一种生物标志物组合、含其的试剂盒及其应用制造技术

本发明专利技术涉及一种生物标志物组合、含其的试剂盒及其应用。其中，所述生物标志物组合包含PLG、APEX1、PARP1、PGP9.5、TP53和MAGEA1。本发明专利技术的生物标志物组合在诊断早期肺癌或其预后时或不确定性肺小结节良恶性鉴别时，具有较高的敏感性和/或特异性，适用于临床应用。

【技术实现步骤摘要】
一种生物标志物组合、含其的试剂盒及其应用
本专利技术涉及癌症诊断和治疗领域，尤其是涉及一种生物标志物组合、含其的试剂盒及其应用。
技术介绍
肺癌是全球发病率和死亡率最高的癌症之一，近年来肺癌发病率逐步升高，最新的卫生统计年鉴显示，肺癌死亡率占我国恶性肿瘤死亡率的第一位。截至2017年，我国有3.2亿烟民，7.4亿人遭受二手烟暴露，每年新增70万例肺癌患者。加之人口老龄化进程、农村城镇化进程及城市现代化进程加剧，大气污染与环境污染日趋严重，不健康生活方式等导致的肺癌发病与死亡率还将进一步攀升。预计到2020年，我国肺癌发病人数将突破80万人，死亡人数将接近70万人。尽管肺癌的治疗手段日新月异，其5年生存率仅14.1％，60％的患者在诊断后1年内死亡。统计资料显示肺癌的预后与诊断时的临床分期密切相关。0期肺癌患者术后的5年生存率可达90％以上，Ia期患者术后5年生存率为60％，而Ⅱ-Ⅳ期患者总的5年生存率则从40％下降到5％以下。由此可见肺癌早期诊断直接影响着患者的预后。然而令人遗憾的是，目前肺癌早期诊断率仅15％，0期患者一般没有任何症状，确诊时还不到肺癌患者总数的0.6％。故提高肺癌早期诊断率，争取“早期发现、早期诊断、早期治疗”，是降低患者死亡率的重要措施。肿瘤早期诊断目的在于能够在临床体征出现之前准确的诊断出尚处于发展早期的癌症。随着医学影像技术的发展，低剂量螺旋CT被广泛用于检测肺部早期结节，是肺癌早期筛查的有效手段。但低剂量螺旋CT的问题在于其检测结果的高假阳性，而且多次CT检测还有可能加速肺癌的恶化。其他的早期肺癌检查方法包括PET、核磁共振、支气管内镜，针吸活检等检查存在无法早期筛查、有创伤、价格昂贵等问题。而CEA、CYFRA21-1、NSE等传统常规肿瘤标志物，在肿瘤早期血液中含量非常低甚至没有，目前主要用于恶性肿瘤患者病情的动态监测，不能作为早期诊断或确诊依据。病理检测是手术或活检获得病灶组织进行病理学染色分析，是目前唯一能确诊肿瘤的金标准。但这种侵入性检查手段还无法作为癌症早期诊断与筛查的检测手段。在肺癌的临床研究中，通过EGFR、KRAS、ALK、BRAF等基因突变检测，对肺癌靶向治疗药物的个性化治疗取得了重大突破。然而，这些基因突变检测无法用于肺癌早期诊断或肺癌高危人群的筛查。使用DNA甲基化检测来进行结直肠癌的早期诊断已经有一些商业化的产品，但用于肺癌早期诊断的产品还没有上市。循环肿瘤细胞(CTC)可由肿瘤细胞自发或受外界因素干扰而从肿瘤原发病灶脱离进入外周血循环，是评价化学疗法效果，肺癌预后、病情监测的一个特别有希望的
肺癌自身抗体谱检测具有更多优势，肿瘤特异性抗原是肿瘤发生、进展过程中细胞坏死后释放、脱落或者外分泌的特异蛋白产物。在癌症初期，机体免疫系统可识别肿瘤细胞表达的肿瘤特异性抗原，产生针对这些抗原的自身抗体。在早期肺癌及癌前患者血液中，自身抗体水平远高于抗原水平，自身抗体具有免疫监视、免疫放大、循环扩散的特点，并且自身抗体相对于其他肿瘤抗原标志物及DNA标志物具有：在血清中出现的时间早、血液检测时间窗长，、血液信号强度高、早期检测灵敏度高等特点。因此将多个自身抗体标志物联合检测是获取高敏感性和高特异性检测的手段。目前市场上，Oncimmune公司的产品及杭州凯保罗生物科技有限公司的自身抗体检测试剂盒(酶联免疫法)是由一组7个或8个相关自身抗体肿瘤标志物联合检测的产品，采用酶联免疫(ELISA)检测方法，用于肺癌的辅助检测。该产品采用ELISA检测方法不具有高通量的特点，而且此2个产品用于早期肺癌的检测时的敏感性或特异性有待提高。
