用于降低玉米青贮饲料黄曲霉毒素含量的微生物制剂制造技术

本申请提供了用于降低玉米青贮饲料黄曲霉毒素含量的微生物制剂，其包含选自植物乳杆菌、两歧双歧杆菌、鼠李糖乳杆菌和灰葡萄孢菌的微生物，本申请的微生物制剂不仅降低青贮产物中的黄曲霉毒素含量，而且能抑制有氧暴露过程中黄曲霉毒素含量的升高速度。

【技术实现步骤摘要】
用于降低玉米青贮饲料黄曲霉毒素含量的微生物制剂专利
本申请属于微生物领域，具体地，本申请提供了用于降低玉米青贮饲料黄曲霉毒素含量的微生物制剂，其包含选自植物乳杆菌、两歧双歧杆菌、鼠李糖乳杆菌和灰葡萄孢菌的微生物。
技术介绍
青贮是指在密封条件下，通过青贮原料上附着的乳酸菌等厌氧发酵将碳水化合物转化成以乳酸为主的有机酸，使pH下降，抑制有害菌的生长，从而使饲料得以长期保存并优化其营养价值的过程。自古以来青贮就是寒冷地区畜牧业饲料的主要来源之一，可以青贮的饲料主要有玉米、苜蓿、大麦、燕麦、高粱、紫云英、甜菜、马铃薯等，玉米为我国北方主要饲料青贮品种。玉米青贮饲料的质量一方面由感官质量、pH、有机酸含量等指标判定，另一方面，以黄曲霉毒素为代表的霉菌毒素也是不容忽视的指标。虽然反刍动物自身受黄曲霉毒素的影响较小，但一方面，反刍动物中的瘤胃微生物对其很敏感，大量长期饲喂含霉菌毒素的饲料会造成动物消化吸收能力的降低，另一方面，饲喂黄曲霉毒素高的饲料容易造成肉、奶产品中的黄曲霉毒素超标，在食品监管日益严格的情况下非常不利。因此，寻找绿色、便利、低成本的黄曲霉毒素控制方法很有必要。
技术实现思路
申请人尝试以微生物添加剂方式解决上述问题，经过大量微生物培养和筛选研究后，发现鼠李糖乳杆菌的加入可以明显降低青贮产物黄曲霉毒素含量并抑制青贮产物开封后的黄曲霉毒素含量升高速度；此外，申请人还意外的发现，导致植物灰霉病或者制造贵腐葡萄酒的灰葡萄孢菌同样可以降低青贮产物黄曲霉毒素含量，而且抑制青贮产物开封后的黄曲霉毒素含量升高速度的效果更为明显。一方面，本申请提供了一种用于降低玉米青贮饲料黄曲霉毒素含量的微生物制剂，其包含选自植物乳杆菌、两歧双歧杆菌、鼠李糖乳杆菌和灰葡萄孢菌的微生物。进一步地，其中含有的微生物为植物乳杆菌、两歧双歧杆菌、鼠李糖乳杆菌。进一步地，其中含有的微生物为植物乳杆菌、两歧双歧杆菌、灰葡萄孢菌。进一步地，微生物制剂为菌粉。进一步地，其中植物乳杆菌、两歧双歧杆菌、鼠李糖乳杆菌含量为5×109cfu/g、1×109cfu/g、4×108cfu/g。进一步地，其中植物乳杆菌、两歧双歧杆菌、灰葡萄孢菌含量为5×109cfu/g、1×109cfu/g、6×107cfu/g。另一方面，本申请提供了植物乳杆菌和两歧双歧杆菌，以及选自鼠李糖乳杆菌或灰葡萄孢菌的第三种菌在降低青贮饲料黄曲霉毒素含量中的应用。进一步地，其中降低青贮饲料黄曲霉毒素含量为降低青贮饲料开封后的黄曲霉毒素水平。进一步地，其中青贮饲料为青贮玉米。进一步地，应用中使用菌粉制剂，菌粉制剂中植物乳杆菌、两歧双歧杆菌、鼠李糖乳杆菌含量为5×109cfu/g、1×109cfu/g、4×108cfu/g，或者植物乳杆菌、两歧双歧杆菌、灰葡萄孢菌含量为5×109cfu/g、1×109cfu/g、6×107cfu/g。本申请中的菌种不限来源，自我分离、馈赠、购买的经过鉴定符合要求的菌种均可用于本专利技术。本申请中的玉米品种不限于实施例中的使用的品种，各种现有和未来开发的青贮专用、粮饲兼用玉米均可使用。本申请的添加剂产品中不排斥使用其他添加剂成分，包括但不限于酶添加剂和化学添加剂。实施例材料、仪器、试剂和方法菌种：菌种植物乳杆菌、两歧双歧杆菌、鼠李糖乳杆菌和灰葡萄孢菌均为申请人企业自行保存并培养；其中灰葡萄孢菌、两歧双歧杆菌原始菌株由宁夏大学葡萄酒研究院馈赠，植物乳杆菌、鼠李糖乳杆菌菌株由申请人自行分离和鉴定。仪器：pH计：CT-6020A便携式pH计（柯迪达电子制造）。离子色谱仪：ICS-2500离子色谱仪（DIONEX制造）。纤维分析仪：A2000i纤维分析仪（ANKOM制造）。定氮仪：KDN-08A凯式定氮仪（杭州汇尔制造）黄曲霉毒素免疫亲和柱RBRP07（上海必优生物科技有限公司）真菌毒素测定仪HED-IG-ZD（山东霍尔德电子科技有限公司，检测B1黄曲霉毒素）其他试剂和仪器均为常规国产型号。青贮玉米品种和基本处理过程：选择内蒙-东北地区常用的丹玉217，实验过程所用的玉米来自固定种植基地的同批次玉米，品质基本一致（平均株高约250cm，平均果穗长约20cm，种植密度3500株/亩）。玉米收获期为抽丝期第38-41日，留茬高度为30cm，切割长度约2cm。实验用青贮方法和取样方法：将切割后的玉米加入添加剂并混合均匀后按照约500g/L压紧至于1L玻璃瓶中，玻璃胶密封瓶盖接缝，20-25摄氏度的室温下避光保存；在所需测定时间（一般测试中为90日）取3个平行青贮罐，取出上层2-10cm处的青贮料混合供测试。感官评定:根据德国农业协会（DLG）评分法对嗅觉、结构、色泽评分，按照得分分为优良、良好、中等、下等四个级别。pH测定：称取取青贮料10g，加入100mL去离子水中，搅拌3min后两层纱布过滤，过滤后立即使用上述pH计测量浸出液的pH。有氧稳定性：青贮90日后，取100g青贮料置于500ml烧瓶中，置于封闭的保温箱中，向瓶中插入温度计测定温度变化，同时监测室温，从取样时样品接触空气到样品温度高于室温2℃的时间（h）即为计为有氧稳定持续的时间。黄曲霉毒素测定：基本按照仪器的说明进行：取粉碎的样品10g，与2g氯化钠一起加入50mL甲醇：水为80:20的甲醇水溶液中；搅拌、过滤；过黄曲霉毒素免疫亲和柱，甲醇淋洗收集淋洗液；加入显色液，使用真菌毒素测定仪检测。植物乳杆菌、两歧双歧杆菌的适合用量在之前实验和专利申请中已经确定为5×109cfu/g、1×109cfu/g；以下实施例的实验使用相同原料在同一季节内分多个批次进行，仅展示了部分有典型参考意义的结果，另有多种被筛选的配方由于缺乏代表性未展示。实施例1植物乳杆菌、两歧双歧杆菌和鼠李糖乳杆菌组合对青贮玉米饲料品质的影响菌剂配方：菌剂1：植物乳杆菌5×109cfu/g、两歧双歧杆菌1×109cfu/g；菌剂2：植物乳杆菌5×109cfu/g、两歧双歧杆菌1×109cfu/g、鼠李糖乳杆菌1×109cfu/g；菌剂3：植物乳杆菌5×109cfu/g、两歧双歧杆菌1×109cfu/g、鼠李糖乳杆菌4×108cfu/g。感官评定和PH：菌剂1-3均可以帮助青贮玉米饲料达到优良级的水平，pH在3.8以上，质量优于不加菌剂的青贮方法。有氧稳定性：表1.菌剂1-3对有氧稳定性的影响相比植物乳杆菌、两歧双歧杆菌的组合，加入适量的鼠李糖乳杆菌对改善有氧稳定性有一定帮助，加入量过大时对有氧稳定性的帮助反而降低。黄曲霉毒素含量及其变化：表2.各种菌剂对黄曲霉毒素（AFB1）含量及其变化的影响（μg/kg）鼠李糖乳杆菌的加入有助于青贮饲料产品中黄曲霉毒素含量的降低本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于降低玉米青贮饲料黄曲霉毒素含量的微生物制剂，其特征在于，其包含选自植物乳杆菌、两歧双歧杆菌、鼠李糖乳杆菌和灰葡萄孢菌的微生物。/n

