一种石斛夜光丸的含量测定方法技术

本发明专利技术公开了一种石斛夜光丸的含量测定方法，该方法以柚皮苷、新橙皮苷、人参皂苷Rg

【技术实现步骤摘要】
一种石斛夜光丸的含量测定方法
本专利技术涉及中医药质量检测
，具体是一种石斛夜光丸的含量测定方法。
技术介绍
石斛夜光丸由石斛、人参、山药、茯苓、甘草、肉苁蓉、枸杞子、菟丝子、地黄、熟地黄、五味子、天冬、麦冬、苦杏仁、防风、川芎、麸炒枳壳、黄连、牛膝、菊花、盐蒺藜、青葙子、决明子、水牛角浓缩粉、山羊角等二十五味中药组成。除水牛角浓缩粉外，山羊角锉研成细粉，其余石斛等二十三味药材粉碎成细粉；将水牛角浓缩粉与上述粉末配研，过筛，混匀。每100g粉末用炼蜜35～50g加适量的水制丸，干燥，制成水蜜丸；或加炼蜜95～120g制成小蜜丸或大蜜丸，即得。石斛夜光丸具滋阴补肾、清肝明目之功效；临床用于肝肾两亏，阴虚火旺，内障目暗，视物昏花。石斛夜光丸现行标准【含量测定】控制的指标为黄连中的盐酸小檗碱，不能有效、整体性评价石斛夜光丸的质量。贾元印等人以北京、济南、广州等7个厂家石斛夜光丸为样品，用薄层扫描法测定样品中人参二醇及人参三醇的含量，建立了测定方法，为制定石斛夜光丸的质控标准提供了参考（贾元印,赵渤年,刘青,刘永俊.石斛夜光丸中人参二醇及人参三醇的含量测定.中国中药杂志,1995,20(12):732-735.）。但是由于薄层扫描法容易受温度、薄层板、点样量等因素影响，含量测定结果准确率不稳定，且人参的主要有效成分为人参皂苷，而该文章中是以人参皂苷的水解产物人参二醇及人参三醇为指标进行含量测定的，并试验了多种方法均显示由于成分干扰严重并不能直接测定样品中主要皂苷的含量，因此，其方法并不能准确反应石斛夜光丸中人参的真实质量，依然需要进行深入研究寻找到适用于建立石斛夜光丸含量检测标准的方法。
技术实现思路
本专利技术提供了一种石斛夜光丸的含量测定方法，本专利技术通过高效液相色谱法建立柚皮苷、新橙皮苷、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re与人参皂苷Rb1的含量测定方法，以考察石斛夜光丸中人参、麸炒枳壳的质量情况，能快速、准确地检查出企业是否存在不投料或少投料、伪劣药材投料的行为。一种石斛夜光丸的含量测定方法，具体步骤如下：（1）色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充柱；以乙腈为流动相A，以水为流动相B，按以下表1进行梯度洗脱；流速为1.0mL/min；用高温型蒸发光散射检测器检测，理论板数按人参皂苷Rg1峰计算应不低于3000。（2）混合对照品溶液制备：精密称取柚皮苷、新橙皮苷、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re与人参皂苷Rb1适量，加70%甲醇制成每1mL含柚皮苷与新橙皮苷各0.5mg、人参皂苷Rg1与人参皂苷Re各0.1mg、人参皂苷Rb10.2mg的混合对照品溶液。（3）供试品溶液的制备：取石斛夜光丸水蜜丸，研碎，取6g；或取石斛夜光丸小蜜丸或大蜜丸，剪碎，取9g；精密称定，置具塞锥形瓶中，加入体积浓度为70%的甲醇溶液100mL，称定重量，加热回流1h，取出，放冷，再称定重量，用体积浓度为70%的甲醇溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，精密吸取续滤液50mL，蒸干，残渣加水20mL使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取4次，每次25mL，取正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇溶解并转移至5mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。（4）测定：分别精密吸取混合对照品溶液5μL、15μL，供试品溶液10μL，注入液相色谱仪，测定，以外标两点法对数方程计算含量。以上所述石斛夜光丸中含麸炒枳壳以柚皮苷（C27H32O14）和新橙皮苷（C28H34O15）计，水蜜丸含柚皮苷每1g不得少于0.42mg，含新橙皮苷每1g不得少于0.31mg；小蜜丸含柚皮苷每1g不得少于0.28mg，含新橙皮苷每1g不得少于0.21mg；大蜜丸含柚皮苷每丸不得少于1.57mg，含新橙皮苷每丸不得少于1.18mg；含人参以人参皂苷Rg1(C42H72O14)、人参皂苷Re(C48H82O18)、人参皂苷Rb1(C54H92023)计，水蜜丸含人参皂苷Rg1和人参皂苷Re的总量每1g不得少于0.13mg，含人参皂苷Rb1每1g不得少于0.084mg；小蜜丸含人参皂苷Rg1和人参皂苷Re的总量每1g不得少于0.086mg，含人参皂苷Rb1每1g不得少于0.057mg；大蜜丸含人参皂苷Rg1和人参皂苷Re的总量每丸不得少于0.47mg，含人参皂苷Rb1每丸不得少于0.31mg。本专利技术的有益效果：本专利技术通过高效液相色谱法建立柚皮苷、新橙皮苷、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re与人参皂苷Rb1的含量测定方法，以考察石斛夜光丸中人参、麸炒枳壳的质量情况，能快速、准确地检查出企业是否存在不投料或少投料、伪劣药材投料的行为。而且在本专利技术的含量测定方法中，采用高温型蒸发光散射检测器进行检测，干扰峰较小，人参皂苷Rg1、人参皂苷Re与人参皂苷Rb1响应值较高，分离度好。通过增加本专利技术的含量测定方法作为石斛夜光丸现行标准【含量测定】的补充，可以使石斛夜光丸的评价标准更为全面，能有效确保石斛夜光丸用药安全，减少不投料或掺伪投料的现象，为石斛夜光丸的质量标准研究及其质量控制提供科学依据。附图说明图1是混合对照品溶液的高效液相色谱图。图2是石斛夜光丸样品（B制药厂，批号18013508）的高效液相色谱图。图3是石斛夜光丸样品（I公司，批号191004）的高效液相色谱图。图4是石斛夜光丸样品（N公司，批号191001）的高效液相色谱图。图5是石斛夜光丸缺人参阴性样品的的高效液相色谱图。图6是石斛夜光丸缺麸炒枳壳阴性样品的高效液相色谱图。具体实施方式为了更加详细的介绍本专利技术，下面结合实施例，对本专利技术做进一步说明。实施例仪器与试药：Waters高效液相色谱仪，高温型蒸发光散射检测器；ML204型电子分析天平（梅特勒-托利多仪器上海有限公司）。柚皮苷（中国食品药品检定研究院提供，供含测用，批号：110722-201815，含量91.7%）新橙皮苷（中国食品药品检定研究院提供，供含测用，批号：11857-201804，含量99.4%）人参皂苷Rg1（中国食品药品检定研究院提供，供含测用，批号：110703-201933，含量93.4%）人参皂苷Re（中国食品药品检定研究院提供，供含测用，批号：110754-202028，含量93.9%）人参皂苷Rb1（中国食品药品检定研究院提供，供含测用，批号：110704-202028，含量93.1%）乙腈为色谱纯，其他试剂均为分析纯。91批石斛夜光丸（其中74批为水蜜丸，15批为大蜜丸，2批为小蜜丸）均为2020年国家评价性抽验的样品。方法考察所用石斛夜光丸（水蜜丸）为R公司，批号：1904030；石斛夜光丸（大蜜丸）为B制药厂，批号：18013507。一种石斛夜光丸的含量测定方法，具体步骤如下：（1）色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充柱；以乙腈为流动相A，以水为流动相B，按以下表1进行梯度洗脱本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种石斛夜光丸的含量测定方法，其特征在于，所述方法的具体步骤如下：/n（1）色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充柱；以乙腈为流动相A，以水为流动相B，进行梯度洗脱；洗脱程序为：0～25min，14%A，25～45min，14%→20%A，45～63min，20%→24%A，63～70min，24%→28%A，70～82min，28%→33%A，82～95min，33%A，95～102min，33%→38%A，102～105min，38%A；流速为1.0mL/min；用高温型蒸发光散射检测器检测，理论板数按人参皂苷Rg

