一种分离检测4,5,6,7-四氢噻吩[3,2-c]吡啶盐酸盐及其有关物质的方法技术

本发明专利技术公开了一种高效液相色谱分离检测4,5,6,7‑四氢噻吩[3,2‑c]吡啶盐酸盐及其有关物质的方法。所述方法包括如下步骤：1)配制样品溶液：取4,5,6,7‑四氢噻吩[3,2‑c]吡啶盐酸盐样品，用流动相溶解，配制成4,5,6,7‑四氢噻吩[3，2‑c]吡啶盐酸盐的样品溶液；2)取所述样品溶液注入高效液相色谱仪中，记录色谱图，完成所述4,5,6,7‑四氢噻吩[3，2‑c]吡啶盐酸盐样品的分离检测；其中，所述高效液相色谱中，流动相为体积比为25:75‑5:95的有机相:25mmol/L磷酸二氢钾缓冲溶液；所述有机相为甲醇或乙腈。本发明专利技术所述方法可对4,5,6,7‑四氢噻吩[3，2‑c]吡啶盐酸盐及其有关物质进行有效分离，从而实现血小板凝结抑制剂类药物原料药及制剂的质量控制。

【技术实现步骤摘要】
一种分离检测4,5,6,7-四氢噻吩[3,2-c]吡啶盐酸盐及其有关物质的方法
本专利技术涉及化合物检测
，具体涉及一种高效液相色谱分离检测4,5,6,7-四氢噻吩[3,2-c]吡啶盐酸盐及其有关物质的方法。
技术介绍
4,5,6,7-四氢噻吩并[3,2-c]吡啶盐酸盐是一种医药中间体，主要用于合成血小板凝结抑制剂如噻氯吡啶、氯吡格雷、普拉格雷等药物。为了提高药品生产的质量，按照药品生产规范及产品标准，如美国药典(USP)及欧洲药典(EP)的规定，需要对关键中间体4,5,6,7-四氢噻吩[3，2-c]吡啶盐酸盐的质量进行有效的分析和控制，分析4,5,6,7-四氢噻吩[3，2-c]吡啶盐酸盐的制备及降解过程，可能存在的几种杂质组分为：而目前，暂未见比较成熟的关于分析和检测4,5,6,7-四氢噻吩[3，2-c]吡啶盐酸盐的相关报道。现有技术：“科学技术与工程第13卷第30期(4,5,6,7-四氢噻吩并[3，2-c]吡啶的合成研究)”公开了HPLC方法用的梯度洗脱，但文献中并未具体说明梯度洗脱程序，而且运用该文献方法不能将4,5,6,7-四氢噻吩[3，2-c]吡啶盐酸盐与其有关物质完全分离开。因此，本领域需要提供一种分析4,5,6,7-四氢噻吩[3，2-c]吡啶盐酸盐的纯度，并可同时将4,5,6,7-四氢噻吩[3，2-c]吡啶盐酸盐及其有关物质进行有效分离的方法，从而实现血小板凝结抑制剂类药物原料药及制剂的质量控制。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术的目的在于提供一种高效液相色谱分离检测4,5,6,7-四氢噻吩[3,2-c]吡啶盐酸盐及其有关物质的方法，用以分析4,5,6,7-四氢噻吩[3，2-c]吡啶盐酸盐的纯度，并同时将4,5,6,7-四氢噻吩[3，2-c]吡啶盐酸盐及其有关物质进行有效分离，从而实现血小板凝结抑制剂类药物原料药及制剂的质量控制。为实现上述目的，本专利技术提供了一种高效液相色谱分离检测4,5,6,7-四氢噻吩[3,2-c]吡啶盐酸盐及其有关物质的方法，以体积比为25:75-5:95的有机相及25mmol/L磷酸二氢钾缓冲溶液为流动相；所述有机相为甲醇或乙腈。具体地，该方法包括如下步骤：1)配制样品溶液：取4,5,6,7-四氢噻吩[3,2-c]吡啶盐酸盐样品，用流动相溶解，配制成4,5,6,7-四氢噻吩[3，2-c]吡啶盐酸盐的样品溶液；2)取所述样品溶液注入高效液相色谱仪中，记录色谱图，完成所述4,5,6,7-四氢噻吩[3，2-c]吡啶盐酸盐样品的分离检测；其中，流动相为体积比为25:75-5:95的有机相与25mmol/L磷酸二氢钾缓冲溶液。在本专利技术的一个实施方案中，所述高效液相色谱仪的流动相为体积比为25：75～5：95(优选为1:9)的有机相:25mmol/L磷酸二氢钾缓冲溶液。在本专利技术的一个实施方案中，所述有机相为甲醇或乙腈。在本专利技术的一个优选的实施方案中，所述有机相为乙腈。本专利技术所述流动相能够很好的洗脱杂质，使主峰中杂质峰得到有效分离，各色谱峰之间具有良好的分离度。在本专利技术的一个实施方案中，所述磷酸二氢钾缓冲溶液的pH为2-4，优选为2.2。在该pH下，主峰和杂质峰峰形具有很好的对称性，各色谱峰之间具有良好的分离度。所述磷酸二氢钾缓冲溶液可市售购得，或可通过本领域的常规技术手段制备得到。在本专利技术的一个实施方案中，所述磷酸二氢钾缓冲溶液通过如下方法制备得到：精密称取磷酸二氢钾3.4g，加水1000ml，再加1ml三乙胺，调节pH，即得所述磷酸二氢钾缓冲溶液。在本专利技术的一个实施方案中，所述磷酸二氢钾缓冲溶液的pH可通过使用磷酸进行调节。在本专利技术的一个实施方案中，所述流动相的流速为0.2-1.0ml/min。优选为0.5ml/min。在该流速下，色谱峰出峰时间适宜，如果流速小于0.2ml/min，则分析时间过长，影响分析效率，如果流速大于1.0ml/min，则出峰时间过快，可能会导致部分杂质无法检出。