本发明专利技术公开两种化学发光免疫检测试剂盒、一种信号放大多肽在化学发光免疫测定抗原含量上的用途,以及一种化学发光免疫检测方法;其中,一种化学发光免疫检测试剂盒包括偶联至少两个吖啶酯的信号放大多肽;另一种化学发光免疫检测试剂盒包括吖啶酯和信号放大多肽;信号放大多肽包括至少一个多肽单元,多肽单元包括通过肽键相连接的第一氨基酸和第二氨基酸,第一氨基酸的侧链具有氨基,第二氨基酸的侧链不具有氨基。本发明专利技术化学发光免疫检测试剂盒和检测方法提高了检测的灵敏度。
【技术实现步骤摘要】
化学发光免疫检测试剂盒、用途和检测方法
本专利技术涉及体外检测
,特别涉及化学发光免疫检测试剂盒、用途和检测方法。
技术介绍
化学发光免疫分析方法可用于检测各种抗原、半抗原、抗体、激素、酶、脂肪酸、维生素和药物等,应用广泛。化学发光免疫分析方法包括直接化学发光免疫分析方法。在直接化学发光免疫分析方法中,吖啶酯的羧基与抗体的氨基连接,形成吖啶酯-抗体复合物,吖啶酯-抗体复合物中的抗体与待测样本中的抗原发生结合形成固相包被的抗原-抗体-吖啶酯复合物;氧化剂(例如H2O2)和NaOH溶液形成碱性环境催化吖啶酯分解产生光子,集光器和光电倍增管接收并记录单位时间内产生的光子;光子的量与待测样本中抗原的含量成正比,通过测定得到的标准曲线计算待测样本中抗原的含量。现有技术中,直接化学发光免疫分析方法的检测灵敏度比较低。上述内容仅用于辅助理解专利技术的技术方案,并不代表承认上述内容是现有技术。
技术实现思路
本专利技术的主要目的是提出化学发光免疫检测试剂盒、用途和检测方法,旨在提高检测的灵敏度。为实现上述目的,第一方面,本专利技术提出一种化学发光免疫检测试剂盒,包括偶联至少两个吖啶酯的信号放大多肽,所述信号放大多肽包括至少一个多肽单元,至少一个所述多肽单元包括通过肽键相连接的第一氨基酸和第二氨基酸,所述第一氨基酸的侧链具有氨基,所述第二氨基酸的侧链不具有氨基。第二方面,本专利技术提出一种化学发光免疫检测试剂盒,包括:吖啶酯;以及信号放大多肽,所述信号放大多肽包括至少一个多肽单元,至少一个所述多肽单元包括通过肽键相连接的第一氨基酸和第二氨基酸,所述第一氨基酸的侧链具有氨基,所述第二氨基酸的侧链不具有氨基,所述信号放大多肽用以连接所述吖啶酯。可选地,所述第一氨基酸为赖氨酸。可选地,所述第二氨基酸包括甘氨酸、丙氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、苯甲氨酸、甲硫氨酸、苏氨酸、谷氨酰胺、丝氨酸、天冬酰胺、酪氨酸、天冬氨酸、谷氨酸的至少一种。可选地,所述信号放大多肽的数量为多个,多个所述信号放大多肽的结构为一致。可选地,所述第一氨基酸的数量为一个,所述第二氨基酸的数量为一个。第三方面,本专利技术提出一种信号放大多肽在化学发光免疫测定抗原含量上的用途。第四方面,本专利技术提出一种化学发光免疫检测方法,包括以下步骤:(1)信号放大多肽与至少两个吖啶酯结合,形成多肽-吖啶酯复合物;(2)所述多肽-吖啶酯复合物与抗体结合,形成抗体-多肽-吖啶酯复合物;(3)所述抗体-多肽-吖啶酯复合物与抗原结合,碱性环境催化吖啶酯分解,检测吖啶酯分解产生的光强,通过光强数据计算抗原的浓度;其中,所述信号放大多肽包括多肽单元,所述多肽单元包括通过肽键连接的第一氨基酸和第二氨基酸,所述第一氨基酸的侧链具有氨基,所述第二氨基酸的侧链不具有氨基。可选地,所述多肽-吖啶酯复合物中的信号放大多肽用以结合所述抗体。可选地,所述第二氨基酸的羧基通过脱水缩合反应连接所述抗体的氨基。本专利技术提出的两种化学发光免疫检测试剂盒均包括信号放大多肽;所述信号放大多肽包括至少一个多肽单元,所述多肽单元包括通过肽键相连接的第一氨基酸和第二氨基酸,所述第一氨基酸的侧链具有氨基,所述第二氨基酸的侧链不具有氨基。如此,第一氨基酸的氨基可以通过脱水缩合反应结合吖啶酯的羧基,侧链不具有氨基的第二氨基酸,连接于相邻的两个第一氨基酸之间,降低了相邻的两个第一氨基酸之间的分子空间位阻,也即降低了第一氨基酸与吖啶酯结合时分子的拥挤程度,使得第一氨基酸的氨基更容易结合吖啶酯的羧基,提高了结合的效率和成功率;因此,信号放大多肽可以同时结合更多的吖啶酯,更多的吖啶酯分解后释放更多的光子,光强检测值变高,因为待测样本的浓度与光强检测值成正比,低浓度待测样本的浓度可以通过检测值的升高得以被计算出;这样,最终提高了检测的灵敏度。所述信号放大多肽用于化学发光免疫测定抗原含量,可以提高检测的灵敏度。本专利技术提出的检测方法采用上述信号放大多肽,也提高了检测的灵敏度。