一种茶叶和茶汤中螺螨酯残留分析测定方法技术

一种茶叶和茶汤中螺螨酯残留分析测定方法，属于茶叶杀螨剂残留检测技术领域。包括1）茶鲜叶、绿茶/红茶样品：1%甲酸水浸泡，加入1‑5%甲酸乙腈或乙酸乙腈提取，再加入NaCl，离心后，取出上清液，残渣再加入1‑5%甲酸乙腈或乙酸乙腈重复提取，合并上清液浓缩至干，甲酸乙腈复溶后转移至装有C

【技术实现步骤摘要】
一种茶叶和茶汤中螺螨酯残留分析测定方法
本专利技术属于茶叶杀螨剂残留检测
，具体涉及一种茶叶和茶汤中螺螨酯残留分析测定方法。
技术介绍
螺螨酯（Spirodiclofen，C21H24Cl2O4，CASNO.148477-71-8，化学结构式见图1），商品名为螨危，是德国拜耳作物科学公司研制并在1993年申请专利的一种具有季酮酸新颖化学结构的高效低毒的非内吸性杀螨剂，其作用机制是通过抑制害螨体内的脂肪合成，破坏害螨的能量代谢活动，最终杀死害螨，主要用于防治柑橘类植物、葡萄、梨果、核果、坚果等植物上的害螨。目前，螺螨酯已经在世界上近50个国家取得登记和上市，自2004年在我国柑橘上取得临时登记以来，现已被我国登记用于冬枣、柑橘树、观赏月季、棉花、苹果树、蔷薇科观赏花卉、樱桃等作物，并且针对其在油料和油脂、蔬菜、水果、坚果、饮料等食品中制定了最大残留限量值，在0.004mg/kg~40mg/kg之间。但目前国内外对螺螨酯的研究主要在对其原药及制剂分析和田间药效上，而对其在作物上的残留降解研究较少，集中在柑橘类、苹果、枸杞和火龙果等，常用的残留分析方法包括气相色谱法、液相色谱法和气相色谱–质谱联用法等。茶叶是一种重要的经济作物，化学农药的使用有助于防治茶树病虫害，从而提高茶叶产量、增加农民收入。然而，农药的不合理使用引起的残留问题也受到越来越多的关注。近年来，我国茶园主要登记使用有苦参碱、矿物油和石硫合剂来防治茶毛虫、茶橙瘿螨、叶螨和红蜘蛛等。有研究表明，24%螨危（螺螨酯）悬浮剂采用3000～5000倍液防治茶橙瘿螨，药后1d的防治效果即达81.08%～99.37%，药后15d防治效果达100%，速效性和持效性均较好，可作为茶园替代农药用于防治茶橙瘿螨来减少现有农药的抗性。然而，目前国内外未见到专门针对茶叶和茶汤中螺螨酯的残留分析的方法报道。虽然现有技术中公开了螺螨酯在柑橘和土壤等中的残留分析，同样采用液相色谱质谱检测，但条件不同，与本申请区别在于：本申请进行了前处理优化和液相质谱条件改进，涉及到的样本处理基质也更复杂。
技术实现思路
针对上述现有技术中存在的缺陷，本专利技术的目的在于设计提供一种茶叶和茶汤中螺螨酯残留分析测定方法。本方法在茶鲜叶、红茶和绿茶、红茶汤和绿茶汤中的定量限（LOQs）分别为0.002mg/kg、0.005mg/kg和0.0002mg/L，满足残留分析的要求，能够用于茶叶和茶汤中螺螨酯残留检测的需要。本申请中茶鲜叶是指直接从茶树上采摘的叶片；红茶、绿茶是指经过加工的茶叶。一种茶叶和茶汤中螺螨酯残留分析测定方法，其特征在于包括以下步骤：1）茶鲜叶、绿茶、红茶样品：称取样品于离心管中，加入1%甲酸水涡旋混匀，静置，加入1-5%甲酸乙腈或乙酸乙腈，涡旋混匀，静置后均质，加入NaCl，振荡后超声，再离心取出上清液，残渣再加入1-5%甲酸乙腈或乙酸乙腈重复提取一次，合并两次上清液，浓缩至干后，用1-5%甲酸乙腈或乙酸乙腈超声复溶，转移至装有C18、GCB、MgSO4的离心管中，涡旋混匀后振荡，再离心，取上清液浓缩至干，乙腈定容，过0.22µm滤膜，备用；或2）茶汤样品：茶水冲泡后，双层滤纸过滤得到茶汤样品，量取茶汤置于离心管中，加入1-5%甲酸乙腈或乙酸乙腈，涡旋混匀，加入NaCl，振荡后离心，取上层清液于烧瓶中，下层再加入1-5%甲酸乙腈或乙酸乙腈重复提取一次，转移合并两次上清液，浓缩至干，乙腈定容，过0.22µm滤膜，备用；3）超高效液相色谱-串联质谱基质外标法测定。