抗SARS-COV-2中和抗体的表达载体制造技术

本公开提供了表达针对SARS‑COV‑2的新型中和抗体或其抗原结合片段的重组表达载体。还提供了包含其的药物组合物和试剂盒及其用途。

【技术实现步骤摘要】
抗SARS-COV-2中和抗体的表达载体
本公开大体上涉及表达抗SARS-COV-2中和抗体的表达载体。
技术介绍
由新型冠状病毒，即严重急性呼吸综合征冠状病毒2（severeacuterespiratorysyndromecoronavirus2；SARS-CoV-2）引起的全球大流行的冠状病毒疾病2019（COVID-19）已严重恶化了公共卫生和经济。虽然大部分感染群体显示轻微症状，但一些进展成急性呼吸窘迫综合征，且现已报告超过2,000,000例死亡。SARS-CoV-2感染宿主细胞是通过病毒包膜上表达的称为刺突（S）糖蛋白的糖蛋白介导，所述糖蛋白包含S1亚基和S2亚基。S1亚基含有与宿主细胞上的人血管收缩素转化酶2（angiotensinconvertingenzyme2；ACE2）受体直接结合的受体结合结构域（receptor-bindingdomain；RBD），而S2亚基介导病毒包膜与宿主细胞膜融合以便促进病毒感染。康复患者的血浆已用以治疗其它感染，且也已证明是有益于轻微和严重COVID-19患者的，这是由于血浆中产生的中和抗体。然而，由于血浆是由从COVID-19康复的人捐赠的且不能大规模生产，所以康复血浆治疗受到限制。因此，迫切需要递送和制造针对SARS-COV-2具有高度强效的中和效果的中和抗体的大规模重组载体。
技术实现思路
在本公开通篇中，冠词“一个（种）（a/an）”和“所述（the）”在本文中用于指一个（种）或超过一个（种）（即，至少一个（种））所述冠词的语法对象。举例来说，“一种抗体”意味着一种抗体或超过一种抗体。在一个方面中，本公开提供了一种重组表达载体，其包含含有编码抗SARS-COV-2中和抗体或其抗原结合片段的核酸序列的表达盒。在一些实施例中，抗SARS-COV-2中和抗体或其抗原结合片段包含选自以下的氨基酸序列的重链CDR（HCDR）1、HCDR2和HCDR3：a）SEQIDNO:1、SEQIDNO:2和SEQIDNO:3；b）SEQIDNO:11、SEQIDNO:12和SEQIDNO:13；或c）SEQIDNO:21、SEQIDNO:22和SEQIDNO:23。在一些实施例中，a）所述HCDR1由SEQIDNO:31的核酸序列编码，所述HCDR2由SEQIDNO:32的核酸序列编码，和所述HCDR3由SEQIDNO:33的核酸序列编码；b）所述HCDR1由SEQIDNO:39的核酸序列编码，所述HCDR2由SEQIDNO:40的核酸序列编码，和所述HCDR3由SEQIDNO:41的核酸序列编码；或c）所述HCDR1由SEQIDNO:47的核酸序列编码，所述HCDR2由SEQIDNO:48的核酸序列编码，和所述HCDR3由SEQIDNO:49的核酸序列编码。在一些实施例中，所述抗SARS-COV-2中和抗体或其抗原结合片段进一步包含选自以下的氨基酸序列的轻链CDR（LCDR）1、LCDR2和LCDR3：a）SEQIDNO:4、SEQIDNO:5和SEQIDNO:6；b）SEQIDNO:14、SEQIDNO:15和SEQIDNO:16；或c）SEQIDNO:24、SEQIDNO:25和SEQIDNO:26。在一些实施例中，a）所述LCDR1由SEQIDNO:34的核酸序列编码，所述LCDR2由SEQIDNO:35的核酸序列编码，和所述LCDR3由SEQIDNO:36的核酸序列编码；b）所述LCDR1由SEQIDNO:42的核酸序列编码，所述LCDR2由SEQIDNO:43的核酸序列编码，和所述LCDR3由SEQIDNO:44的核酸序列编码；或c）所述LCDR1由SEQIDNO:50的核酸序列编码，所述LCDR2由SEQIDNO:51的核酸序列编码，和所述LCDR3由SEQIDNO:52的核酸序列编码。