在本专利技术的一个实施方案中，所述高效液相色谱仪的色谱柱为WelchXB-C18(250mm×4.6mm，5μm)。在本专利技术的一个实施方案中，所述高效液相色谱仪的柱温为20-40℃，优选为30℃。在该柱温下，有利于峰形，又不至于出峰时间太早而影响分离度。如果温度小于20℃，则峰形很宽也不利于分离，如果温度大于40℃，则会导致出峰时间过早。在本专利技术的一个实施方案中，所述色谱图为在检测波长为210-240nm(优选为234nm)下记录的色谱图。在该检测波长下，各色谱峰均有优良的紫外吸收。在本专利技术的一个实施方案中，所述样品溶液的浓度为0.2±0.1mg/ml的4,5,6,7-四氢噻吩[3，2-c]吡啶盐酸盐的浓度。在本专利技术的一个实施方案中，步骤2)中所述样品溶液的进样量为10μl。在本专利技术的一个实施方案中，所述有关物质包括如下物质：在上述色谱条件下，能够在相对较短时间内准确对样品进行检测，具有灵敏度高、响应强、稳定性好、效率高的优点。通过本专利技术方法得到的色谱图，各杂质峰出峰形态好，能够清晰分辨上述各杂质情况。在本专利技术的一个优选的实施方案中，所述高效液相色谱分离检测4,5,6,7-四氢噻吩[3,2-c]吡啶盐酸盐及其有关物质的方法包括如下步骤：1)配制样品溶液：取4,5,6,7-四氢噻吩[3,2-c]吡啶盐酸盐样品，用流动相溶解，配制成4,5,6,7-四氢噻吩[3，2-c]吡啶盐酸盐的浓度为0.2±0.1mg/ml的样品溶液；2)取10μl所述样品溶液注入高效液相色谱仪中，记录色谱图，完成所述4,5,6,7-四氢噻吩[3，2-c]吡啶盐酸盐样品的分离检测；其中，所述高效液相色谱仪的色谱条件为：色谱柱为WelchXB-C18(250mm×4.6mm，5μm)；流动相为体积比为25:75-5:95的乙腈与25mmol/L磷酸二氢钾缓冲溶液，其中，所述磷酸二氢钾缓冲溶液的pH为2-3；所述高效液相色谱仪的柱温为20-40℃；所述流动相的流速为0.2-1.0ml/min；检测波长为210-240nm。在本专利技术的一个进一步优选的实施方案中，所述高效液相色谱分离检测4,5,6,7-四氢噻吩[3,2-c]吡啶盐酸盐及其有关物质的方法包括如下步骤：1)配制样品溶液：取4,5,6,7-四氢噻吩[3,2-c]吡啶盐酸盐样品，用流动相溶解，配制成4,5,6,7-四氢噻吩[3，2-c]吡啶盐酸盐的浓度为0.2mg/ml的样品溶液；2)取10μl所述样品溶液注入高效液相色谱仪中，记录色谱图，完成所述4,5,6,7-四氢噻吩[3，2-c]吡啶盐酸盐样品的分离检测；其中，所述高效液相色谱仪的色谱条件为：色谱柱为WelchXB-C18(250mm×4.6mm，5μm)；流动相为体积比为9:10的乙腈与25mmol/L磷酸二氢钾缓冲溶液，其中，所述磷酸二氢钾缓冲溶液的pH为2.2；所述高效液相色谱仪的柱温为30℃本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种高效液相色谱分离检测4,5,6,7-四氢噻吩[3,2-c]吡啶盐酸盐及其有关物质的方法，其特征在于：以体积比为25:75-5:95的有机相及25mmol/L磷酸二氢钾缓冲溶液为流动相；所述有机相为甲醇或乙腈。/n

【技术特征摘要】
1.一种高效液相色谱分离检测4,5,6,7-四氢噻吩[3,2-c]吡啶盐酸盐及其有关物质的方法，其特征在于：以体积比为25:75-5:95的有机相及25mmol/L磷酸二氢钾缓冲溶液为流动相；所述有机相为甲醇或乙腈。


2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述有机相为乙腈。


3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述磷酸二氢钾缓冲溶液的pH为2-4。


4.根据权利要求1-3中任一项所述的方法，其特征在于：所述流动相的流速为0.2-1.0ml/min。


5.根据权利要求1-4中任一项所述的方法，其特征在于：所述高效液相色谱仪的色谱柱为WelchXB-C18(250mm×4.6mm，5μm)。


6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于：所述色谱柱的柱温为20-40℃。


7.根据权利要求1-6中任一项所述的方法，其特征在于：所述色谱图为在检测波长为210-240nm下记录的色谱图。


8.根据权利要求1-7中任一项所述的方法，其特征在于：...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵涛涛，黄婕，冯路平，王成，张伟，肖应国，张琦，
申请(专利权)人：武汉武药制药有限公司，
类型：发明
国别省市：湖北;42