一种舒缓动脉硬化的纳豆发酵组合物及其制备方法和应用技术

本发明专利技术提出了一种舒缓动脉硬化的纳豆发酵组合物及其制备方法和应用，属于生物工程技术领域。该舒缓动脉硬化的纳豆发酵组合物，由以下原料按重量制备而成：纳豆发酵提取物70‑120份、人参皂苷Re 1‑2份、三七皂苷S 7‑12份、青钱柳黄酮10‑20份本发明专利技术制备方法简单、原料来源广，制得的组合物具有很好的降血脂、溶血栓作用，特别对动脉粥样硬化具有很好的抑制和治疗作用，且安全无副作用，可以作用食疗产品、保健食品以及药品的原料使用，具有广阔的应用前景。

【技术实现步骤摘要】
一种舒缓动脉硬化的纳豆发酵组合物及其制备方法和应用
本专利技术涉及生物工程
，具体涉及一种舒缓动脉硬化的纳豆发酵组合物及其制备方法和应用。
技术介绍
动脉硬化是动脉的一种炎症性病变，可使动脉管壁增厚、变硬，失去弹性、管腔狭小。动脉硬化是随着人年龄增长而出现的血管疾病，其通常是在青少年时期发生，到中老年时期加重、发病。随着人们生活水平的提高，心血管动脉硬化的发病率逐渐增多，现已成为老年人死亡的主要原因之一。动脉粥样硬化(Atherosclerosis，AS)是动脉硬化中最常见而重要的类型，其特点是受累动脉的内膜有类脂质的沉着，复合糖类的积聚，继而纤维组织增生和钙沉着，并有动脉中层的病变。本病主要累及大型及中型的肌弹力型动脉，以主动脉、冠状动脉及脑动脉为多见，常导致管腔闭塞或管壁破裂出血等严重后果，为心肌梗塞和脑梗塞的主要病因。它影响大、中动脉，可引起相当严重的后果。冠状动脉粥样硬化时，可造成心肌供血不足，引起心绞痛乃至心肌梗死；脑动脉硬化可引起脑供血不足、眩晕、头痛。后期脑萎缩时，可有精神变态、痴呆等，脑动脉内血栓形成或因动脉粥样硬化引起的小动脉瘤破裂出血引起的脑卒中(中风)，可造成意识丧失、偏瘫、失语等严重后果；肾动脉硬化可引起顽固性高血压；肠动脉硬化可引起消化不良、便秘、腹泻；下肢动脉粥样硬化可引起间歇跛行，严重时发生肢端缺血坏死。近年来，随着人们生活水平的提高，加上人口结构老龄化，该病的发病率和病死率呈快速上升趋势，发病年龄呈年轻化趋势。据报道，我国每年患此病约死亡110万人。因此开发治疗该病的药物渐成研究的热点。近几来，很多中医研究者开始专注研究采用中药组合物达到治疗动脉硬化的目的。虽然临床上已经有诸多药方用于缓解或治疗动脉硬化疾病，但是目前为止并无广泛推广应用。纳豆由黄豆通过纳豆芽孢杆菌发酵制成豆制品，具有黏性，气味较臭，味道微甜，不仅保有黄豆的营养价值、富含维生素K2、提高蛋白质的消化吸收率，更重要的是发酵过程产生了多种生理活性物质，具有溶解体内纤维蛋白及其他调节生理机能的保健作用。纳豆芽孢杆菌(Bacillusnatto)是具有耐酸、耐热特性的有益菌,在胃酸下四小时存活率为100％,同时具有强力的病原菌抑制能力,是各种益菌当中,对环境耐受力最好可以直达小肠的菌种之一,口服后可改变人体肠道菌丛生态,帮助消化道机能正常化,以使排便顺畅,维持体内生理环保。可以产酸，调节肠道菌群，增强动物细胞免疫放应，并能生成多种蛋白酶(特别是碱性蛋白酶)、糖化酶、脂肪酶、淀粉酶等。纳豆芽孢杆菌在通过吞噬大豆蛋白来繁殖的时候,产生出的酵素纳豆激酶(Nattokinase，NK),具有神奇的药效,有治疗高血脂、溶解血栓等作用，而且还能产生出氨基酸的美味。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提出一种舒缓动脉硬化的纳豆发酵组合物及其制备方法和应用，制备方法简单、原料来源广，制得的组合物具有很好的降血脂、溶血栓作用，特别对动脉粥样硬化具有很好的抑制和治疗作用，且安全无副作用，可以作用食疗产品、保健食品以及药品的原料使用，具有广阔的应用前景。本专利技术的技术方案是这样实现的：本专利技术提供一种纳豆发酵提取物的制备方法，将红曲霉、纳豆芽孢杆菌和羊肚菌分别活化后，加入含有三七粉的半固态培养基中培养，混合得到复合发酵菌液，将脱毒熟化后的大豆粉碎，加入复合发酵菌液中，发酵培养，过滤干燥，得到纳豆发酵提取物。