一种藜芦酸四价铂及其制备方法和应用技术

本发明专利技术属于医药技术领域，具体涉及一种藜芦酸四价铂及其制备方法和应用，其结构式如下所示：

【技术实现步骤摘要】
一种藜芦酸四价铂及其制备方法和应用
本专利技术属于医药
，具体涉及一种藜芦酸四价铂及其制备方法和应用。
技术介绍
自从二价铂类抗癌药物顺铂批准进入临床应用，已经广泛用于多种癌症治疗，目前还是癌症治疗的一线药物。顺铂主要作用于DNA的鸟嘌呤N7位，通过与DNA交联形成成Pt-DNA加合物，影响DNA的复制和转录，最终诱导细胞凋亡。目前在临床使用过程中，铂类药物引起的毒副作用及肿瘤耐药性是限制铂类药物发展的关键问题。顺铂耐药的分子机制大体上分为四类：(1)靶点前耐药，与顺铂到达DNA之前的代谢程度相关，包括细胞内铂含量降低和胞内解毒，如谷胱甘肽等含硫蛋白增加；(2)靶点耐药，与顺铂DNA损伤的识别和修复相关；(3)靶点后耐药，与顺铂DNA损伤后效应相关；(4)非靶点耐药，与顺铂DNA靶点作用无直接关联。其中，靶点前耐药是引起顺铂类药物发生耐药的极其重要的原因：由于GSH等含硫蛋白对铂药的去活化作用，进入细胞浆中的二价顺铂分子中只有不到1％能进入细胞核并与细胞核中的DNA作用。四价铂配合物通过前药的方式发挥作用，同二价铂配合物相比，四价铂配合物呈八面体构型，具有取代惰性，使其具有良好的稳定性，减少与体内亲核物质的反应，能够相对完整的到达癌细胞，发挥抗癌作用。此外，四价铂配合物易于进行化学修饰，可在其轴向位置引入生物活性基团，协同增效，提高其抗癌活性。因此，四价铂前药是改善顺铂缺陷的一个理想选择。藜芦酸(Veratricacid)是从蔬菜和水果中得到的一种简单的苯甲酸，具有抗氧化、保护心血管和抗炎活性。研究表明藜芦酸能够抑制COX-2表达。COX-2是催化花生四烯酸生成各种前列腺素(prostaglandins，PGs)的关键酶，在多种肿瘤中表达并参与肿瘤耐药性的发生，降低化疗疗效。COX-2抑制剂与化疗药物联合应用后可通过降低多种肿瘤耐药蛋白的表达减少耐药性的产生，进而增强化疗药物对肿瘤的敏感性，增强化疗药物的疗效。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种对人体正常细胞杀伤作用小，高效低毒，对肿瘤细胞都有显著的抑制作用的藜芦酸四价铂，以解决上述
技术介绍
中提出的问题。为达到上述技术目的，本专利技术的技术方案：一种藜芦酸四价铂，结构式如下所示：本专利技术的另一目的在于提供一种藜芦酸四价铂的制备方法，包括以下步骤：(1)羟基铂的合成：称取顺铂，缓慢加入过氧化氢，避光，在40-100℃下加热回流1-24h，反应结束后，于0-10℃下静置析晶，离心，离心后的固体分别用蒸馏水、乙醇、乙醚各洗两次，干燥，得到淡黄色固体羟基铂；(2)藜芦酸铂的合成：称取所述羟基铂，加入DMF使溶解，再依次加入藜芦酸、三乙胺和TBTU，避光，氮气保护，常温搅拌至反应液澄清，向所述反应液中加入冰水，析出黄色沉淀；(3)苄达酸铂的纯化：所述黄色沉淀过硅胶柱纯化，用二氯甲烷与甲醇混合液进行梯度洗脱，得黄色固体苄达酸铂。作为一种改进，步骤(1)中，所述顺铂和所述过氧化氢的摩尔比为1:5-200。作为一种改进，步骤(1)中，所述过氧化氢的质量浓度为30％。作为一种改进，步骤(1)中，所述加热回流的温度优选为70℃、时间优选为5小时。作为一种改进，步骤(1)中，所述析晶的温度优选为4℃。作为一种改进，步骤(2)中，所述羟基铂：藜芦酸：三乙胺：TBTU摩尔比为1:3:3:3。作为一种改进，步骤(2)中常温搅拌的时间为12-96小时，优选为48小时。作为一种改进，步骤(3)中，所述二氯甲烷与甲醇的体积比为60:1。本专利技术的又一目的在于提供藜芦酸四价铂在制备抗癌、抗肿瘤药物中的应用。所述癌症或肿瘤包括但不限于非小细胞肺癌、宫颈癌、乳腺癌、咽鳞状癌。由于采用上述技术方案，本专利技术的有益效果：本专利技术提供的藜芦酸四价铂，属于四价铂前药，先将二价铂药顺铂氧化成四价铂配合物，四价铂配合物易于进行化学修饰，然后在其轴向位置引入具有协同增效作用的藜芦酸分子，得到藜芦酸双取代的四价铂抗肿瘤前药，协同增效，提高其抗癌活性。藜芦酸四价铂对多种人肿瘤细胞的增殖抑制活性高于临床抗癌药物顺铂及顺铂与藜芦酸联合给药，具有良好的选择性，同时对人体正常细胞杀伤作用小，高效低毒，具有较高药用价值。本专利技术的制备方法简单、成本低廉、产率高，易于工业化生产。采用顺铂为八面体底面，在轴向位置引入小分子靶向或药物活性基团，提供具有克服顺铂耐药的抗肿瘤四价铂配合物，以期获得高效低毒的四价铂药物。附图说明图1为藜芦酸四价铂的核磁共振氢谱图；图2为藜芦酸四价铂的核磁共振碳谱图；图3为藜芦酸四价铂的的质谱图。具体实施方式下面结合具体实施例，进一步阐述本专利技术。应理解，这些实施例仅用于说明本专利技术而不用于限制本专利技术的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件或按照制造厂商所建议的条件。除非另行定义，文中所使用的所有专业与科学用语与本领域熟练人员所熟悉的意义相同。此外，任何与所记载内容相似或均等的方法及材料皆可应用于本专利技术方法中。文中所述的较佳实施方法与材料仅作示范之用。下述实施例中所用的试剂、耗材等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。实施例1将200mg(0.67mmol)顺铂与2mL双氧水(过氧化氢含量30％wt)在70℃温度下回流5小时，反应结束后，将反应液静置于4℃条件下析出固体，离心，收集固体，将固体用蒸馏水、乙醇、乙醚依次各洗两次，干燥，得淡黄色固体产物189mg，产率为84.7％。通过红外光谱对上述淡黄色固体产物进行表征，得到如下数据：IR3461(s,OHstretch),1075(m,Pt-OHbend),539(m,Pt-N(O)stretch)。结果证实获得顺铂的氧化产物羟基铂(Oxoplatin)。将100mg(0.3mmol)羟基铂溶于2mLDMF，依次加入藜芦酸164mg(0.9mmol)，三乙胺130μL(0.9mmol)，TBTU288mg(0.9mmol)，氮气保护下常温搅拌48小时。反应液加入20mL冰水，析出淡黄色沉淀，淡黄色沉淀溶于甲醇后，经硅胶柱层析分离，洗脱液为二氯甲烷与甲醇混合溶剂，二氯甲烷与甲醇的体积比为20:1，洗脱后，得到淡黄色固体产物藜芦酸四价铂81mg。实施例2将200mg(0.67mmol)顺铂与0.35mL双氧水(过氧化氢含量30％)在40℃温度下回流20小时，反应结束后，将反应液静置于0℃条件下析出固体，离心，收集固体，将固体用蒸馏水、乙醇、乙醚依次各洗两次，干燥，得淡黄色固体产物191mg，产率为85.3％。将100mg(0.3mmol)羟基铂溶于2mLDMF，依次加入藜芦酸164mg(0.9mmol)，三乙胺130μL(0.9mmol)，TBTU288mg(0.9mmol)，氮气保护下常温搅拌24小时。反应液加入20mL冰水，析出淡黄色沉淀，淡黄色沉淀溶于甲醇后，经硅胶柱本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种藜芦酸四价铂，其特征在于，结构式如下所示：/n

