MDM2抑制剂在调控结肠癌化疗药物敏感性中的应用制造技术

本发明专利技术涉及MDM2抑制剂在调控结肠癌化疗药物敏感性中的应用。本发明专利技术所述MDM2抑制剂为Nutlin‑3a，本发明专利技术通过实验证明，将Nutlin‑3a与5‑FU或TRAIL联合使用，可以显著增加结肠癌细胞对5‑FU、重组人TRAIL的敏感性，具有协同增效的效果。Nutlin‑3a与5‑FU或TRAIL联合使用后显著抑制结肠癌细胞的增殖，诱导细胞凋亡；且联合用药能够显著抑制裸鼠皮下瘤模型的生长。本发明专利技术提供了Nutlin‑3a和5‑FU以及Nutlin‑3a和TRAIL联合用药治疗结肠癌的一种新方案，具有推动肿瘤临床治疗的巨大开发潜力和应用前景。

【技术实现步骤摘要】
MDM2抑制剂在调控结肠癌化疗药物敏感性中的应用
本专利技术涉及生物医药
，具体涉及MDM2抑制剂与结肠癌化疗药物联合使用，用于增加结肠癌化疗敏感性。
技术介绍
结直肠癌(colorectalcancer,CRC)是一种常见的胃肠道恶性肿瘤，是造成人类癌症相关死亡的第二大原因。目前对于结直肠癌的治疗仍以手术结合放化疗的方案为主，其中辅助化疗的敏感性是影响患者生存期的主要因素之一。研究显示，大多数患者在各种辅助化疗后3-12个月就会出现药物敏感性低、化疗耐受等现象。因此迫切需要寻找和补充新的更有效的克服耐药策略，从而实现更好的治疗效果。MDM2(murinedoubleminute2，鼠双微体基因2)MDM2是一种E3泛素连接酶，通过与靶蛋白结合对其进行泛素化修饰介导蛋白质的降解，从而参与多种细胞生物学行为的调控。当细胞中MDM2高表达时，p53活性受到强烈抑制，导致p53无法发挥作用，造成细胞持续增殖从而诱导肿瘤的发生。对此，人们研发了多种MDM2抑制剂，其中Nutlin-3a是研究最为深入和广泛的一个靶向MDM2-p53相互作用的小分子抑制剂。5-氟脲嘧啶(5-Fluorouracil,5-FU)作为胃肠道恶性肿瘤的一线治疗药物，单药或联合用药在结直肠癌的临床治疗中取得良好效果。然而，5-FU治疗的临床获益往往是短暂的，使用5-FU的患者易对其产生耐药性而使得总体有效率较低，大大降低化疗效果。肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(tumornecrosisfactorrelatedapoptosisinducingligand,TRAIL)能够选择性地诱导肿瘤细胞凋亡而对正常细胞无毒性作用，具有极大的临床应用前景。然而，相当多的肿瘤细胞对TRAIL具耐药阻碍了TRAIL的应用。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供临床治疗结肠癌的新的用药趋势。专利技术人在临床实践中，发现MDM2抑制剂可改善结肠癌化疗药物的敏感性。在同等浓度下，将MDM2抑制剂与结肠癌化疗药物(5-FU及TRAIL)联合使用，可增强化疗药物对肿瘤细胞的抑制能力。第一方面，本专利技术提供MDM2抑制剂在调控结肠癌对化疗药物敏感性中的应用。第二方面，本专利技术提供MDM2抑制剂在制备提高结肠癌对化疗药物敏感性药物中的应用。所述MDM2抑制剂可用于制备提高结肠癌对TRAIL敏感性的药物；所述MDM2抑制剂用于制备提高结肠癌对5-氟脲嘧啶敏感性的药物。在本专利技术所提供的应用中，Nutlin-3a通过诱导内质网应激从而增加结肠癌化疗敏感性，或Nutlin-3a通过诱导自噬增加结肠癌化疗敏感性。第三方面，本专利技术提供一种组合物在制备治疗结肠癌药物中的应用，所述组合物包含MDM2抑制剂、5-氟脲嘧啶和/或肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)；在本专利技术所提供的药物组合物中，所述MDM2抑制剂为Nutlin-3a。本专利技术提供的组合物，可抑制结肠癌细胞的生长、增殖或克隆；也可诱导结肠癌细胞的凋亡。本专利技术提供的组合物，可抑制人结肠癌细胞RKO或人结肠癌细胞HCT116的生长、增殖或克隆；或抑制裸鼠结肠癌皮下实体瘤的生长。第四方面，本专利技术还提供上述应用在制备提高结肠癌治疗效果的药物中的应用。具体地，为了制备提高结肠癌治疗效果的药物，将MDM2抑制剂与5-氟脲嘧啶或肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体联合使用。