一种基于CD271的新型抗原表位及其应用制造技术

本发明专利技术涉及一种基于CD271的新型的抗原表位肽及其应用，所述抗原表位肽为：（1）位于SEQ ID NO.1中；或者，（2）位于与（1）中SEQ ID NO.1序列具有至少80％同一性的氨基酸序列。且上述SEQ ID NO.1中包含一个或多个抗原表位，并且所述抗原表位肽的氨基酸序列长度为SEQ ID NO.1全长的5‑70％。靶向该抗原肽的抗体、核酸适配体、疫苗、纳米粒子等能够与天然带有CD271蛋白的细胞具有稳定的结合。该抗原表位肽或含有该抗原表位肽的核酸、融合蛋白、载体或宿主细胞等在制备CD271相关的检测试剂、疾病治疗生物药物、疫苗等领域，具有重要应用意义。

【技术实现步骤摘要】
一种基于CD271的新型抗原表位及其应用
本专利技术涉及生物
，特别是涉及一种CD271的新型的抗原表位肽及其应用。
技术介绍
CD271是一种低亲和力的神经生长因子受体(LNGFR)，属于肿瘤坏死因子受体超家族成员，相对分子质量为75kD，又称为p75NTR，它包含3个区域：富含半胱氨酸的膜外区、跨膜区和155个氨基酸残基组成的胞内区。CD271不仅表达在神经系统，与神经细胞的发育、分化和存活密切相关，也能够识别肿瘤干细胞、间充质干细胞。在肿瘤治疗领域，CD271在黑色素瘤等多种肿瘤细胞或肿瘤干细胞表面高表达，靶向CD271的单克隆抗体及其偶联药物能够起到靶向杀伤作用，从而治疗肿瘤。在间充质干细胞领域，CD271抗体可以通过流式分选或者偶联至磁珠对间充质干细胞进行磁性分选，所富集的细胞具有特异性高、纯度高、集落形成能力强等优点。因此，特异性识别CD271的抗体具有广泛的应用价值，稳定、高效的抗原表位对开发CD271单克隆抗体或基于CD271的疫苗等具有重要意义。天然CD271的胞外结构包括4个富含半胱氨酸的CRD结构(CRD1-4)以及一个连接区域(stalk区)。目前已有的CD271抗体产品，主要为各类科研试剂，其抗原表位主要是表达CD271的细胞，如黑色素瘤细胞，或CD271的CRD区域。然而，在CD271表达后，CRD区域会被蛋白酶水解从而脱落，因此靶向CRD区的抗体与CD271阳性细胞的结合会受到影响，甚至在细胞代谢的某个阶段无法检测到CD271的表达，因此亟需开发新的抗原表位，为基于CD271的抗体、疫苗研究及相关检测或疾病治疗提供新的工具。
技术实现思路
鉴于以上所述现有技术的缺点，本专利技术提供一种基于CD271的新型抗原表位肽及其应用，以解决现有技术的不足。专利技术的目的是通过以下技术方案来实现：本专利技术第一方面提供一种CD271的抗原表位肽，所述抗原表位肽为：(1)位于多肽链SEQIDNO.1中；或者，(2)位于与(1)中SEQIDNO.1序列具有至少80％同一性的氨基酸序列中；(3)且上述SEQIDNO.1中包含一个或多个抗原表位，并且所述抗原表位肽的氨基酸序列长度为SEQIDNO.1全长的5-70％。SEQIDNO.1所示序列，长度：62aa，具体为：EEIPGRWITRSTPPEGSDSTAPSTQEPEAPPEQDLIASTVAGVVTTVMGSSQPVVTRGTTDN。进一步地，所述抗原表位肽位于SEQIDNO.1中第1位～35位氨基酸序列中的连续氨基酸序列。进一步地，所述抗原表位肽位于SEQIDNO.1中第11位～35位氨基酸序列中的连续氨基酸序列。进一步地，所述抗原表位肽位于SEQIDNO.1中第18位～27位氨基酸序列中的连续氨基酸序列。进一步地，所述抗原表位肽为与SEQIDNO.1中第18位～27位的连续氨基酸具有80％以上重叠度的氨基酸序列。可选的，所述抗原表位肽的氨基酸序列如SEQIDNO.3-11任一所示。具体的，一种抗原表位肽Peptide，长度：19aa，序列如SEQIDNO.3所示，具体为：TRSTPPEGSDSTAPSTQEPE。另一种抗原表位肽Peptide，长度：19aa，序列如SEQIDNO.4所示，具体为：EPEAPPEQDLIASTVAGVV。另一种抗原表位肽Peptide，长度：19aa，序列如SEQIDNO.5所示，具体为：VTTVMGSSQPVVTRGTTDN。另一种抗原表位肽Peptide，长度：19aa，序列如SEQIDNO.6所示，具体为：LIASTVAGVVTTVMGSSQP。另一种抗原表位肽Peptide，长度：19aa，序列如SEQIDNO.7所示，具体为：EEIPGRWITRSTPPEGSDS。另一种抗原表位肽Peptide，长度：19aa，序列如SEQIDNO.8所示，具体为：DSTAPSTQEPEAPPEQDLI。另一种抗原表位肽Peptide，长度：10aa，序列如SEQIDNO.9所示，具体为：GSDSTAPSTQ。另一种抗原表位肽Peptide，长度：10aa，序列如SEQIDNO.10所示，具体为：DSTAPSTQEP。另一种抗原表位肽Peptide，长度：7aa，序列如SEQIDNO.11所示，具体为：TPPEGSD。本专利技术第二方面提供一种融合蛋白，所述融合蛋白是由以上任一项所述的抗原表位肽与载体蛋白融合所形成的。本专利技术第三方面提供一种能够编码抗原表位肽的核酸序列，所述核酸序列为能够编码以上任一项所述的抗原表位肽的基因序列或基因片段。例如，编码SEQIDNO.1的核苷酸序列如SEQIDNO.2所示，具体的：186bpgaggagatccctggccgttggattacacggtccacacccccagagggctcggacagcacagcccccagcacccaggagcctgaggcacctccagaacaagacctcatagccagcacggtggcaggtgtggtgaccacagtgatgggcagctcccagcccgtggtgacccgaggcaccaccgacaac。本专利技术第四方面提供一种表达载体，所述表达载体含有以上所述的核酸序列。本专利技术第五方面提供一种宿主细胞，所述的宿主细胞含有以上所述的表达载体，或者在基因组中整合有以上所述的核酸序列。本专利技术第六方面提供一种抗体，其特征在于：所述抗体为能够结合权利以上任一项所述的抗原表位肽的抗体。进一步地，所述抗体为能够抑制或减弱与以上任一项所述的抗原表位肽相关的信号传递的抗体。进一步地，所述抗体为单克隆抗体或多克隆抗体，种属来源可以为人，鼠，兔，猴，牛，羊或羊驼等哺乳动物。本专利技术第六方面提供一种疫苗，所述疫苗含有以上任一项所述的抗原表位肽、融合蛋白、核酸序列、表达载体或者宿主细胞。本专利技术第七方面提供一种组合物，其特征在于，含有以上任一项所述的抗原表位肽、融合蛋白、核酸序列、表达载体、宿主细胞、抗体或者疫苗，以及免疫学和药学上可接受的载体和/或辅料。本专利技术第八方面提供以上任一项所述的抗原表位肽、融合蛋白、核酸序列、表达载体或者宿主细胞的用途：(1)用于制备针对所述抗原表位的抗体、核酸适配体、疫苗、纳米粒子；和/或(2)用于制备治疗与所述抗原表位相关的疾病的药物。如上所述，供了一种与基于CD271的新型的抗原表位肽及其应用，其至少具有以下有益效果：本专利技术的抗原表位肽具有免疫原性，其可诱导产生免疫应答反应，该抗原表位肽或含有该抗原表位肽的基因分子、融合蛋白、载体或宿主细胞等可用来制备抗体、核酸适配体、疫苗、靶向CD271的纳米颗粒等，具有重要应用意义。该抗原表位肽选取自CD271靶点膜外稳定、同源性低、无糖基化和磷酸化位点的序列，靶向该抗原表位肽的抗体等分子与天然带有CD271靶点细胞本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种新型的抗原表位肽，其特征在于：所述抗原表位肽为：/n(1)为SEQ ID NO.1，或位于多肽链SEQ ID NO.1中；或者，/n(2)位于与(1)中SEQ ID NO.1序列具有至少80％同一性的氨基酸序列中；/n(3)且上述SEQ ID NO.1中包含一个或多个抗原表位，并且所述抗原表位肽的氨基酸序列长度为SEQ ID NO.1全长的5-70％。/n

