一种同时扩增人34个STR基因座的引物组、试剂盒及其应用制造技术

本发明专利技术提供了一种同时扩增人34个STR基因座的引物组、试剂盒及其应用，属于分子遗传学技术领域。本发明专利技术中，所述34个STR基因座包括29个常染色体STR基因座、1个Y染色体STR基因座和4个性别鉴定STR基因座；本发明专利技术能够实现在一个反应中同时扩增34个STR基因座，包含了公安部规定的20个核心基因座以及10个优选基因座，包含了目前市面上主流试剂盒的所有位点，同时还包含了5个性别鉴定基因座，可有效的预防由于Y染色体缺失导致的性别鉴定错误的风险。34个STR基因座联合起来，具有高个体识别力、高非父排除率的特征。

【技术实现步骤摘要】
一种同时扩增人34个STR基因座的引物组、试剂盒及其应用
本专利技术涉及分子遗传学
，尤其涉及一种同时扩增人34个STR基因座的引物组、试剂盒及其应用。
技术介绍
STR(shorttandemrepeats，短串连重复序列)又称微卫星序列，是大量存在于人类基因组DNA中的短串连重复序列，重复单位为2～6个核苷酸。由于具有高度多态性和稳定性，并且与AMP-FLP和VNTR等分型方法相比，STR基因分型方法所扩增的产物长度小得多(小于500bp)，因此对于模板质量要求较低，即使降解的DNA模板也可以进行分析。此外，STR分型适用于多种DNA纯化方法所纯化的DNA，而这些纯化方法所获得的DNA量往往不够作Southern印迹分析。鉴于以上这些特点，STR分型技术已经广泛应用于法医身份识别鉴定。法医DNA数据库是集成现代DNA检验技术、信息技术、网络技术和科学管理等要素。法医DNA数据库的核心在于所收录的STR数据信息，一个完善的法医DNA数据库应该包含常染色体STR数据库和Y染色体STR数据库。Y染色体STR数据为案件提供侦查线索，缩小侦查范围，可以预测罪犯可能存在的地区、种族甚至姓氏，常染色体STR数据用于最后罪犯个体的筛查及确认。目前公布的20个常染色体STR核心基因座(20个基因座，包含Amelogenin、CSF1PO、D3S1358、D5S818、D7S820、D8S1179、D13S317、D16S539、D18S51、D21S11、FGA、TH01、TPOX、vWA、D2S1338、D19S433、D6S1043、D12S391、PentaD、PentaE)及10个常染色体STR优选基因座(10个基因座，包含D1S1656、D2S441、D22S1045、D10S1248、D8S1132、D15S659、D3S3045、D19S253、D6S477、D10S1435用于扩大筛查使用)，相对应的，DNA法医鉴定对试剂盒的基因座数量、特异性及试剂盒的灵敏度就有了更高的需求。目前常染色体STR扩增试剂盒主要用于案件侦破、亲缘关系鉴定过程，市面上充斥着各类试剂盒，虽然都包含了13个CODIS核心基因座，但是其他基因座各不相同。公安在使用过程中极不方便，要想使用更多的基因座进行犯罪嫌疑人的判定，通常需要多款试剂盒联合使用，也需要耗费更多的时间。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种同时扩增人34个STR基因座的引物组、试剂盒及其应用，本专利技术的引物组和试剂盒扩增的基因座数量多、特异性强、灵敏度高。为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供以下技术方案：本专利技术提供了一种同时扩增人34个STR基因座的引物组，所述34个STR基因座包括29个常染色体STR基因座、1个Y染色体STR基因座和4个性别鉴定基因座；所述29个常染色体STR基因座分别为：D3S1358，TH01，D21S11，D18S51，D2S1338，D15S659，D5S818，D13S317，D7S820，D16S539，CSF1PO，PentaE，D6S1043，D22S1045，D19S433，D1S1656，D12S391，D10S1248，D2S441，vWA，D8S1179，TPOX，FGA，D3S3045，D10S1435，D19S253，D6S477，D8S1132和PentaD；所述1个Y染色体STR基因座为：DYS391；所述4个性别鉴定基因座分别为：RS759551978，RS2032678，RS771783753和Amelogenin；用于扩增RS759551978的上游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：1所示，下游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：2所示；用于扩增RS2032678的上游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：3所示，下游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：4所示；用于扩增D3S1358的上游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：5所示，下游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：6所示；用于扩增TH01的上游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：7所示，下游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：8所示；用于扩增D21S11的上游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：9所示，下游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：10所示；用于扩增D18S51的上游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：11所示，下游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：12所示；用于扩增D2S1338的上游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：13所示，下游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：14所示；用于扩增D15S659的上游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：15所示，下游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：16所示；用于扩增RS771783753的上游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：17所示，下游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：18所示；用于扩增Amelogenin的上游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：19所示，下游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：20所示；用于扩增D5S818的上游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：21所示，下游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：22所示；用于扩增D13S317的上游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：23所示，下游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：24所示；用于扩增D7S820的上游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：25所示，下游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：26所示；用于扩增D16S539的上游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：27所示，下游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：28所示；用于扩增CSF1PO的上游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：29所示，下游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：30所示；用于扩增PentaE的上游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：31所示，下游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：32所示；用于扩增D6S1043的上游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：33所示，下游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：34所示；用于扩增D22S1045的上游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：35所示，下游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：36所示；用于扩增D19S433的上游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：37所示，下游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：38所示；用于扩增D1S1656的上游