用于调节MIR-10B活性的微小RNA化合物和方法技术

本文描述用于抑制miR‑10b活性的组合物和方法。所述组合物可向患有癌症诸如胶质瘤的受试者施用。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于调节MIR-10B活性的微小RNA化合物和方法相关申请的交叉引用本申请要求2018年11月13日提交的美国临时申请第62/760,546号的优先权益，所述申请出于任何目的以全文引用的方式并入本文。
本文提供用于调节miR-10b活性的方法和组合物。
技术介绍
微小RNA(microRNA)也称为“成熟微小RNA”，为在植物和动物的基因组中编码的小型(长约18-24个核苷酸)非编码RNA分子。在某些情况下，高度保守的内源性表达的微小RNA通过结合至特定mRNA的3'-非翻译区(3'-UTR)来调控基因的表达。已在植物和动物中鉴别出超过1000种不同的微小RNA。某些成熟微小RNA似乎来源于长度通常为数百个核苷酸的长内源性初级微小RNA转录物(也称为初级微小RNA、初级mir、初级miR或初级微小RNA前体)(Lee等人,EMBOJ.,2002,21(17),4663-4670)。对微小RNA的功能性分析揭示，这些小型非编码RNA促进动物的不同生理过程，包括发育时序、器官发生、分化、成型(patterning)、胚胎发生、生长控制和程序性细胞死亡。微小RNA参与的特定过程的实例包括干细胞分化、神经生成、血管生成、造血作用和胞吐作用(由Alvarez-Garcia和Miska,Development,2005,132,4653-4662评述)。微小RNA也通过靶向肿瘤抑制因子而与致癌作用相关(参见Gabriely等人,CancerRes.2011,71(10):3563–3572)。例如，miR-10b为与多种癌症中的不良预后相关的强力致癌微小RNA(参见TeplyukN等人,EMBOMolecularMedicine,2016,8(3),268-287)。基于癌症类型和遗传情况，miR-10b可通过直接靶向多种基因来促进肿瘤细胞的增殖、生存和迁移。具体而言，已经报告miR-10b调控乳腺癌和鳞状细胞癌细胞的侵入和转移。miR-10b的独特性质为其在胶质瘤(即，从胶质细胞生长的原发性脑癌)中被高度表达，但是不存在于正常神经胶质细胞中。在经培养的胶质瘤细胞中，miR-10b调控细胞周期和靶基因中的选择性剪接(参见Teplyuk2016)。胶质母细胞瘤也可被称为IV级星形细胞瘤，为最高级别的恶性胶质瘤和成年人中最常见的恶性原发性脑瘤。由于缺乏有效治疗，胶质母细胞瘤患者具有约14个月的中值生存期。约90％的胶质母细胞瘤病例展现miR-10b的高表达，从而支持其在肿瘤发展中的潜在作用。miR-10b在胶质瘤中的高表达的概况和其在正常神经胶质细胞中不存在表明靶向miR-10b的疗法可有效治疗胶质瘤。
技术实现思路
实施方案1.一种包含修饰寡核苷酸的化合物，其中所述修饰寡核苷酸由21个连接核苷组成并且所述修饰寡核苷酸的结构为：5'-CKAKAKAUKUKCKGGKUEUECEUEAECEAEGEGEGEUEAE-3'(SEQIDNO:2)其中后接下标“E”的核苷为2'-O-甲氧基乙基核苷，后接下标“K”的核苷为S-cEt核苷，并且没有下标的核苷为β-D-脱氧核糖核苷酸；其中每个U独立地选自非甲基化尿嘧啶和5-甲基尿嘧啶；其中每个C独立地选自非甲基化胞嘧啶和5-甲基胞嘧啶；并且其中每个键联为硫代磷酸酯键联；或其药学上可接受的盐。实施方案2.