技术实现思路
为解决现有技术中早期肺癌诊断或其预后的生物标志物组合或试剂盒敏感性和特异性低的技术问题，提供一种生物标志物组合、含其的试剂盒及其应用。为解决上述技术问题，本专利技术的技术方案之一为：提供一种用于早期肺癌诊断或其预后的生物标志物组合，其中，所述生物标志物组合包含PLG、APEX1、PARP1、PGP9.5、TP53和MAGEA1。较佳地，所述生物标志物组合还包含CDKN2A、SPAG9、NY-ESO-1和/或MAGEA4；任选地，所述生物标志物组合还包含GAGE7、EEF2、BRAF、CAGE、GBU4-5、SOX2、GAD2和/或ELAVL3；任选地，所述生物标志物组合还包含ANXA1、S100A10、HNRPA1、MUC1和/或CRYAA。更佳地，所述生物标志物组合选自：PLG、APEX1、PARP1、PGP9.5、TP53、MAGEA1、CDKN2A、SPAG9、NY-ESO-1、MAGEA4、GAGE7、EEF2、BRAF、CAGE、GBU4-5、SOX2、GAD2和ELAVL3中的七种或七种以上优选十种以上更优选十三种以上生物标志物组合；或，所述生物标志物组合选自：PLG、APEX1、PARP1、PGP9.5、TP53、MAGEA1、CDKN2A、SPAG9、NY-ESO-1、MAGEA4、GAGE7、EEF2、BRAF、CAGE、GBU4-5、SOX2、GAD2、ELAVL3、S100A10和HNRPA1中的七种或七种以上优选十种以上更优选十三种以上生物标志物组合；或，所述生物标志物组合选自：PLG、APEX1、PARP1、PGP9.5、TP53、MAGEA1、CDKN2A、SPAG9、NY-ESO-1、MAGEA4、GAGE7、EEF2、BRAF、CAGE、GBU4-5、SOX2、GAD2、ELAVL3、S100A10、HNRPA1、MUC1和CRYAA中的七种或七种以上优选十种以上更优选十三种以上生物标志物组合；或，所述生物标志物组合选自：PLG、APEX1、PARP1、PGP9.5、TP53、MAGEA1、CDKN2A、SPAG9、NY-ESO-1、MAGEA4、GAGE7、EEF2、BRAF、CAGE、GBU4-5、SOX2、GAD2、ELAVL3、S100A10、HNRPA1、SOX1、ANXA1、ENO1、BIRC7、ZIC2、HUD、CCNB1、IGFBP2、EFHD2、MUC1、PGAM1、UBQLNl、CDK2、CTAG1B、CRYAA和DNAJB1中的七种或七种以上优选十种以上更优选十三种以上生物标志物组合；或，所述生物标志物组合选自：PLG、APEX1、PARP1、PGP9.5、TP53、MAGEA1、SPAG9、NY-ESO-1、MAGEA4、BRAF、CAGE、GBU4-5、SOX2、GAD2、ELAVL3、ANXA1和/或HNRPA1中的七种或七种以上优选十种以上更优选十三种以上生物标志物组合。进一步更佳地，所述生物标志物组合选自以下组：1)PLG、APEX1、PARP1、PGP9.5、TP53、MAGEA1、CDKN2A、SPAG9、NY-ESO-1、MAGEA4、GAGE7、EEF2、BRAF、CAGE、GBU4-5、SOX2、GAD2、ELAVL3、SOX1、ENO1、BIRC7、ZIC2、HUD、CCNB本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于早期肺癌诊断或其预后或不确定性肺小结节良恶性鉴别的生物标志物组合，其特征在于，所述生物标志物组合包含PLG、APEX1、PARP1、PGP9.5、TP53和MAGEA1。/n