作为本专利技术的进一步改进，具体包括以下步骤：S1.菌种种子液的制备：将红曲霉、纳豆芽孢杆菌和羊肚菌分别接种到高氏培养基中划线，第一次有氧培养，分别培养成菌种种子液；S2.三七粉的制备：将三七洗净、干燥后粉碎至100目，得到三七粉，紫外线灭菌备用；S3.半固态培养基的制备：将碳源、氮源、维生素和无机盐用无菌水溶解，混合均匀后，加入三七粉，用PBS溶液调节培养基pH值为6.8-7.5，紫外线灭菌备用；S4.菌种的活化：将步骤S1得到的菌种种子液分别接种于步骤S3制得的半固态培养基中，第二次有氧培养，得到活化菌种；S5.复合发酵菌液的制备：将步骤S4中三个培养基等体积混合，过滤除掉三七粉固体，并稀释得到复合发酵菌液；S6.大豆的脱毒熟化：将经过抛光处理后的大豆洗净，无菌水浸泡20-24h后，置于上层筛网上，将乙酸、乙醇和三乙胺的混合溶液置于容器中，加盖并安装冷凝管，加热至沸腾，蒸汽处理2-4h后，冷却至常温后，粉碎，得到脱毒熟化的大豆粉；S7.纳豆发酵提取物的制备：将经过步骤S6脱毒熟化处理后的大豆粉加入步骤S5得到的复合发酵菌液中，37℃恒温发酵24-48h，过滤，固体用无菌水洗涤，合并洗涤液和滤液，冷冻干燥，得到纳豆发酵提取物。作为本专利技术的进一步改进，所述红曲霉、纳豆芽孢杆菌和羊肚菌的质量比为(1-5)：(7-12)：(2-4)；所述第一次有氧培养条件为36-38℃，氧含量为22-30％，湿度为70-80％，培养时间为12-24h；所述菌种种子液的含菌量为108-109cfu/mL。作为本专利技术的进一步改进，所述碳源选自葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖、果糖、淀粉中的一种或几种混合；所述氮源选自氨水、尿素、铵盐、硝酸盐、氨基酸；所述维生素选自维生素C、维生素B1、维生素B2、维生素A、维生素K、维生素B12、维生素D、维生素E中的一种或几种混合；所述无机盐选自氯化钠、氯化钾、氯化钙、硫酸镁、氯化铁、硫酸锌、硫酸铜、硫酸锰、氯化锌、氯化铜、氯化锰中的一种或几种混合；所述氨基酸选自甘氨酸、丝氨酸、苏氨酸、缬氨酸、色氨酸、亮氨酸、丙氨酸、半胱氨酸、甲氨酸、赖氨酸、异亮氨酸、苯氨酸中的一种或几种混合；所述碳源、氮源、维生素、无机盐、三七粉和无菌水的质量比为(4-12)：(5-10)：(0.15-0.3)：(0.4-1.2)：(7-12)：100。作为本专利技术的进一步改进，所述红曲霉、纳豆芽孢杆菌和羊肚菌的接种量分别为2-5％、3-6％、1-3％；所述第二次有氧培养条件为36-38℃，氧含量为22-30％，湿度为75-85％，培养时间为24-36h；所述稀释倍数为100-300倍。作为本专利技术的进一步改进，所述乙酸、乙醇和三乙胺的混合溶液中乙酸含量为10-20wt％，乙醇含量为25-40wt％，三乙胺含量为5-10wt％，余量为水；所述大豆粉和复合发酵菌液的固液比为1：(2-5)。本专利技术进一步保护一种上述的制备方法制得的纳豆发酵提取物。本专利技术进一步保护一种舒缓动脉硬化的纳豆发酵组合物，由以下原料按重量制备而成：上述纳豆发酵提取物70-120份、人参皂苷Re1-2份、三七皂苷S7-12份、青钱柳黄酮10-20份。本专利技术进一步保护一种上述的舒缓动脉硬化的纳豆发酵组合物的制备方法，包括以下步骤：将纳豆发酵提取物、人参皂苷Re、三七皂苷S和青钱柳黄酮，混合均匀后，得到舒缓动脉硬化的纳豆发酵组合物。本专利技术进一步保护一种上述的舒缓动脉硬化的纳豆发酵组合物在制备治疗动脉硬化的食品、保健食品及药品中的应用。本专利技术具有如下有益效果：本发本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种纳豆发酵提取物的制备方法，其特征在于，将红曲霉、纳豆芽孢杆菌和羊肚菌分别活化后，加入含有三七粉的半固态培养基中培养，混合得到复合发酵菌液，将脱毒熟化后的大豆粉碎，加入复合发酵菌液中，发酵培养，过滤干燥，得到纳豆发酵提取物。/n