本专利技术的有益效果至少在于：(1)本专利技术通过实验证明，将Nutlin-3a和5-FU联合使用，可以显著增强5-FU的治疗效果；将Nutlin-3a和TRAIL联合使用，可以显著增强TRAIL的治疗效果，联合使用后显著抑制结肠癌细胞的生长、增殖，诱导结肠癌细胞的凋亡；(2)本专利技术通过体外实验证实，将Nutlin-3a和5-FU联合使用或Nutlin-3a和TRAIL联合使用增强了裸鼠皮下瘤模型中的抗肿瘤效果，实现了协同增效的作用；(3)本专利技术提供的Nutlin-3a和5-FU联用以及Nutlin-3a和TRAIL联合用药治疗结肠癌的新方案，为结肠癌的治疗提供了一种新的治疗药物和治疗途径，解决了临床治疗中结直肠癌患者经常发生化疗敏感性差的问题，还为MDM2抑制剂Nutlin-3a的应用提供了新的领域。附图说明图1为实施例1中不同浓度Nutlin-3a处理下的人结肠癌细胞存活率图。图2为实施例1中不同浓度Nutlin-3a处理下的人结肠癌细胞克隆形成图。图3为实施例1中不同浓度Nutlin-3a处理下的人结肠癌细胞凋亡情况图。图4为实施例1中不同浓度Nutlin-3a处理人结肠癌细胞后的凋亡相关蛋白cleaved-caspase-3的Westernblotting结果图。图5为实施例2中应用CompuSyn软件分析得到的RKO细胞各联合实验组的联合指数CI图。图6为实施例2中应用CompuSyn软件分析得到的HCT116细胞各联合实验组的联合指数CI图。图7为实施例2中Nutlin-3a单独用药或联合5-FU或联合TRAIL处理时，人结肠癌RKO细胞中凋亡相关蛋白cleavedcaspase-3的Westernblotting结果图。图8为实施例2中Nutlin-3a单独用药或联合5-FU或联合TRAIL处理时，人结肠癌HCT116细胞中凋亡相关蛋白cleavedcaspase-3的Westernblotting结果图。图9为实施例2中MDM2抑制剂Nutlin-3a单独用药或联合5-FU或联合TRAIL处理下的结肠癌细胞RKO细胞凋亡情况图。图10为实施例2中MDM2抑制剂Nutlin-3a单独用药或联合5-FU或联合TRAIL处理下的结肠癌细胞HCT116细胞凋亡情况图。图11为实施例3中Nutlin-3a单独用药或分别与5-FU、TRAIL联合用药处理下，结肠癌细胞增殖情况图。图12为实施例3中Nutlin-3a单独用药或分别与5-FU、TRAIL联合用药处理下，结肠癌细胞成瘤图。图13为实施例3中Nutlin-3a单独用药或分别与5-FU、TRAIL联合用药处理下裸鼠皮下结肠癌模型实体瘤TUNEL检测凋亡情况图，图示标尺为100μm。具体实施方式以下实施例用于说明本专利技术，但不用来限制本专利技术的范围。下面结合具体实施例对本申请作出详细说明。本专利技术使用针对于MDM2的小分子抑制剂Nutlin-3a以及化疗药物5-FU以及TRAIL，以下所述实施例中所使用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径获得，这些实施例仅用于说明本专利技术而不用于限制本专利技术的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件或按照制造厂商所建议的条件。本专利技术具体实施例中主要说明Nutlin-3a能够增强结肠癌细胞对化疗药物5-FU以及TRAIL的敏感性，为临床癌症治疗提供新型的药物联合使用的范例。本专利技术进行实验所要用到的材料与试剂：细胞来源：人源结肠癌细胞本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.MDM2抑制剂在调控结肠癌对化疗药物敏感性中的应用。/n

【技术特征摘要】
1.MDM2抑制剂在调控结肠癌对化疗药物敏感性中的应用。


2.MDM2抑制剂在制备提高结肠癌化疗药物敏感性的药物中的应用。


3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述结肠癌化疗药物为TRAIL和/或5-氟脲嘧啶。


4.一种组合物在制备治疗结肠癌药物中的应用，其特征在于，所述组合物包含MDM2抑制剂和5-氟脲嘧啶和/或TRAIL。


5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述MDM2抑制剂为Nutlin-3a。


6.根据权利要求5所...

【专利技术属性】
技术研发人员：钟加滕，陆漫漫，李娜，胡育菡，朱会芳，苏蔚，贾慧婕，王翠玲，
申请(专利权)人：新乡医学院，
类型：发明
国别省市：河南;41