一种血清代谢物用于制备诊断干燥综合征的试剂盒的用途制造技术

本发明专利技术公开了一种血清代谢物用于制备诊断干燥综合征的试剂盒的用途。本发明专利技术提供的血清代谢物beta

【技术实现步骤摘要】
一种血清代谢物用于制备诊断干燥综合征的试剂盒的用途


[0001]本专利技术属于疾病诊断领域，涉及疾病诊断标志物的发现和应用，具体涉及一种血清代谢物用于制备诊断干燥综合征的试剂盒的用途。

技术介绍

[0002]干燥综合征(Sjogren
’
s syndrome，SS)是一种自身免疫性疾病，以淋巴细胞侵袭唾液腺和泪腺为特征，伴有B细胞亢进。SS的主要临床表现为眼干和口干，除此之外还有其他外分泌腺及腺体外其他器官的受累而出现多系统损害的症状。SS包括原发性和继发性两类，继发性与系统性自身免疫性疾病如类风湿关节炎、系统性红斑狼疮或系统性硬化症有关。原发性SS在我国人群的患病率为0.3％～0.7％，在老年人群中患病率为3％～4％。本病女性多见，男女发病率比为1:9～20，发病年龄多在40岁～50岁。
[0003]目前，干燥综合征的发病机制尚不清楚，且尚无根治方法。临床上主要是采取措施改善症状，控制和延缓因免疫反应而引起的组织器官损害的进展以及继发性感染。
[0004]生物标志物可以作为反映生物体结构和功能发生改变的信号指标，用于检测复杂疾病的发生和进展。近年来“组学”领域的生物标志物作为辅助手段用于预先、准确、灵敏地判断出疾病发生情况，取得了较好的效果。多个生物标志物联合诊断可以区分疾病的类型以及疾病所处的阶段，辅助临床治疗。而且以血清标志物为例，该方法具有简便、快速、经济且相对无创的优点而被广泛采用，对患者非常友好。
[0005]本专利技术发现了一种血清代谢物可以用于诊断干燥综合征，特提出本专利技术。

技术实现思路

[0006]本专利技术旨在克服现有技术的不足，提供一种血清代谢物用于制备诊断干燥综合征的试剂盒的用途。
[0007]本专利技术上述目的通过如下技术方案实现：
[0008]一种血清代谢物用于制备诊断干燥综合征的试剂盒的用途，所述干燥综合征为继发性干燥综合征，所述血清代谢物为beta
‑
Mannosylglycerate。
[0009]一种诊断干燥综合征的试剂盒，所述干燥综合征为继发性干燥综合征，该试剂盒中含有用于检测血清代谢物beta
‑
Mannosylglycerate的检测试剂。
[0010]有益效果：
[0011]1、本专利技术提供的诊断指标为血清代谢物，只需要采取少量血液即可检测，基本无创；
[0012]2、本专利技术提供的血清代谢物beta
‑
Mannosylglycerate可以有效诊断区分健康人和干燥综合征患者，诊断准确率高，因而具有开发成诊断干燥综合征的试剂盒的前景。
附图说明
[0013]图1为beta
‑
Mannosylglycerate在健康受试者和干燥综合征患者血清中的含量水
平比较；
[0014]图2为血清beta
‑
Mannosylglycerate诊断区分健康受试者vs干燥综合征的ROC曲线。
具体实施方式
[0015]下面结合附图和实施例具体介绍本专利技术实质性内容，但并不以此限定本专利技术的保护范围。
[0016]实施例1：血清代谢物对干燥综合征的诊断效能
[0017]一、实验样本和试剂
[0018]收集江苏省中医院225例健康受试者和210例干燥综合征患者。健康受试者为体检健康的正常人，干燥综合征患者根据2012年美国风湿病学会(ACR)干燥综合征的分类标准确诊。各组患者的年龄、性别和体重指数匹配，无显著性差异。按表1将各组受试者或患者随机分为训练集样本和验证集样本。
[0019]表1训练集样本和验证集样本数量
[0020] 健康受试者干燥综合征患者训练集135125验证集9085总样本数225210
[0021]排除标准：
①
明确诊断的原发性干燥综合征患者及其它自身免疫性和慢性疾病患者；
②
合并有心脑血管、肝、肾脏和造血系统等严重原发性疾病；
③
患有精神疾病不能合作者；
④
妊娠或哺乳期妇女，或准备妊娠者；
⑤
近1个月内参加其它临床试验者；
⑥
不愿接受本研究者。
[0022]主要实验试剂：液相色谱级乙腈(ACN)、甲醇(MeOH)和甲基叔丁基醚(MTBE)购自德国默克公司(Darmstadt,Germany)，异丙醇、甲酸和甲酸铵购自ROE(DE,USA)；超纯水采用了Milli
‑
Q系统(Millipore,Billerica,MA,USA)；N,O
‑
双(三甲基硅)三氟乙酰胺(BSTFA)、含1％三甲基氯硅烷(TMCS)、盐酸甲氧胺、吡啶和1,2
‑
13
C2‑
肉蔻酸购自Sigma
‑
Aldrich(St.Louis,MO,USA)。
[0023]二、实验方法
[0024]1、血清样本的采集及储存
[0025]采集患者清晨空腹外周血并将其置于不含抗凝剂的试管内，在室温下自然凝集30
‑
60min，待血液凝固，以2000rpm速度离心10min，小心吸取上层清亮血清液体于无菌冻干管中，标记后放入
‑
80℃冰箱储存备用。
[0026]2、GC
‑
MS技术测定血清中各代谢物的含量水平
[0027]检测仪器：采用Trace 1310气相色谱仪搭配AS 1310自动进样器进行色谱分离，TG
‑
5MS气相色谱柱，使用TSQ 8000三重四极杆质谱仪(Thermo Scientific,Waltham,MA,USA)进行全扫描；
[0028]色谱条件：色谱柱为TG
‑
5MS气相色谱柱(0.25mm
×
30m，0.25μm)。载气为He2，设置恒定流速为1.2mL/min，采用分流模式，分流流速为24.0mL/min，分流比为20：1，进样口温度为250℃，升温程序：起始温度60℃，保持1min后，以20℃/min速率升至320℃，保持5min，样
品进样体积为1μL。
[0029]质谱方法：采用EI模式，离子传输线温度为250℃，离子源温度为280℃，电离能为70eV，m/z采集范围为50
‑
500，采集时间3.5
‑
19min。
[0030]样本处理：先将血清样本在冰上解冻，然后往40μL血清中加入225μL冰甲醇(含内标5μg/mL)，涡旋10s后，加入750μL冰甲基叔丁基醚(MTBE)，在4℃震荡10min，加入188μL超纯水，涡旋20s后在4℃、14000r/min的条件下离心2min，吸取350μL上清至1.5mL的离心管中，挥干，
‑
20℃保存。剩余液体再次离心2min，吸取250μL下层液体，加入750μL甲醇：异丙醇＝本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种血清代谢物用于制备诊断干燥综合征的试剂盒的用途，所述干燥综合征为继发性干燥综合征，其特征在于：所述血清代谢物为beta
‑
Mannosylglycerate。2.一种...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘史佳，陆燕，郭云柯，徐婷婷，卢嘉微，
申请(专利权)人：江苏省中医院，
类型：发明
国别省市：