所述的一种茶叶和茶汤中螺螨酯残留分析测定方法，其特征在于所述步骤1）中当样品是茶鲜叶时，1%甲酸水与茶鲜叶的体积质量比为2：1mL/g；第一次和第二次1-5%甲酸乙腈或乙酸乙腈加入量与茶鲜叶的体积质量比为4：1mL/g；用1-5%甲酸乙腈或乙酸乙腈超声复溶时加入量与茶鲜叶的体积质量比为2：1mL/g。所述的一种茶叶和茶汤中螺螨酯残留分析测定方法，其特征在于所述步骤1）中当样品是绿茶/红茶时，1%甲酸水与绿茶/红茶的体积质量比为5：1mL/g；第一次和第二次1-5%甲酸乙腈或乙酸乙腈加入量与绿茶/红茶的体积质量比为5：1mL/g；用1-5%甲酸乙腈或乙酸乙腈超声复溶时加入量与绿茶/红茶的体积质量比为5：1mL/g。所述的一种茶叶和茶汤中螺螨酯残留分析测定方法，其特征在于所述步骤1）中加入1%甲酸水涡旋混匀后静置30min；所述加入1-5%甲酸乙腈或乙酸乙腈后涡旋混匀，静置2h后均质1-3min；所述加入NaCl后震荡5min，超声10min，7500r/min下离心5min；所述浓缩至干过程中温度均为42℃；所述超声复溶后将溶液于4000r/min下离心5min，取上清液至离心管中，涡旋混匀2min，振荡5min，12000r/min下离心5min。所述的一种茶叶和茶汤中螺螨酯残留分析测定方法，其特征在于所述步骤1）中乙腈定容的加入量为1mL。所述的一种茶叶和茶汤中螺螨酯残留分析测定方法，其特征在于所述步骤1）中装有C18、GCB、MgSO4的离心管中C18200mg、GCB50mg、MgSO4200mg。所述的一种茶叶和茶汤中螺螨酯残留分析测定方法，其特征在于所述步骤2）中茶水的茶与水的质量比为1：50，水温100℃冲泡10min；所述茶汤与1-5%甲酸乙腈或乙酸乙腈的体积比为1：1；所述NaCl与茶汤的质量体积比为8：25g/mL；所述振荡5min，离心条件为7500r/min下离心5min；所述乙腈定容加入量为1mL。所述的一种茶叶和茶汤中螺螨酯残留分析测定方法，其特征在于所述1-5%甲酸乙腈或乙酸乙腈优选为1%甲酸乙腈。所述的一种茶叶和茶汤中螺螨酯残留分析测定方法，其特征在于所述步骤3）中色谱条件为：AcquityUPLCBEHC18色谱柱100mm×2.1mm×1.7µm；柱温40℃；进样量5µL；流动相A：0.1%甲酸乙腈溶液；流动相B：10mmol/L乙酸铵水溶液。梯度洗脱程序见表1，螺螨酯的保留时间为7.49min。所述的一种茶叶和茶汤中螺螨酯残留分析测定方法，其特征在于所述步骤3）中质谱条件为：电喷雾正电离多反应监测模式ESI+-MRM；喷雾毛细管电压3.5kV；离子源温度150℃；脱溶剂气N2温度350℃，流速750L/h；锥孔反吹气N2流速50L/h；碰撞气Ar流速0.25mL/min；电子倍增器倍增电压700V。螺螨酯二级质谱参数见表1。本专利技术方法利用优化好的QuEChERS前处理方法，结合超高效液相色谱-串联质谱（UPLC-MS/MS）检测，从而为后续研究螺螨酯在茶叶生长加工和冲泡过程中的残留迁移降解规律，进行膳食风险评估，指导在茶园中合理使用螺螨酯，并科学制定茶叶中螺螨酯最大残留限量标准。在茶鲜叶、红茶和绿茶、红茶汤和绿茶汤中的定量限（LOQs）分别为0.002mg/kg、0.005mg/kg和0.0002mg/L，方法满足残留分析的要求，能够用于茶叶和茶汤中螺螨酯残留检测的需要。附图说明...