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：39所示，下游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：40所示；用于扩增DYS391的上游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：41所示，下游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：42所示；用于扩增D12S391的上游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：43所示，下游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：44所示；用于扩增D10S1248的上游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：45所示，下游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：46所示；用于扩增D2S441的上游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：47所示，下游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：48所示；用于扩增vWA的上游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：49所示，下本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种同时扩增人34个STR基因座的引物组，所述34个STR基因座包括29个常染色体STR基因座、1个Y染色体STR基因座和4个性别鉴定基因座；所述29个常染色体STR基因座分别为：D3S1358，TH01，D21S11，D18S51，D2S1338，D15S659，D5S818，D13S317，D7S820，D16S539，CSF1PO，Penta E，D6S1043，D22S1045，D19S433，D1S1656，D12S391，D10S1248，D2S441，vWA，D8S1179，TPOX，FGA，D3S3045，D10S1435，D19S253，D6S477，D8S1132和PentaD；所述1个Y染色体STR基因座为：DYS391；所述4个性别鉴定基因座分别为：RS759551978，RS2032678，RS771783753和Amelogenin；/n用于扩增RS759551978的上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示，下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示；/n用于扩增RS2032678的上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：3所示，下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：4所示；/n用于扩增D3S1358的上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：5所示，下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：6所示；/n用于扩增TH01的上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：7所示，下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：8所示；/n用于扩增D21S11的上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：9所示，下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：10所示；/n用于扩增D18S51的上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：11所示，下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：12所示；/n用于扩增D2S1338的上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：13所示，下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：14所示；/n用于扩增D15S659的上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：15所示，下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：16所示；/n用于扩增RS771783753的上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：17所示，下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：18所示；/n用于扩增Amelogenin的上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：19所示，下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：20所示；/n用于扩增D5S818的上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：21所示，下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：22所示；/n用于扩增D13S317的上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：23所示，下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：24所示；/n用于扩增D7S820的上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：25所示，下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：26所示；/n用于扩增D16S539的上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：27所示，下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：28所示；/n用于扩增CSF1PO的上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：29所示，下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：30所示；/n用于扩增Penta E的上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：31所示，下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：32所示；/n用于扩增D6S1043的上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：33所示，下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：34所示；/n用于扩增D22S1045的上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：35所示，下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：36所示；/n用于扩增D19S433的上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：37所示，下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：38所示；/n用于扩增D1S1656的上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：39所示，下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：40所示；/n用于扩增DYS391的上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：41所示，下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：42所示；/n用于扩增D12S391的上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：43所示，下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：44所示；/n用于扩增D10S1248的上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：45所示，下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：46所示；/n用于扩增D2S441的上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：47所示，下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：48所示；/n用于扩增vWA的上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：4...

