NFAT3作为治疗靶点在筛选或制备头颈部鳞状细胞癌药物中的应用制造技术

本发明专利技术公开了NFAT3作为治疗靶点在筛选或制备头颈部鳞状细胞癌药物中的应用。本发明专利技术以口腔鳞癌作为研究模型，发现NFAT3基因敲减可抑制HNSCC细胞增殖，NFAT3过表达则呈现相反趋势；进一步研究发现其以NFAT3‑SFPQ‑NONO蛋白复合物形式，通过MYC/GLS抑制谷氨酰胺代谢，抑制细胞增殖，延缓HNSCC的发展。表明NFAT3可以作为治疗靶点用于筛选或制备用于治疗头颈部鳞状细胞癌的药物；同时还发现，NFAT3在头颈部鳞状细胞癌组织中异常高表达。高表达NFAT3与HNSCC患者存活率下降相关；因此，NFAT3还可作为头颈部鳞状细胞癌的诊断标记物，用于HNSCC预后诊断。

【技术实现步骤摘要】
NFAT3作为治疗靶点在筛选或制备头颈部鳞状细胞癌药物中的应用
本专利技术涉及生物医药
，更具体地，涉及NFAT3作为治疗靶点在筛选或制备头颈部鳞状细胞癌药物中的应用。
技术介绍
头颈部鳞状细胞癌(headandnecksquamouscellcarcinoma，HNSCC)，是头颈部最常见的恶性肿瘤，起源于口腔、口咽、下咽和喉，居全球肿瘤发病率第六，每年影响超过600,000名患者，其癌变过程通常会经历一个以扁平苔藓(OLP)等口腔潜在恶性疾患为表现的过渡性阶段，诊断后5年生存率不及50％，属预后较差、毁容性疾病。尽管过去三十年间，手术、放疗及化疗等肿瘤治疗手段得到长足的发展，但HNSCC患者生存率的提高却十分有限，这种持续高的死亡率主要归咎于HNSCC的转移和复发。HNSCC是体细胞基因突变、烟草、酒精、HPV感染等内外部多种因素共同作用的结果，且具有高度异质性，造成临床上治疗效果和预后差异很大。因此，找寻HNSCC相关的治疗靶点对于筛选或制备头颈部鳞状细胞癌治疗药物具有重要意义。活化T细胞核因子(NuclearfactorofactivatedTcells，NFAT)是一类重要的转录因子。NFAT不仅调控T细胞的活化和分化，还可以调节其他免疫细胞，包括树突状细胞、B细胞以及巨核细胞。此外，NFAT在很多脊椎动物的发育过程中也发挥关键性的作用。但NFAT在肿瘤细胞转化和生长中的功能尚不十分明确。NFAT在免疫细胞和非免疫细胞(如软骨细胞、脂肪细胞和上皮细胞)中均有表达，在癌症的发生、转移中具有重要作用。但不同的NFAT亚型在不同肿瘤中功能不一。NFAT家族由NFAT1-NFAT4四个家族成员组成，NFAT2可诱导皮肤癌和卵巢癌的发生(TripathiP,WangY,CoussensM,etal.ActivationofNFATsignalingestablishesatumorigenicmicroenvironmentthroughcellautonomousandnon-cellautonomousmechanisms.[J].Oncogene,2014,33(14):1840-1849.)，NFAT1则可诱导细胞周期阻滞和凋亡，并抑制促癌基因H-rasV12介导的细胞转化(FagetDV,LucenaPI,RobbsBK,etal.NFAT1C-TerminalDomainsAreNecessarybutNotSufficientforInducingCellDeath[J].PLOSONE,2012,7.；RobbsBK,CruzALS,WerneckMBF,etal.DualRolesforNFATTranscriptionFactorGenesasOncogenesandTumorSuppressors[J].Molecular&CellularBiology,2008,28(23):7168.)。其中针对NFAT3的研究较少，而关于NFAT3在HNSCC中的研究，目前未见相关报导。
技术实现思路