如实施方案1所述的化合物，其中所述修饰寡核苷酸由21个连接核苷组成并且所述修饰寡核苷酸的结构为：5'-CKAKAKAUKUKCKGGKmUEmUEmCEmUEAEmCEAEGEGEGEmUEAE-3'(SEQIDNO:2)其中后接下标“E”的核苷为2'-O-甲氧基乙基核苷，后接下标“K”的核苷为S-cEt核苷，并且没有下标的核苷为β-D-脱氧核糖核苷酸；其中“mU”为5-甲基尿嘧啶并且“U”为非甲基化尿嘧啶；其中“mC”为5-甲基胞嘧啶并且“C”为非甲基化胞嘧啶；并且其中每个键联为硫代磷酸酯键联；或其药学上可接受的盐。实施方案3.一种包含修饰寡核苷酸的化合物，其中所述修饰寡核苷酸由21个连接核苷组成并且所述修饰寡核苷酸的结构为：5'-CKAKAEAEUKUECEGKGEUEUKCEUEAKCEAEGEGEGEUEAE-3'(SEQIDNO:2)其中后接下标“E”的核苷为2'-O-甲氧基乙基核苷，后接下标“K”的核苷为S-cEt核苷，并且没有下标的核苷为β-D-脱氧核糖核苷酸；其中每个U独立地选自非甲基化尿嘧啶和5-甲基尿嘧啶；其中每个C独立地选自非甲基化胞嘧啶和5-甲基胞嘧啶；并且其中每个键联为硫代磷酸酯键联；或其药学上可接受的盐。实施方案4.如实施方案3所述的化合物，其中所述修饰寡核苷酸由21个连接核苷组成并且所述修饰寡核苷酸的结构为：5'-CKAKAEAEUKmUEmCEGKGEmUEUKmCEmUEAKmCEAEGEGEGEmUEAE-3'(SEQIDNO:2)其中后接下标“E”的核苷为2'-O-甲氧基乙基核苷，并且后接下标“K”的核苷为S-cEt核苷；其中“mU”为5-甲基尿嘧啶并且“U”为非甲基化尿嘧啶；其中“mC”为5-甲基胞嘧啶；并且其中每个核苷间键联为硫代磷酸酯键联；或其药学上可接受的盐。实施方案5.一种包含由9个连接核苷组成的修饰寡核苷酸的化合物，其中所述修饰寡核苷酸包含结构：5'-UKAKCMAFGFGFGMUKAK-3'其中后接下标“K”的核苷为S-cEt核苷，后接下标“M”的核苷为2'-O-甲基核苷，并且后接下标“F”的核苷为2'-氟核苷；其中每个U独立地选自非甲基化尿嘧啶和5-甲基尿嘧啶；其中每个C独立地选自非甲基化胞嘧啶和5-甲基胞嘧啶；并且其中每个核苷间键联为硫代磷酸酯键联；或其药学上可接受的盐。实施方案6.如实施方案7所述的化合物，其中所述修饰寡核苷酸由9个连接核苷组成并且所述修饰寡核苷酸的结构为：5'-UKAKCMAFGFGFGMUKAK-3'其中后接下标“K”的核苷为S-cEt核苷，后接下标“M”的核苷为2'-O-甲基核苷，并且后接下标“F”的核苷为2'-氟核苷；其中“U”为非甲基化尿嘧啶；其中“C”为非甲基化胞嘧啶；其中上标“O”指示磷酸二酯键联并且每个其他核苷间键联为硫代磷酸酯键联；或其药学上可接受的盐。实施方案7.如实施方案1至6中任一项所述的化合物，其中所述化合物由所述修饰寡核苷酸或其药学上可接受的盐组成。实施方案8.如实施方案1至7中任一项所述的化合物，其中所述药学上可接受的盐为钠盐。实施方案9.一种药物组合物，其包含如实施方案1至8中任一项所述的化合物和药学上可接受的稀释剂。实施方案10.如实施方案9所述的药物组合物，其中所述药学上可接受的稀释剂为水溶液。实施方案11.如实施方案10所述的药物组合物，其中所述水溶液为盐水溶液。实施方案12.一种药物组合物，其包含如实施方案1至8中任一项所述的化合物，所述组合物为冻干组合物。实施本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种包含修饰寡核苷酸的化合物，其中所述修饰寡核苷酸由21个连接核苷组成并且所述修饰寡核苷酸的结构为：/n5'-C