【技术特征摘要】
1.一种同时扩增人34个STR基因座的引物组，所述34个STR基因座包括29个常染色体STR基因座、1个Y染色体STR基因座和4个性别鉴定基因座；所述29个常染色体STR基因座分别为：D3S1358，TH01，D21S11，D18S51，D2S1338，D15S659，D5S818，D13S317，D7S820，D16S539，CSF1PO，PentaE，D6S1043，D22S1045，D19S433，D1S1656，D12S391，D10S1248，D2S441，vWA，D8S1179，TPOX，FGA，D3S3045，D10S1435，D19S253，D6S477，D8S1132和PentaD；所述1个Y染色体STR基因座为：DYS391；所述4个性别鉴定基因座分别为：RS759551978，RS2032678，RS771783753和Amelogenin；
用于扩增RS759551978的上游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：1所示，下游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：2所示；
用于扩增RS2032678的上游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：3所示，下游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：4所示；
用于扩增D3S1358的上游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：5所示，下游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：6所示；
用于扩增TH01的上游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：7所示，下游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：8所示；
用于扩增D21S11的上游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：9所示，下游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：10所示；
用于扩增D18S51的上游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：11所示，下游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：12所示；
用于扩增D2S1338的上游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：13所示，下游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：14所示；
用于扩增D15S659的上游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：15所示，下游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：16所示；
用于扩增RS771783753的上游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：17所示，下游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：18所示；
用于扩增Amelogenin的上游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：19所示，下游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：20所示；
用于扩增D5S818的上游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：21所示，下游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：22所示；
用于扩增D13S317的上游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：23所示，下游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：24所示；
用于扩增D7S820的上游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：25所示，下游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：26所示；
用于扩增D16S539的上游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：27所示，下游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：28所示；
用于扩增CSF1PO的上游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：29所示，下游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：30所示；
用于扩增PentaE的上游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：31所示，下游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：32所示；
用于扩增D6S1043的上游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：33所示，下游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：34所示；
用于扩增D22S1045的上游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：35所示，下游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：36所示；
用于扩增D19S433的上游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：37所示，下游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：38所示；
用于扩增D1S1656的上游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：39所示，下游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：40所示；
用于扩增DYS391的上游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：41所示，下游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：42所示；
用于扩增D12S391的上游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：43所示，下游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：44所示；
用于扩增D10S1248的上游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：45所示，下游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：46所示；
用于扩增D2S441的上游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：47所示，下游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：48所示；
用于扩增vWA的上游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：49所示，下游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：50所示；
用于扩增D8S1179的上游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：51所示，下游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：52所示；
用于扩增TPOX的上游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：53所示，下游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：54所示；
用于扩增FGA的上游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：55所示，下游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：56所示；
用于扩增D3S3045的上游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：57所示，下游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：58所示；
用于扩增D10S1435的上游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：59所示，下游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：60所示；
用于扩增D19S253的上游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：61所示，下游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：62所示；
用于扩增D6S477的上游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：63所示，下游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：64所示；
用于扩增D8S1132的上游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：65所示，下游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：66所示；
用于扩增PentaD的上游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：67所示，下游引物的核苷酸序列如SEQIDNO：68所示。


2.根据权利要求1所述的引物组，其特征在于，所述34个STR基因座分为五组，其中，
第一组包括：RS759551978，RS2032678，D3S1358，TH01，D21S11，D18S51，D2S1338和D15S659；
第二组包括：RS771783753，Amelogenin，D5S818，D13S317，D7S820，D16S539，CSF1PO和PentaE；
第三组包括：D6S1043，D22S1045，D19S433，D1S1656，DYS391，D12S391和D10S1248；
第四组包括：D2S441，vWA，D8S1179，TPOX和FGA；
第五组包括：D3S3045，D10S1435，D19S253，D6S477，D8S1132和PentaD；
所述第一组到第五组STR基因座的引物采用的荧光染料彼此不同。


3.一种包括权利要求1或2所述引物组的试剂盒。


4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括PCR反应预混液和去离子水。


5.根据权利要求3或4所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括分子量内标和等位基因阶梯。


6.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述引物组中，
SEQIDNO：1和SEQIDNO：2所示引物的浓度独立为0.3～0.4μM；
SEQIDNO：3和SEQIDNO：4所示引物的浓度独立为0.12～0.18μM；
SEQIDNO：5和SEQIDNO：6所示引物的浓度独立为0.08～0.13μM；
SEQIDNO：7和SEQIDNO：8所示引物的浓度独立为0.1～0.15μM；
SEQIDNO：9和SEQIDNO：10所示引物的浓度独立为0.2～0.25μM；
SEQIDNO：1...

【专利技术属性】
技术研发人员：冉凌飞，蒿杰，刘甲乾，路瑶，赵亚楠，
申请(专利权)人：百特元生物科技北京有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11