【技术特征摘要】
1.一种藜芦酸四价铂，其特征在于，结构式如下所示：





2.权利要求1所述的藜芦酸四价铂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)羟基铂的合成：称取顺铂，缓慢加入过氧化氢，避光，在40-100℃下加热回流1-24h，反应结束后，于0-10℃下静置析晶，离心，离心后的固体分别用蒸馏水、乙醇、乙醚各洗两次，干燥，得到淡黄色固体羟基铂；
(2)藜芦酸四价铂的合成：称取所述羟基铂，加入DMF使溶解，再依次加入藜芦酸、三乙胺和TBTU，避光，氮气保护，常温搅拌至反应液澄清，向所述反应液中加入冰水，析出黄色沉淀；
(3)藜芦酸四价铂的纯化：所述黄色沉淀用甲醇溶解，过硅胶柱纯化，用二氯甲烷与甲醇混合液进行梯度洗脱，得黄色固体藜芦酸四价铂。


3.根据权利要求2所述的藜芦酸四价铂的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述顺铂和所述过氧化氢的摩尔比为1:5-200。


4....

【专利技术属性】
技术研发人员：王冬博，张荻，吴记勇，孙磊，聂晶，
申请(专利权)人：山东省第二人民医院山东省耳鼻喉医院，山东省耳鼻喉研究所，
类型：发明
国别省市：山东;37