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20181113 US 62/760,5461.一种包含修饰寡核苷酸的化合物，其中所述修饰寡核苷酸由21个连接核苷组成并且所述修饰寡核苷酸的结构为：
5'-CKAKAKAUKUKCKGGKUEUECEUEAECEAEGEGEGEUEAE-3'(SEQIDNO:2)
其中后接下标“E”的核苷为2'-O-甲氧基乙基核苷，后接下标“K”的核苷为S-cEt核苷，并且没有下标的核苷为β-D-脱氧核糖核苷酸；其中每个U独立地选自非甲基化尿嘧啶和5-甲基尿嘧啶；其中每个C独立地选自非甲基化胞嘧啶和5-甲基胞嘧啶；并且其中每个键联为硫代磷酸酯键联；或其药学上可接受的盐。


2.如权利要求1所述的化合物，其中所述修饰寡核苷酸由21个连接核苷组成并且所述修饰寡核苷酸的结构为：
5'-CKAKAKAUKUKCKGGKmUEmUEmCEmUEAEmCEAEGEGEGEmUEAE-3'(SEQIDNO:2)
其中后接下标“E”的核苷为2'-O-甲氧基乙基核苷，后接下标“K”的核苷为S-cEt核苷，并且没有下标的核苷为β-D-脱氧核糖核苷酸；其中“mU”为5-甲基尿嘧啶并且“U”为非甲基化尿嘧啶；其中“mC”为5-甲基胞嘧啶并且“C”为非甲基化胞嘧啶；并且其中每个键联为硫代磷酸酯键联；或其药学上可接受的盐。


3.一种包含修饰寡核苷酸的化合物，其中所述修饰寡核苷酸由21个连接核苷组成并且所述修饰寡核苷酸的结构为：
5'-CKAKAEAEUKUECEGKGEUEUKCEUEAKCEAEGEGEGEUEAE-3'(SEQIDNO:2)
其中后接下标“E”的核苷为2'-O-甲氧基乙基核苷，后接下标“K”的核苷为S-cEt核苷，并且没有下标的核苷为β-D-脱氧核糖核苷酸；其中每个U独立地选自非甲基化尿嘧啶和5-甲基尿嘧啶；其中每个C独立地选自非甲基化胞嘧啶和5-甲基胞嘧啶；并且其中每个键联为硫代磷酸酯键联；或其药学上可接受的盐。


4.如权利要求3所述的化合物，其中所述修饰寡核苷酸由21个连接核苷组成并且所述修饰寡核苷酸的结构为：
5'-CKAKAEAEUKmUEmCEGKGEmUEUKmCEmUEAKmCEAEGEGEGEmUEAE-3'(SEQIDNO:2)
其中后接下标“E”的核苷为2'-O-甲氧基乙基核苷，并且后接下标“K”的核苷为S-cEt核苷；其中“mU”为5-甲基尿嘧啶并且“U”为非甲基化尿嘧啶；其中“mC”为5-甲基胞嘧啶；并且其中每个核苷间键联为硫代磷酸酯键联；或其药学上可接受的盐。


5.一种包含由9个连接核苷组成的修饰寡核苷酸的化合物，其中所述修饰寡核苷酸包含结构：
5'-UKAKCMAFGFGFGMUKAK-3'
其中后接下标“K”的核苷为S-cEt核苷，后接下标“M”的核苷为2'-O-甲基核苷，并且后接下标“F”的核苷为2'-氟核苷；其中每个U独立地选自非甲基化尿嘧啶和5-甲基尿嘧啶；其中每个C独立地选自非甲基化胞嘧啶和5-甲基胞嘧啶；并且其中每个核苷间键联为硫代磷酸酯键联；或其药学上可接受的盐。


6.如权利要求7所述的化合物，其中所述修饰寡核苷酸由9个连接核苷组成并且所述修饰寡核苷酸的结构为：
5'-UKAKCMAFGFGFGMUKAK-3'
其中后接下标“K”的核苷为S-cEt核苷，后接下标“M”的核苷为2'-O-甲基核苷，并且后接下标“F”的核苷为2'-氟核苷；其中“U”为非甲基化尿嘧啶；其中“C”为非甲基化胞嘧啶；其中上标“O”指示磷酸二酯键联并且每个其他核苷间键联为硫代磷酸酯键联；或其药学上可接受的盐。


7.如权利要求1至6中任一项所述的化合物，其中所述化合物由所述修饰寡核苷酸或其药学上可接受的盐组成。

【专利技术属性】
技术研发人员：C·R·阿勒顿，
申请(专利权)人：莱古路斯治疗法股份有限公司，
类型：发明
国别省市：美国;US