附图说明为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案,下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍,显而易见地,下面描述中的附图仅仅是本专利技术的一些实施例,对于本领域普通技术人员来讲,在不付出创造性劳动的前提下,还可以根据这些附图示出的结构获得其他的附图。图1为本专利技术一实施例中信号放大多肽结合吖啶酯的反应示意图;图2为本专利技术一实施例中多肽-吖啶酯复合物结合抗体的反应示意图。本专利技术目的的实现、功能特点及优点将结合实施例,参照附图做进一步说明。具体实施方式需要说明,若本专利技术实施例中有涉及“第一”、“第二”等的描述,则该“第一”、“第二”等的描述仅用于描述目的,而不能理解为指示或暗示其相对重要性或者隐含指明所指示的技术特征的数量。由此,限定有“第一”、“第二”的特征可以明示或者隐含地包括至少一个该特征。另外,全文中出现的“和/或”的含义为,包括三个并列的方案,以“A和/或B”为例,包括A方案,或B方案,或A和B同时满足的方案。本专利技术提出一种化学发光免疫检测试剂盒,包括偶联至少两个吖啶酯的信号放大多肽,所述信号放大多肽包括至少一个多肽单元,至少一个所述多肽单元包括通过肽键相连接的第一氨基酸和第二氨基酸,所述第一氨基酸的侧链具有氨基,所述第二氨基酸的侧链不具有氨基。在本专利技术实施例中,所述化学发光免疫检测试剂盒中的信号放大多肽已偶联所述吖啶酯,检测者可以直接使用偶联吖啶酯的信号放大多肽(多肽-吖啶酯复合物)结合相应的抗体,形成抗体-多肽-吖啶酯复合物,并进行下一步抗原含量的检测。当然,在本实施例中,多肽-吖啶酯复合物也可以结合抗原或者其他功能蛋白,对此不做限定。本专利技术还提出另一种化学发光免疫检测试剂盒,包括吖啶酯以及信号放大多肽,所述信号放大多肽包括至少一个多肽单元,至少一个所述多肽单元包括通过肽键相连接的第一氨基酸和第二氨基酸,所述第一氨基酸的侧链具有氨基,所述第二氨基酸的侧链不具有氨基,所述信号放大多肽用以连接所述吖啶酯。在本专利技术实施例中,所述吖啶酯和所述信号放大多肽分别以固体粉末的状态单独存放,相比以偶联混合物的液体状态存放,性质更加稳定,储存时间更久。本专利技术提出的两种化学发光免疫检测试剂盒均包括信号放大多肽;所述信号放大多肽包括至少一个多肽单元,所述多肽单元包括通过肽键相连接的第一氨基酸和第二氨基酸,所述第一氨基酸的侧链具有氨基,所述第二氨基酸的侧链不具有氨基。如此,第一氨基酸的氨基可以通过脱水缩合反应结合吖啶酯的羧基,侧链不具有氨基的第二氨基酸,连接于相邻的两个第一氨基酸之间,降低了相邻的两个第一氨基酸之间的分子空间位阻,也即降低了第一氨基酸与吖啶酯结合时分子的拥挤程度,使得第一氨基酸的氨基更容易结合吖啶酯的羧基,提高了结合的效率和成功率;因此,信号放大多肽可以同时结合更多的吖啶酯,更多的吖啶酯分解后释放更多的光子,光强检测值变高,因为待测本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种化学发光免疫检测试剂盒,其特征在于,包括偶联至少两个吖啶酯的信号放大多肽,所述信号放大多肽包括至少一个多肽单元,至少一个所述多肽单元包括通过肽键相连接的第一氨基酸和第二氨基酸,所述第一氨基酸的侧链具有氨基,所述第二氨基酸的侧链不具有氨基。/n
【技术特征摘要】
1.一种化学发光免疫检测试剂盒,其特征在于,包括偶联至少两个吖啶酯的信号放大多肽,所述信号放大多肽包括至少一个多肽单元,至少一个所述多肽单元包括通过肽键相连接的第一氨基酸和第二氨基酸,所述第一氨基酸的侧链具有氨基,所述第二氨基酸的侧链不具有氨基。
2.一种化学发光免疫检测试剂盒,其特征在于,包括:
吖啶酯;以及
信号放大多肽,所述信号放大多肽包括至少一个多肽单元,至少一个所述多肽单元包括通过肽键相连接的第一氨基酸和第二氨基酸,所述第一氨基酸的侧链具有氨基,所述第二氨基酸的侧链不具有氨基,所述信号放大多肽用以连接所述吖啶酯。
3.如权利要求1和2所述的化学发光免疫检测试剂盒,其特征在于,所述第一氨基酸为赖氨酸。
4.如权利要求3所述的化学发光免疫检测试剂盒,其特征在于,所述第二氨基酸包括甘氨酸、丙氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、苯甲氨酸、甲硫氨酸、苏氨酸、谷氨酰胺、丝氨酸、天冬酰胺、酪氨酸、天冬氨酸、谷氨酸的至少一种。
5.如权利要求1和2所述的化学发光免疫检测试剂盒,其特征在于,所述信号放大多肽的数量为多个,多个所述信号放...
【专利技术属性】
技术研发人员:陈干超,陈明峰,刘彦,郑筱雯,
申请(专利权)人:深圳市国赛生物技术有限公司,
类型:发明
国别省市:广东;44
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