【技术特征摘要】
1.一种用于降低玉米青贮饲料黄曲霉毒素含量的微生物制剂，其特征在于，其包含选自植物乳杆菌、两歧双歧杆菌、鼠李糖乳杆菌和灰葡萄孢菌的微生物。


2.根据权利要求1所述的微生物制剂，其中含有的微生物为植物乳杆菌、两歧双歧杆菌、鼠李糖乳杆菌。


3.根据权利要求1所述的微生物制剂，其中含有的微生物为植物乳杆菌、两歧双歧杆菌、灰葡萄孢菌。


4.根据权利要求2或3的微生物制剂，其为菌粉。


5.根据权利要求4的微生物制剂，其中植物乳杆菌、两歧双歧杆菌、鼠李糖乳杆菌含量为5×109cfu/g、1×109cfu/g、4×108cfu/g。


6.根据权利要求4的微生物制剂，其中植物乳杆菌、两歧双歧杆菌、灰葡萄孢菌...

【专利技术属性】
技术研发人员：李旭业，尤海洋，王敏，李莉，郭文凯，杨淑萍，王佳，董扬，王洪宝，白长胜，刘秀玲，刘丽秋，郭春晖，王佳辉，
申请(专利权)人：李旭业，
类型：发明
国别省市：黑龙江;23