【技术特征摘要】
1.一种纳豆发酵提取物的制备方法，其特征在于，将红曲霉、纳豆芽孢杆菌和羊肚菌分别活化后，加入含有三七粉的半固态培养基中培养，混合得到复合发酵菌液，将脱毒熟化后的大豆粉碎，加入复合发酵菌液中，发酵培养，过滤干燥，得到纳豆发酵提取物。


2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，具体包括以下步骤：
S1.菌种种子液的制备：将红曲霉、纳豆芽孢杆菌和羊肚菌分别接种到高氏培养基中划线，第一次有氧培养，分别培养成菌种种子液；
S2.三七粉的制备：将三七洗净、干燥后粉碎至100目，得到三七粉，紫外线灭菌备用；
S3.半固态培养基的制备：将碳源、氮源、维生素和无机盐用无菌水溶解，混合均匀后，加入三七粉，用PBS溶液调节培养基pH值为6.8-7.5，紫外线灭菌备用；
S4.菌种的活化：将步骤S1得到的菌种种子液分别接种于步骤S3制得的半固态培养基中，第二次有氧培养，得到活化菌种；
S5.复合发酵菌液的制备：将步骤S4中三个培养基等体积混合，过滤除掉三七粉固体，并稀释得到复合发酵菌液；
S6.大豆的脱毒熟化：将经过抛光处理后的大豆洗净，无菌水浸泡20-24h后，置于上层筛网上，将乙酸、乙醇和三乙胺的混合溶液置于容器中，加盖并安装冷凝管，加热至沸腾，蒸汽处理2-4h后，冷却至常温后，粉碎，得到脱毒熟化的大豆粉；
S7.纳豆发酵提取物的制备：将经过步骤S6脱毒熟化处理后的大豆粉加入步骤S5得到的复合发酵菌液中，37℃恒温发酵24-48h，过滤，固体用无菌水洗涤，合并洗涤液和滤液，冷冻干燥，得到纳豆发酵提取物。


3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述红曲霉、纳豆芽孢杆菌和羊肚菌的质量比为(1-5)：(7-12)：(2-4)；所述第一次有氧培养条件为36-38℃，氧含量为22-30％，湿度为70-80％，培养时间为12-24h；所述菌种种子液的含菌量为108-109cfu/mL。


4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述碳源选自葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖、...

【专利技术属性】
技术研发人员：李宝恒，李倩，舒威，
申请(专利权)人：天津市宝恒生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：天津;12