【技术特征摘要】
1.一种石斛夜光丸的含量测定方法，其特征在于，所述方法的具体步骤如下：
（1）色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充柱；以乙腈为流动相A，以水为流动相B，进行梯度洗脱；洗脱程序为：0～25min，14%A，25～45min，14%→20%A，45～63min，20%→24%A，63～70min，24%→28%A，70～82min，28%→33%A，82～95min，33%A，95～102min，33%→38%A，102～105min，38%A；流速为1.0mL/min；用高温型蒸发光散射检测器检测，理论板数按人参皂苷Rg1峰计算应不低于3000；
（2）混合对照品溶液制备：精密称取柚皮苷、新橙皮苷、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re与人参皂苷Rb1适量，加入体积浓度为70%的甲醇制成每1mL含柚皮苷与新橙皮苷各0.5mg、人参皂苷Rg1与人参皂苷Re各0.1mg、人参皂苷Rb10.2mg的混合对照品溶液；
（3）供试品溶液的制备：取石斛夜光丸水蜜丸，研碎，取约6g；或取石斛夜光丸小蜜丸或大蜜丸，剪碎，取约9g；精密称定，置具塞锥形瓶中，加入体积浓度为70%的甲醇溶液100mL，称定重量，加热回流1h，取出，放冷，再称定重量，用体积浓度为70%的甲醇溶液补足减失的重量，...

【专利技术属性】
技术研发人员：甘勇强，吕轶峰，林敬开，文丽，李丽莉，
申请(专利权)人：广西壮族自治区食品药品检验所，
类型：发明
国别省市：广西;45