较多成功的例证。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于提供一株新种芽孢杆菌X901株及其应用。
[0006]本专利技术所采取的技术方案是：
[0007]本专利技术的第一个方面，提供：
[0008]一株新种芽孢杆菌X901，其保藏在位于广东省广州市先烈中路100号大院59号楼5楼的广东省微生物菌种保藏中心，菌种保藏号为GDMCC No：61472，保藏日期2021年1月28日。该菌株已经于2021年1 月29日鉴定存活，提议的分类学名称为Bacillus sp.
[0009]本专利技术的第二个方面，提供：
[0010]一种微生物制剂，其添加有本专利技术第一个方面所述的芽孢杆菌X901株或其发酵物。
[0011]在一些实例中，还添加有载体。
[0012]在一些实例中，所述芽孢杆菌X901株的活菌数≥2.3
×
109cfu/g。
[0013]在一些实例中，所述载体选自淀粉、羧甲基淀粉钠、农作物副产物、葡萄糖、麦芽糊精、脱脂奶粉、海藻糖、二氧化硅、碳酸钙。
[0014]在一些实例中，所述农作物副产物选自米糠、中草药粉、大豆粉、玉米粉、麸皮。
[0015]在一些实例中，所述淀粉为可溶性淀粉。
[0016]本专利技术的第三个方面，提供：
[0017]一种饲料，其添加有本专利技术第一个方面所述的芽孢杆菌X901株，或本专利技术第二个方面所述的微生物制剂。
[0018]在一些实例中，以制剂的活菌数为100亿/克计，所述微生物制剂的添加量为：
[0019]饲料加工：0.2％～0.6％；
[0020]拌料饲喂：0.04％～0.06％；
[0021]饮水饲喂：0.02％～0.03％。
[0022]饲料可以是各种养殖动物用的饲料，包括但不限于禽类、反刍动物、猪、水产品等养殖动物饲料。
[0023]本专利技术的第四个方面，提供：
[0024]本专利技术第一个方面所述芽孢杆菌X901株的应用，所述应用包括：制备抑菌剂中、制备饲料添加剂、环境净化剂、水体净化剂、免疫促进剂。
[0025]在一些实例中，所述抑菌剂用于抑制大肠杆菌、副猪嗜血杆菌、维氏气单胞菌、金黄色葡萄球菌、猪链球菌、枯草杆菌、沙门氏菌及弧菌等致病菌或有害菌。
[0026]在一些实例中，水体净化剂用于养殖水处理，以制剂的活菌数为100亿/克计，按100～ 200g/亩水体，先用适量水溶解后均匀泼洒。
[0027]本专利技术的有益效果是：
[0028]本专利技术的新种芽孢杆菌X901株(Bacillus sp.X901)，是国内首次分离鉴定具有抑菌活性的新种芽孢杆菌菌株，在培养后12h左右进入对数生长期，快速繁殖，菌体浓度增加；培养到30h左右进入稳定期；在培养过程中具有持续性耐酸生长的特性；培养整个过程都可产生抑菌性物质。抑菌产物粗品和胞外多糖提取物对6种指示菌，革兰氏阴性细菌(大肠杆菌、副猪嗜血杆菌和维氏气单胞菌)和革兰氏阳性细菌(金黄色葡萄球菌、猪链球菌和枯草杆菌) 均产生较为明显的抑菌作用。
[0029]与枯草芽孢杆菌相比，新种芽孢杆菌X901株(Bacillus sp.X901)对所选择的7种常用的代表性药物均在敏感水平以上，不具有耐药性或抗药性；口服新种芽孢杆菌X901株对小白鼠无致病性，安全。
[0030]本专利技术新种芽孢杆菌X901株(Bacillus sp.X901)的抑菌试验和安全性试验的结果表明其在畜禽、水产等动物养殖生产中，可以作为益生素菌种或饲用微生物添加剂使用，减少抗生素的使用，提高动物的抗病力，具有非常高的应用价值。
[0031]本专利技术新种芽孢杆菌X901株(Bacillus sp.X901)的发酵产物添加到饲料中，可以有效提高蛋鸡的生产性能。
附图说明
[0032]图1是新种芽孢杆菌X901株涂片的显微照片；
[0033]图2是新种芽孢杆菌X901株接种血清琼脂培养基37℃培养24h的照片；
[0034]图3是新种芽孢杆菌X901株基因组DNA16S rRNA区域PCR扩增结果；
[0035]图4是新种芽孢杆菌X901与其他芽孢杆菌16S rRNA序列同源性比较分析；
[0036]图5是新种芽孢杆菌X901 16S rRNA序列遗传发育树；
[0037]图6是新种芽孢杆菌X901株生长曲线；
[0038]图7是新种芽孢杆菌X901株的pH变化曲线；
[0039]图8是新种芽孢杆菌X901株抑菌产物的抑菌曲线；
[0040]图9是新种芽孢杆菌X901株的培养菌液和抑菌产物对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑菌图片。
具体实施方式
[0041]为使本专利技术的目的、技术方案和优点更加清楚明了，下面通过实施例，对本专利技术进行进一步详细说明。但是应该理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本专利技术，并不用于限制本专利技术的范围。此外，在以下说明中，省略了对公知技术的描述，以避免不必要地混淆本专利技术的概念。
[0042]新种芽孢杆菌X901株分离
[0043]专利技术人在金黄色葡萄球菌培养时，发本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一株新种芽孢杆菌X901，其保藏在广东省微生物菌种保藏中心，菌种保藏号为GDMCC No：61472。2.一种微生物制剂，其特征在于：其添加有权利要求1所述的芽孢杆菌X901株或其发酵物。3.根据权利要求2所述的微生物制剂，其特征在于：还添加有载体。4.根据权利要求2所述的微生物制剂，其特征在于：所述芽孢杆菌X901株的活菌数≥2.3
×
109cfu/g。5.根据权利要求3所述的微生物制剂，其特征在于：所述载体选自淀粉、羧甲基淀粉钠、农作物副产物、葡萄糖、麦芽糊精、脱脂奶粉、海藻糖、二氧化硅、碳酸钙。6.根据权利要求5所述的微生物制剂，其特征在于：所述农作物副产物选自米糠、中草药粉、大豆粉、玉米粉、...

【专利技术属性】
技术研发人员：周淑贞，辜质纯，李成应，谢志恒，顾万军，
申请(专利权)人：佛山市南海东方澳龙制药有限公司，
类型：发明
国别省市：