2-O-α-D-吡喃型葡萄糖基-L-抗坏血酸的生产方法技术

本发明专利技术涉及一种2

【技术实现步骤摘要】
2
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O
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α
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D
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吡喃型葡萄糖基
‑
L
‑
抗坏血酸的生产方法


[0001]本专利技术涉及一种2
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O
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α
‑
D
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吡喃型葡萄糖基
‑
L
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抗坏血酸的生产方法，属于L
‑
抗坏血酸衍生物制备


技术介绍

[0002]2‑
O
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α
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D
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吡喃型葡萄糖基
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L
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抗坏血酸又名维生素C葡萄糖苷(缩写AA
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2G)。L
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抗坏血酸(VC)2位C上的羟基被吡喃型葡萄糖苷取代，由于2位C上有葡萄糖基掩蔽，因此相较于VC而言，AA
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2G非常稳定且具有显著的非还原活性。AA
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2G计入细胞后可水解为VC和葡萄糖，具有同原始VC一样的抗氧化性和美白作用。因此，AA
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2G是卫生署认可的6种美白添加剂之一，广泛应用于多种高端美白化妆品中。目前，国际上应用于美白化妆品的AA
‑
2G被日本林原国际有限公司垄断，其售价高达3000元/kg。
[0003]利用糖基转移酶的转糖基的特异性进行生物转化合成是目前AA
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2G的唯一生产途径，主要包括制备、纯化及结晶三大工艺。目前，已知的AA
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2G的合成方法是以淀粉及L
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抗坏血酸为原料，经糖基转移酶催化，反应温度为60
‑
65℃，反应时间为30
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48h，AA
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2G的转化率为35
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40％，转化率偏低。
[0004]专利CN109295134A公开了一种高含量、高收率L
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抗坏血酸葡萄糖苷的生产方法，其基本思路是利用环麦芽糊精葡萄糖苷转移酶制备AA
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2G，但该方法制备的AA
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2G中含有具有直接还原特性的同分异构体5
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O
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α
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D
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吡喃型葡萄糖基
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L
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抗坏血酸(缩写为AA
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5G)和6
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O
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α
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D
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吡喃型葡萄糖基
‑
L
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抗坏血酸(缩写为AA
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6G)，后期需要进行分离纯化才能获得纯度较高的产品，工艺复杂。