在一些实施例中，抗SARS-COV-2中和抗体或其抗原结合片段包含：a）SEQIDNO:1的HCDR1、SEQIDNO:2的HCDR2和SEQIDNO:3的HCDR3，与SEQIDNO:4的LCDR1、SEQIDNO:5的LCDR2和SEQIDNO:6的LCDR3；b）SEQIDNO:11的HCDR1、SEQIDNO:12的HCDR2和SEQIDNO:13的HCDR3，与SEQIDNO:14的LCDR1、SEQIDNO:15的LCDR2和SEQIDNO:16的LCDR3；或c）SEQIDNO:21的HCDR1、SEQIDNO:22的HCDR2和SEQIDNO:23的HCDR3，与SEQIDNO:24的LCDR1、SEQIDNO:25的LCDR2和SEQIDNO:26的LCDR3。在一些实施例中，a）所述HCDR1由SEQIDNO:31的核酸序列编码，所述HCDR2由SEQIDNO:32的核酸序列编码，所述HCDR3由SEQIDNO:33的核酸序列编码，所述LCDR1由SEQIDNO:34的核酸序列编码，所述LCDR2由SEQIDNO:35的核酸序列编码，且所述LCDR3由SEQIDNO:36的核酸序列编码；b）所述HCDR1由SEQIDNO:39的核酸序列编码，所述HCDR2由SEQIDNO:40的核酸序列编码，所述HCDR3由SEQIDNO:41的核酸序列编码，所述LCDR1由SEQIDNO:42的核酸序列编码，所述LCDR2由SEQIDNO:43的核酸序列编码，且所述LCDR3由SEQIDNO:44的核酸序列编码；或c）所述HCDR1由SEQIDNO:47的核酸序列编码，所述HCDR2由SEQIDNO:48的核酸序列编码，所述HCDR3由SEQIDNO:49的核酸序列编码，所述LCDR1由SEQIDNO:50的核酸序列编码，所述LCDR2由SEQIDNO:51的核酸序列编码，且所述LCDR3由SEQIDNO:52的核酸序列编码。在一些实施例中，抗SARS-COV-2中和抗体或其抗原结合片段包含含有SEQIDNO:7、SEQIDNO:17、SEQIDNO:27的氨基酸序列或与其具有至少80%（或至少85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%）序列一致性的序列的重链可变区（VH）。在一些实施例中，a）所述VH包含SEQIDNO:7的氨基酸序列，其由SEQIDNO:9的核酸序列编码；b）所述VH包含SEQIDNO:17的氨基酸序列，其由SEQIDNO:19的核酸序列编码；和c）所述VH包含SEQIDNO:27的氨基酸序列，其由SEQIDNO:29的核酸序列编码。在一些实施例中，抗SARS-COV-2中和抗体或其抗原结合片段进一步包含含有SEQIDNO:8、SEQIDNO:18、SEQIDNO:28的氨基酸序列或与其具有至少80%（或至少85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%）序列一致性的序列的轻链可变区（VL）。在一些实施例中，a）所述VL包含SEQIDNO:8的氨基酸序列本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种重组表达载体，其包含含有编码抗SARS-COV-2中和抗体或其抗原结合片段的核酸序列的表达盒，其中所述抗SARS-COV-2中和抗体或其抗原结合片段包含：/na）SEQ ID NO: 1的HCDR1、SEQ ID NO: 2的HCDR2和SEQ ID NO: 3的HCDR3，与SEQ IDNO: 4的LCDR1、SEQ ID NO: 5的LCDR2和SEQ ID NO: 6的LCDR3；或/nb）SEQ ID NO: 11的HCDR1、SEQ ID NO: 12的HCDR2和SEQ ID NO: 13的HCDR3，与SEQID NO: 14的LCDR1、SEQ ID NO: 15的LCDR2和SEQ ID NO: 16的LCDR3；或/nc）SEQ ID NO: 21的HCDR1、SEQ ID NO: 22的HCDR2和SEQ ID NO: 23的HCDR3，与SEQID NO: 24的LCDR1、SEQ ID NO: 25的LCDR2和SEQ ID NO: 26的LCDR3。/n