【技术特征摘要】
1.一种新型的抗原表位肽，其特征在于：所述抗原表位肽为：
(1)为SEQIDNO.1，或位于多肽链SEQIDNO.1中；或者，
(2)位于与(1)中SEQIDNO.1序列具有至少80％同一性的氨基酸序列中；
(3)且上述SEQIDNO.1中包含一个或多个抗原表位，并且所述抗原表位肽的氨基酸序列长度为SEQIDNO.1全长的5-70％。


2.根据权利要求1所述的新型的抗原表位肽，其特征在于：所述抗原表位肽为位于SEQIDNO.1中第1位～35位氨基酸序列中的连续氨基酸序列。


3.根据权利要求2所述的新型的抗原表位肽，其特征在于：所述抗原表位肽为位于SEQIDNO.1中第11位～35位氨基酸序列中的连续氨基酸序列。


4.根据权利要求3所述的新型的抗原表位肽，其特征在于：所述抗原表位肽为位于SEQIDNO.1中第18位～27位氨基酸序列中的连续氨基酸序列。


5.根据权利要求4所述的新型的抗原表位肽，其特征在于：所述抗原表位肽为与SEQIDNO.1中第18位～27位的连续氨基酸具有80％以上重叠度的氨基酸序列。


6.根据权利要求1所述的新型的抗原表位肽，其特征在于：所述抗原表位肽的氨基酸序列如SEQIDNO.3-11任一所示。


7.一种融合蛋白，所述融合蛋白是由权利要求1-6中任一项所述的抗原表位肽与载体蛋白融合所形成的。


8.一种能够编码抗原表位肽的核酸序列，其特征在于：所述核酸序列为能够编码权利要求1-6中任意一项所述的抗原表位肽的基因序...

【专利技术属性】
技术研发人员：路慧丽，王紫嫣，杨慧，朱建伟，
申请(专利权)人：上海交通大学，
类型：发明
国别省市：上海;31