技术实现思路

[0005]为了克服现有技术的不足，本专利技术提供了一种2
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O
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α
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D
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吡喃型葡萄糖基
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L
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抗坏血酸的生产方法，其简化了生产工艺，提高了2
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O
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α
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D
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吡喃型葡萄糖基
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L
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抗坏血酸的纯度和转化率。
[0006]本专利技术所述的2
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O
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α
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D
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吡喃型葡萄糖基
‑
L
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抗坏血酸的生产方法，包括以下步骤：
[0007](1)合成反应：将VC加入到35
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45℃水中溶解，然后加入葡萄糖基供体，保持温度搅拌30
‑
40min，调节pH值为5.0
‑
5.5，加入糖基转移酶，搅拌均匀，得到反应溶液；
[0008]将反应溶液温度升高至45
‑
50℃，保持温度反应40
‑
50分钟后，停止加热，降温，当反应溶液温度降低至25
‑
30℃时，开启加热，将反应溶液温度升高至45
‑
50℃，再停止加热，降温，如此往复，反应20
‑
30小时，得到合成液；
[0009](2)纯化：合成液温度降至25
‑
35℃后加入α
‑
淀粉酶，搅拌40
‑
50min；然后加入活性炭，搅拌30
‑
40min，过滤；
[0010]滤液经强酸性阳离子交换树脂柱纯化；纯化时流速为1.5～3cm/s。
[0011](3)冷冻干燥：步骤(2)所得滤液经超滤、纳滤，然后浓缩至2
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O
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α
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D
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吡喃型葡萄糖基
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L
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抗坏血酸质量含量为50％，冻干、粉碎、过筛、分装得到2
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O
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α
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D
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吡喃型葡萄糖基
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L
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抗坏血酸。
[0012]优选的，糖基转移酶为α
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异麦芽糖基葡糖基糖形成酶和/或环麦芽糊精葡聚糖转移酶。
[0013]优选的，强酸性阳离子交换树脂是苯乙烯
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二乙烯基苯共聚物为基体的磺酸基阳离子交换树脂。
[0014]优选的，VC、水、葡萄糖供体、糖基转移酶的质量配比为1～1.2：80～100:0.8～1.1:0.5～0.8。
[0015]本专利技术以VC和水为底物，加入葡萄糖基供体，并调节pH后，加入糖基转移酶，糖基转移酶为α
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异麦芽糖基葡糖基糖形成酶和/或环麦芽糊精葡聚糖转移酶，得到反应溶液，反应合成后，经超滤、纳滤，然后浓缩、冻干、粉碎、过筛、分装，得到2
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O
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α
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D
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吡喃型葡萄糖基
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L
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抗坏血酸。而黄敏老师的论文《生物转化法生产2
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O
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α
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D
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吡喃型葡萄糖基
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L
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抗坏血酸的研究进展》中，是将VC溶于醋酸缓冲液中，与适当的糖类混合，加入硫脲，并调节pH值及反应温度，后进行反应。两者具有显著的区别，本专利技术应用的α
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异麦芽糖基葡糖基糖形成酶和/或环麦芽糊精葡聚糖转移酶在适宜的温度和pH条件下可以更有效的催化反应物中C键的断开，从而提高转化率和含量。
[0016]与专利CN109295134A相比，本专利技术在制备、纯化、分离工艺方面更简便。另外，本专利技术使用的糖基转移酶不同，通过不同的转移酶及更适合该转移酶的温度及pH环境，降低生产成本并提高转化率；加入活性炭吸收反应的副产物，使得到本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种2
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O
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α
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D
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吡喃型葡萄糖基
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L
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抗坏血酸的生产方法，其特征在于：包括以下步骤：(1)合成反应：将VC加入到水中溶解，然后加入葡萄糖基供体，保持温度搅拌，调节pH值为5.0
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5.5，加入糖基转移酶，搅拌，得到反应溶液；将反应溶液温度升高至45
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50℃，保持温度反应40
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50分钟后，停止加热，降温，当反应溶液温度降低至25
‑
30℃时，开启加热，将反应溶液温度升高至45
‑
50℃，再停止加热，降温，如此往复，反应20
‑
30小时，得到合成液；(2)纯化：合成液温度降至25
‑
35℃后加入α
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淀粉酶，搅拌；然后加入活性炭，搅拌、过滤；滤液经强酸性阳离子交换树脂柱纯化；(3)冷冻干燥：步骤(2)所得滤液经超滤、纳滤，然后浓缩、冻干、粉碎、过筛、分装，得到2
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O
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α
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D
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吡喃型葡萄糖基
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L
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抗坏血酸。2.根据权利要求1所述的2
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O
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α
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D
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吡喃型葡萄糖基
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L
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抗坏血酸的生产方法，其特征在于：糖基转移酶为α
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异麦芽糖基葡糖基糖形成酶和/或环麦芽糊精葡聚糖转移酶。3.根据权利要求1所述的2
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O
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α
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D
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吡喃型葡萄糖基
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L
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抗坏血酸的生产方法，其特征在于：强酸性阳离子交换树脂为苯乙烯
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二乙烯基苯共聚物为基体的磺酸基阳离子交换树脂。4.根据权利要求1所述的2
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O
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α
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D
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吡喃...

【专利技术属性】
技术研发人员：虞龙，冯帅，李远辉，宋元达，冯春晓，王彦梅，韩雪纯，王红卫，卞金达，
申请(专利权)人：山东鲁维制药有限公司，
类型：发明
国别省市：