【技术特征摘要】
1.一种重组表达载体，其包含含有编码抗SARS-COV-2中和抗体或其抗原结合片段的核酸序列的表达盒，其中所述抗SARS-COV-2中和抗体或其抗原结合片段包含：
a）SEQIDNO:1的HCDR1、SEQIDNO:2的HCDR2和SEQIDNO:3的HCDR3，与SEQIDNO:4的LCDR1、SEQIDNO:5的LCDR2和SEQIDNO:6的LCDR3；或
b）SEQIDNO:11的HCDR1、SEQIDNO:12的HCDR2和SEQIDNO:13的HCDR3，与SEQIDNO:14的LCDR1、SEQIDNO:15的LCDR2和SEQIDNO:16的LCDR3；或
c）SEQIDNO:21的HCDR1、SEQIDNO:22的HCDR2和SEQIDNO:23的HCDR3，与SEQIDNO:24的LCDR1、SEQIDNO:25的LCDR2和SEQIDNO:26的LCDR3。


2.根据权利要求1所述的重组表达载体，其中
a）所述HCDR1由SEQIDNO:31的核酸序列编码，所述HCDR2由SEQIDNO:32的核酸序列编码，所述HCDR3由SEQIDNO:33的核酸序列编码，所述LCDR1由SEQIDNO:34的核酸序列编码，所述LCDR2由SEQIDNO:35的核酸序列编码，且所述LCDR3由SEQIDNO:36的核酸序列编码；或
b）所述HCDR1由SEQIDNO:39的核酸序列编码，所述HCDR2由SEQIDNO:40的核酸序列编码，所述HCDR3由SEQIDNO:41的核酸序列编码，所述LCDR1由SEQIDNO:42的核酸序列编码，所述LCDR2由SEQIDNO:43的核酸序列编码，且所述LCDR3由SEQIDNO:44的核酸序列编码；或
c）所述HCDR1由SEQIDNO:47的核酸序列编码，所述HCDR2由SEQIDNO:48的核酸序列编码，所述HCDR3由SEQIDNO:49的核酸序列编码，所述LCDR1由SEQIDNO:50的核酸序列编码，所述LCDR2由SEQIDNO:51的核酸序列编码，且所述LCDR3由SEQIDNO:52的核酸序列编码。


3.根据前述权利要求1-2中任一项所述的重组表达载体，其中所述抗SARS-COV-2中和抗体或其抗原结合片段包含含有SEQIDNO:7、SEQIDNO:17或SEQIDNO:27的氨基酸序列或与其具有至少80%序列一致性的序列的重链可变区（VH）。


4.根据权利要求3所述的重组表达载体，其中
a）所述VH包含SEQIDNO:7的氨基酸序列，其由SEQIDNO:9的核酸序列编码；
b）所述VH包含SEQIDNO:17的氨基酸序列，其由SEQIDNO:19的核酸序列编码；并且
c）所述VH包含SEQIDNO:27的氨基酸序列，其由SEQIDNO:29的核酸序列编码。


5.根据前述权利要求中3所述的重组表达载体，其中所述抗SARS-COV-2中和抗体或其抗原结合片段进一步包含含有SEQIDNO:8、SEQIDNO:18或SEQIDNO:28的氨基酸序列或与其具有至少80%序列一致性的序列的轻链可变区（VL）。


6.根据权利要求5所述的重组表达载体，其中
a）所述VL包含SEQIDNO:8的氨基酸序列，其由SEQIDNO:10的核酸序列编码；
b）所述VL包含SEQIDNO:18的氨基酸序列，其由SEQIDNO:20的核酸序列编码；并且
c）所述VL包含SEQIDNO:28的氨基酸序列，其由SEQIDNO:30的核酸序列编码。


7.根据前述权利要求1-2中任一项所述的重组表达载体，其中所述抗SARS-COV-2中和抗体或其抗原结合片段包含：
a）包含SEQIDNO:7的氨基酸序列的VH和包含SEQIDNO:8的氨基酸序列的VL，或与其具有至少80%序列一致性但保留对于SARS-CoV-2的特异性结合亲和力的同源序列；或
b）包含SEQIDNO:17的氨基酸序列的VH和包含SEQIDNO:18的氨基酸序列的VL，或与其具有至少80%序列一致性但保留对于SARS-CoV-2的特异性结合亲和力的同源序列；或
c）包含SEQIDNO:27的氨基酸序列的VH和包含SEQIDNO:28的氨基酸序列的VL，或与其具有至少80%序列一致性但保留对于SARS-CoV-2的特异性结合亲和力的同源序列。


8.根据权利要求7所述的重组表达载体，其中
a）项中的VH和VL的氨基酸序列分别由SEQIDNO:9和SEQIDNO:10的核酸序列编码；或
b）项中的VH和VL的氨基酸序列分别由SEQIDNO:19和SEQIDNO:20的核酸序列编码；或
c）项中的VH和VL的氨基酸序列分别由SEQIDNO:29和SEQIDNO:30的核酸序列编码。


9.根据前述权利要求1-2中任一项所述的重组表达载体，其中所述抗SARS-COV-2中和抗体进一步包含重链恒定区和轻链恒定区。


10.根据权利要求9所述的重组表达载体，其中所述重链恒定区来自人IgG1。


11.根据权利要求10所述的重组表达载体，其中所述重链恒定区包含SEQIDNO:37的氨基酸序列。


12.根据权利要求10所述的重组表达载体，其中所述重链恒定区由SEQIDNO:38的核酸序列编码。


13.根据权利要求9所述的重组表达载体，其中所述轻链恒定区来自人λ轻链。


14.根据权利要求1...

【专利技术属性】
技术研发人员：李元念，王文义，
申请(专利权)人：恒翼生物医药科技上海有限公司，
类型：发明
国别省市：上海;31