本专利技术的目的在于克服现有技术中存在的上述缺陷和不足，提供NFAT3作为治疗靶点在筛选或制备头颈部鳞状细胞癌药物中的应用。本专利技术的另一目的在于提供NFAT3作为诊断标记物在制备头颈部鳞状细胞癌诊断产品中的应用。本专利技术的上述目的是通过以下技术方案给予实现的：本专利技术以口腔鳞癌作为研究模型，研究NFAT3在HNSCC肿瘤的作用。本专利技术发现，NFAT3基因敲减可抑制HNSCC细胞增殖，NFAT3过表达则呈现相反趋势。进一步研究发现，其以NFAT3-SFPQ-NONO蛋白复合物形式，通过MYC/GLS抑制谷氨酰胺代谢，进而抑制细胞增殖，延缓HNSCC的发展。表明NFAT3可作为治疗靶点用于治疗头颈部鳞状细胞癌。同时还发现，NFAT3、Myc、GLS在头颈部鳞状细胞癌组织中异常高表达。高表达NFAT3-SFPQ-NONO与HNSCC患者(n＝490，P＝0.0012)存活率下降相关；因此，NFAT3还可作为头颈部鳞状细胞癌的诊断标记物，用于HNSCC预后诊断。另外，本专利技术发现他克莫司可以抑制HNSCC细胞增殖，他克莫司在HNSCC中靶向NFAT3，进一步研究发现，其是通过NFAT3-SFPQ-NONO/c-Myc/GLS途径抑制谷氨酰胺代谢，进而影响细胞增殖，延缓HNSCC肿瘤发展。提出了他克莫司全新的非免疫抑制作用模式，是一种潜在的治疗HNSCC的治疗药物，同时也表明NFAT3在筛选潜在的头颈部鳞状细胞癌治疗药物与评估现有临床用药的安全性及其治疗适用范围上具有巨大潜力。因此，本专利技术请求保护下列关于NFAT3和他克莫司的相关用途：NFAT3作为治疗靶点在筛选或制备头颈部鳞状细胞癌药物中的应用。NFAT3在制备头颈部鳞状细胞癌谷氨酰胺代谢调控制剂中的应用。NFAT3作为诊断标记物在制备头颈部鳞状细胞癌诊断产品中的应用。NFAT3表达抑制剂在制备头颈部鳞状细胞癌药物中的应用。本专利技术还提供一种头颈部鳞状细胞癌治疗药物，含有NFAT3表达抑制剂。优选地，所述抑制剂为抑制NFAT3表达的siRNA或shRNA。优选地，所述siRNA或shRNA的序列为TCAGGTGCACCGTATCACA或AGCTGAGGATCGAGGTACA。本专利技术还提供一种头颈部鳞状细胞癌诊断产品，包含检测NFAT3表达量的试剂。所述产品为制剂、芯片或试剂盒等，包含可通过WesternBlot检测NFAT3蛋白表达含量的实际或通过实时荧光定量PCR检测NFAT3基因表达量的引物。优选地，所述引物上游序列为：5’-ACTGGAGTGAAGGCGTGTCTAGAG-3’；下游序列为：5’-CTCCAAAGAGCTCTGGAGCCT-3’。他克莫司在制备头颈部鳞状细胞癌药物中的应用。他克莫司在制备NFAT3/SFPQ/NONO蛋白复合物抑制剂中的应用。优选地，所述药物还含有他克莫司，从而使NFAT3表达抑制剂和他克莫司可共同发挥治疗作用。本专利技术阐明了NFAT3在头颈部鳞状细胞癌中的作用与分子机制，NFAT3通过形成NFAT3-SFPQ-NONO蛋白复合物与c-Myc启动子结合，调控GLS，影响肿瘤细胞谷氨酰胺代谢及细胞增殖的分子机制。他克莫司的应用能够靶向降低NFAT3核表达，降低谷氨酰胺代谢及细胞增殖，从而延缓肿瘤的发展。与现有技术相比，本专利技术具有以下有益效果：本专利技术提供了NFAT3作为治疗靶点在头颈部鳞状细胞癌中的应用，首次提出NFAT3在HNSCC中构成蛋白复合体NFAT3-SFPQ-NONO，与c-Myc启动子结合，进一步调控下游GLS，影响谷氨酰胺代谢，影响肿瘤细胞增殖。并借助数据库进行了蛋白结合的电脑模拟，定义了可能的结合氨基酸序列。借助数据库进行了生存分析，证实NFAT3-SFPQ-NONO在HNSCC与预后存在相关性；表明，NFAT3可作为治疗靶点或诊断标记物用于头颈部本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.NFAT3作为治疗靶点在筛选或制备头颈部鳞状细胞癌药物中的应用。/n

【技术特征摘要】
1.NFAT3作为治疗靶点在筛选或制备头颈部鳞状细胞癌药物中的应用。


2.NFAT3在制备头颈部鳞状细胞癌谷氨酰胺代谢调控制剂中的应用。


3.NFAT3作为诊断标记物在制备头颈部鳞状细胞癌诊断产品中的应用。


4.NFAT3表达抑制剂在制备头颈部鳞状细胞癌药物中的应用。


5.一种头颈部鳞状细胞癌治疗药物，其特征在于，含有NFAT3表达抑制剂。


6.根据权利要求5所述的药物，其特征在于，所述抑制剂为抑...

【专利技术属性】
技术研发人员：王韵，夏娟，程斌，李媛媛，李婕，
申请(专利权)人：中山大学附属口腔医院，
类型：发明
国别省市：广东;44