一种用于多种基因突变联合检测试剂盒制造技术

本实用新型专利技术公开了一种用于多种基因突变联合检测试剂盒，包括：外壳、嵌套于所述外壳内的内壳及嵌套于所述内壳内的镶嵌体；所述外壳为一盒体且该盒体一端面为一开口，所述开口用于内壳嵌套于外壳内；所述内壳内固接有一隔板，所述隔板将内壳内的腔室分隔为第一腔室与第二腔室；所述镶嵌体包括海绵体，所述海绵体包括第一海绵体与第二海绵体，所述第一海绵体与第二海绵体分别设置于所述第一腔室与所述第二腔室中，所述第一海绵体与第二海绵体上均均匀开设有若干个第一容器孔与第二容器孔，所述第一容器孔的直径大于第二容器孔的直径。根据本实用新型专利技术，避免试剂多次使用发生反复冻融失效，且多次使用不会发生反复交叉感染。

【技术实现步骤摘要】
一种用于多种基因突变联合检测试剂盒
本技术涉及生物
，特别涉及一种用于多种基因突变联合检测试剂盒。
技术介绍
结直肠癌(Colorectalcancer，CRC)是全球第三大高发肿瘤，第四位致死肿瘤，每年有120万新确诊的病例。对于晚期结直肠癌，分子靶向治疗是最重要的治疗手段，相比传统的放疗、化疗，其疗效好、副作用小，而结直肠癌的分子靶向治疗需要检测结直肠癌相关基因突变情况来指导用药。目前普遍认为结直肠癌中经常出现的APC、BRAF、KRAS、PIK3CA和TP53等基因的体细胞突变，可驱动结直肠癌的发生发展。中国结直肠癌诊疗规范指出：确定为复发或转移性结直肠癌时，推荐检测KRAS、NRAS、BRAF基因状态。美国临床肿瘤协会(ASCO)建议对结直肠癌患者检测KRAS、NRAS和BRAF基因。NGS作为精准医疗中非常有潜力的技术，已经在国内外广泛用于大量临床样本的基因检测。目前市场上用于NGS检测的建库试剂存在原料组分多，实验过程复杂，耗时过长等缺点。特别是同一种试剂多次使用的过程中很容易碰到两种问题：一是试剂反复冻融从而失效；二是同一管试剂反复取用导致不同样本间发生交叉污染，两者均会导致整体实验的失败。因此，有必要通过优化设计来改善试剂盒的可靠性。
技术实现思路
针对现有技术中存在的不足之处，本技术的目的是提供一种用于多种基因突变联合检测试剂盒，避免试剂多次使用发生反复冻融失效，且多次使用不会发生反复交叉感染。为了实现根据本技术的上述目的和其他优点，提供了一种用于多种基因突变联合检测试剂盒，包括：外壳、嵌套于所述外壳内的内壳及嵌套于所述内壳内的镶嵌体；所述外壳为一盒体且该盒体一端面为一开口，所述开口用于内壳嵌套于外壳内；所述内壳内固接有一隔板，所述隔板将内壳内的腔室分隔为第一腔室与第二腔室；所述镶嵌体包括海绵体，所述海绵体包括第一海绵体与第二海绵体，所述第一海绵体与第二海绵体分别设置于所述第一腔室与所述第二腔室中，所述第一海绵体与第二海绵体上均均匀开设有若干个第一容器孔与第二容器孔，所述第一容器孔的直径大于第二容器孔的直径。优选的，所述内壳为一盒体且设有一开口，内壳与所述开口相邻的一侧面上固接有推拉板，所述推拉板上固接有把手。优选的，所述第一海绵体与第二海绵体上均开设有6个第一容器孔与24个第二容器孔。优选的，所述第一海绵体与第二海绵体上均开设有12个第一容器孔与48个第二容器孔。优选的，所述6个第一容器孔中分别装有1个第一扩增反应液的试剂管、1个第二扩增反应液的试剂管、1个引物池的试剂管、2个纯化水的试剂管，所述24个第二容器孔中装有3个预分装IndexAdaptor的8联PCR管。优选的，所述12个第一容器孔中分别装有2个第一扩增反应液的试剂管、2个第二扩增反应液的试剂管、2个引物池的试剂管、4个纯化水的试剂管，所述48个第二容器孔中装有6个预分装IndexAdaptor的8联PCR管。本技术与现有技术相比，其有益效果是：(1)本试剂盒检测基于NGS原理，结构简单合理，使用方便，不易发生污染。(2)本试剂盒可同时检测人类KRAS，NRAS，BRAF，PKI3CA等4基因7个位点多达14种突变，检测新鲜或冰冻组织，或石蜡包埋组织(FFPE)样本时，具有灵敏度高，特异性强，耗时短，成本低等特点，检测的灵敏度最高可达0.6％。(3)本试剂盒含两组各24或48人份的检测试剂，分别盛装在1块海绵上，中间用挡板隔开，能有效地减少试剂反复冻融和交叉污染的风险，使实验结果更加准确。附图说明图1为根据本技术的用于多种基因突变联合检测试剂盒的三维结构包装示意图。图中：1.外壳；2.内壳；3.推拉板；4.把手；5.隔板；6.第一海绵体；7.第二海绵体；8.第一容器孔；9.第二容器孔。具体实施方式下面将结合本技术实施例中的附图，对本技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本技术保护的范围。参照图1，一种用于多种基因突变联合检测试剂盒，包括：外壳1、嵌套于所述外壳1内的内壳2及嵌套于所述内壳2内的镶嵌体；所述外壳1为一盒体且该盒体一端面为一开口，所述开口用于内壳2嵌套于外壳1内，可以避免内壳2上的试剂管被污染；所述内壳2内固接有一隔板5，所述隔板5将内壳2内的腔室分隔为第一腔室与第二腔室；所述镶嵌体包括海绵体，所述海绵体包括第一海绵体6与第二海绵体7，所述第一海绵体6与第二海绵体7分别设置于所述第一腔室与所述第二腔室中，所述第一海绵体6与第二海绵体7上均均匀开设有若干个第一容器孔8与第二容器孔9，所述第一容器孔8的直径大于第二容器孔9的直径，通过将内壳2分割为2个腔室，可以一次性放置2个海绵体，而每个海绵体上放置有一次反应所需的各个试剂管和预分装有IndexAdaptor的反应管，每次取一块海绵上的试剂用于反应且一次性消耗完毕，避免了反复冻融和重复取用的交叉感染。进一步的，所述内壳2为一盒体且设有一开口，内壳2与所述开口相邻的一侧面上固接有推拉板3，所述推拉板3上固接有把手4，该把手4可以便捷的将内壳2推进外壳1内，同时当使用时，通过把手4方便将内壳2从外壳1内拉出。进一步的，所述第一海绵体6与第二海绵体7上均开设有6个第一容器孔8与24个第二容器孔9。进一步的，所述第一海绵体6与第二海绵体7上均开设有12个第一容器孔8与48个第二容器孔9。进一步的，所述6个第一容器孔8中分别装有1个第一扩增反应液的试剂管、1个第二扩增反应液的试剂管、1个引物池的试剂管、2个纯化水的试剂管，所述24个第二容器孔9中装有3个预分装IndexAdaptor的8联PCR管。进一步的，所述12个第一容器孔8中分别装有2个第一扩增反应液的试剂管、2个第二扩增反应液的试剂管、2个引物池的试剂管、4个纯化水的试剂管，所述48个第二容器孔9中装有6个预分装IndexAdaptor的8联PCR管。该试剂盒包括以下操作步骤1.样本准备1.1样本提取使用Qiagen公司的GeneReadDNAFFPEKit(货号：180134)提取FFPE样本DNA。1.2样本质控使用ThermoFisher公司的QubitdsDNAHSAssayKit(货号：Q32851/Q32854)对提取的DNA进行定量。2.文库构建2.1第一轮PCR2.1.1按下表所示配制第一轮PCR反应液，每管加入相应的DNA样本。试剂每个反应需要的体积(μL)第一扩增反应液12.5引物池5DNA(20-60n本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于多种基因突变联合检测试剂盒，其特征在于，包括：/n外壳(1)、嵌套于所述外壳(1)内的内壳(2)及嵌套于所述内壳(2)内的镶嵌体；/n所述外壳(1)为一盒体且该盒体一端面为一开口，所述开口用于内壳(2)嵌套于外壳(1)内；/n所述内壳(2)内固接有一隔板(5)，所述隔板(5)将内壳(2)内的腔室分隔为第一腔室与第二腔室；/n所述镶嵌体包括海绵体，所述海绵体包括第一海绵体(6)与第二海绵体(7)，所述第一海绵体(6)与第二海绵体(7)分别设置于所述第一腔室与所述第二腔室中，所述第一海绵体(6)与第二海绵体(7)上均均匀开设有若干个第一容器孔(8)与第二容器孔(9)，所述第一容器孔(8)的直径大于第二容器孔(9)的直径。/n