【技术保护点】
1.一种茶叶和茶汤中螺螨酯残留分析测定方法，其特征在于包括以下步骤：/n1）茶鲜叶、绿茶、红茶样品：称取样品于离心管中，加入1%甲酸水涡旋混匀，静置，加入1-5%甲酸乙腈或乙酸乙腈，涡旋混匀，静置后均质，加入NaCl，振荡后超声，再离心取出上清液，残渣再加入1-5%甲酸乙腈或乙酸乙腈重复提取一次，合并两次上清液，浓缩至干后，用1-5%甲酸乙腈或乙酸乙腈超声复溶，转移至装有C

【技术特征摘要】
1.一种茶叶和茶汤中螺螨酯残留分析测定方法，其特征在于包括以下步骤：
1）茶鲜叶、绿茶、红茶样品：称取样品于离心管中，加入1%甲酸水涡旋混匀，静置，加入1-5%甲酸乙腈或乙酸乙腈，涡旋混匀，静置后均质，加入NaCl，振荡后超声，再离心取出上清液，残渣再加入1-5%甲酸乙腈或乙酸乙腈重复提取一次，合并两次上清液，浓缩至干后，用1-5%甲酸乙腈或乙酸乙腈超声复溶，转移至装有C18、GCB、MgSO4的离心管中，涡旋混匀后振荡，再离心，取上清液浓缩至干，乙腈定容，过0.22µm滤膜，备用；
或2）茶汤样品：茶水冲泡后，双层滤纸过滤得到茶汤样品，量取茶汤置于离心管中，加入1-5%甲酸乙腈或乙酸乙腈，涡旋混匀，加入NaCl，振荡后离心，取上层清液于烧瓶中，下层再加入1-5%甲酸乙腈或乙酸乙腈重复提取一次，转移合并两次上清液，浓缩至干，乙腈定容，过0.22µm滤膜，备用；
3）超高效液相色谱-串联质谱基质外标法测定。


2.如权利要求1所述的一种茶叶和茶汤中螺螨酯残留分析测定方法，其特征在于所述步骤1）中当样品是茶鲜叶时，1%甲酸水与茶鲜叶的体积质量比为2：1mL/g；第一次和第二次1-5%甲酸乙腈或乙酸乙腈加入量与茶鲜叶的体积质量比为4：1mL/g；用1-5%甲酸乙腈或乙酸乙腈超声复溶时加入量与茶鲜叶的体积质量比为2：1mL/g。


3.如权利要求1所述的一种茶叶和茶汤中螺螨酯残留分析测定方法，其特征在于所述步骤1）中当样品是绿茶/红茶时，1%甲酸水与绿茶/红茶的体积质量比为5：1mL/g；第一次和第二次1-5%甲酸乙腈或乙酸乙腈加入量与绿茶/红茶的体积质量比为5：1mL/g；用1-5%甲酸乙腈或乙酸乙腈超声复溶时加入量与绿茶/红茶的体积质量比为5：1mL/g。


4.如权利要求1所述的一种茶叶和茶汤中螺螨酯残留分析测定方法，其特征在于所述步骤1）中加入1%甲酸水涡旋混匀后静置30min；所述加入1-5%甲酸乙腈或乙酸乙腈后涡旋混匀，静置2h后均质1-3min；所述加入NaCl后震荡5min，超声10min，7500...

【专利技术属性】
技术研发人员：张新忠，黎洪霞，罗逢健，
申请(专利权)人：中国农业科学院茶叶研究所，
类型：发明
国别省市：浙江;33