【技术特征摘要】
1.一种用于多种基因突变联合检测试剂盒，其特征在于，包括：
外壳(1)、嵌套于所述外壳(1)内的内壳(2)及嵌套于所述内壳(2)内的镶嵌体；
所述外壳(1)为一盒体且该盒体一端面为一开口，所述开口用于内壳(2)嵌套于外壳(1)内；
所述内壳(2)内固接有一隔板(5)，所述隔板(5)将内壳(2)内的腔室分隔为第一腔室与第二腔室；
所述镶嵌体包括海绵体，所述海绵体包括第一海绵体(6)与第二海绵体(7)，所述第一海绵体(6)与第二海绵体(7)分别设置于所述第一腔室与所述第二腔室中，所述第一海绵体(6)与第二海绵体(7)上均均匀开设有若干个第一容器孔(8)与第二容器孔(9)，所述第一容器孔(8)的直径大于第二容器孔(9)的直径。


2.如权利要求1所述的一种用于多种基因突变联合检测试剂盒，其特征在于，所述内壳(2)为一盒体且设有一开口，内壳(2)与所述开口相邻的一侧面上固接有推拉板(3)，所述推拉板(3)上固接有把手(4)。


3.如权利要求1所述的一种用于多种基...

【专利技术属性】
技术研发人员：王强，焦晔，卢磊磊，
申请(专利权)人：上海真固生物科技有限公司，
类型：新型
国别省市：上海;31