【技术特征摘要】
20191122 CN 20191115650751.一种用于早期肺癌诊断或其预后或不确定性肺小结节良恶性鉴别的生物标志物组合，其特征在于，所述生物标志物组合包含PLG、APEX1、PARP1、PGP9.5、TP53和MAGEA1。


2.如权利要求1所述的生物标志物组合，其特征在于，所述生物标志物组合还包含CDKN2A、SPAG9、NY-ESO-1和/或MAGEA4；任选地，所述生物标志物组合还包含GAGE7、EEF2、BRAF、CAGE、GBU4-5、SOX2、GAD2和/或ELAVL3；任选地，所述生物标志物组合还包含ANXA1、S100A10、HNRPA1、MUC1和/或CRYAA。


3.如权利要求1或2所述的生物标志物组合，其特征在于，所述生物标志物组合选自：PLG、APEX1、PARP1、PGP9.5、TP53、MAGEA1、CDKN2A、SPAG9、NY-ESO-1、MAGEA4、GAGE7、EEF2、BRAF、CAGE、GBU4-5、SOX2、GAD2和ELAVL3中的七种或七种以上优选十种以上更优选十三种以上生物标志物组合；
或，所述生物标志物组合选自：PLG、APEX1、PARP1、PGP9.5、TP53、MAGEA1、CDKN2A、SPAG9、NY-ESO-1、MAGEA4、GAGE7、EEF2、BRAF、CAGE、GBU4-5、SOX2、GAD2、ELAVL3、S100A10和HNRPA1中的七种或七种以上优选十种以上更优选十三种以上生物标志物组合；
或，所述生物标志物组合选自：PLG、APEX1、PARP1、PGP9.5、TP53、MAGEA1、CDKN2A、SPAG9、NY-ESO-1、MAGEA4、GAGE7、EEF2、BRAF、CAGE、GBU4-5、SOX2、GAD2、ELAVL3、S100A10、HNRPA1、MUC1和CRYAA中的七种或七种以上优选十种以上更优选十三种以上生物标志物组合；
或，所述生物标志物组合选自：PLG、APEX1、PARP1、PGP9.5、TP53、MAGEA1、CDKN2A、SPAG9、NY-ESO-1、MAGEA4、GAGE7、EEF2、BRAF、CAGE、GBU4-5、SOX2、GAD2、ELAVL3、S100A10、HNRPA1、SOX1、ANXA1、ENO1、BIRC7、ZIC2、HUD、CCNB1、IGFBP2、EFHD2、MUC1、PGAM1、UBQLNl、CDK2、CTAG1B、CRYAA和DNAJB1中的七种或七种以上优选十种以上更优选十三种以上生物标志物组合；
或，所述生物标志物组合选自：PLG、APEX1、PARP1、PGP9.5、TP53、MAGEA1、SPAG9、NY-ESO-1、MAGEA4、BRAF、CAGE、GBU4-5、SOX2、GAD2、ELAVL3、ANXA1和/或HNRPA1中的七种或七种以上优选十种以上更优选十三种以上生物标志物组合。


4.如权利要求1-3中任一项所述的生物标志物组合，其特征在于，所述生物标志物组合选自以下组：
1)PLG、APEX1、PARP1、PGP9.5、TP53、MAGEA1、CDKN2A、SPAG9、NY-ESO-1、MAGEA4、GAGE7、EEF2、BRAF、CAGE、GBU4-5、SOX2、GAD2、ELAVL3、SOX1、ENO1、BIRC7、ZIC2、HUD、CCNB1、IGFBP2、EFHD2、MUC1、PGAM1、UBQLNl、ANXA2、CDK2、CTAG1B、CRYAA、DNAJB1；
2)PLG、APEX1、PARP1、PGP9.5、TP53、MAGEA1、CDKN2A、SPAG9、NY-ESO-1、MAGEA4、GAGE7、EEF2、BRAF、CAGE、GBU4-5、SOX2、GAD2、ELAVL3、ENO1、BIRC7、ZIC2、HUD、CCNB1、IGFBP2、EFHD2、MUC1、PGAM1、UBQLNl、ANXA2、CDK2；
3)PLG、APEX1、PARP1、PGP9.5、MAGEA1、CDKN2A；
4)PLG、APEX1、PARP1、PGP9.5、MAGEA1、CDKN2A、SPAG9、NY-ESO-1；
5)PLG、APEX1、PARP1、PGP9.5、MAGEA1、CDKN2A、SOX2；
6)PLG、APEX1、PARP1、PGP9.5、TP53、MAGEA1；
7)PLG、APEX1、PARP1、PGP9.5、TP53、MAGEA1、CDKN2A
8)PLG、APEX1、PARP1、PGP9.5、TP53、MAGEA1、CDKN2A、SPAG9
9)PLG、APEX1、PARP1、PGP9.5、TP53、MAGEA1、CDKN2A、SPAG9、NY-ESO-1
10)PLG、APEX1、PARP1、PGP9.5、TP53、MAGEA1、CDKN2A、SPAG9、NY-ESO-1、MAGEA4
11)PLG、APEX1、PARP1、PGP9.5、TP53、MAGEA1、CDKN2A、SPAG9、NY-ESO-1、MAGEA4、GAGE7
12)PLG、APEX1、PARP1、PGP9.5、TP53、MAGEA1、CDKN2A、SPAG9、NY-ESO-1、MAGEA4、GAGE7、EEF2
13)PLG、APEX1、PARP1、PGP9.5、TP53、MAGEA1、CDKN2A、SPAG9、NY-ESO-1、MAGEA4、GAGE7、EEF2、BRAF
14)PLG、APEX1、PARP1、PGP9.5、TP53、MAGEA1、CDKN2A、SPAG9、NY-ESO-1、MAGEA4、GAGE7、EEF2、BRAF、CAGE
15)PLG、APEX1、PARP1、PGP9.5、TP53、MAGEA1、CDKN2A、SPAG9、NY-ESO-1、MAGEA4、GAGE7、EEF2、BRAF、CAGE、GBU4-5
16)PLG、APEX1、PARP1、PGP9.5、TP53、MAGEA1、CDKN2A、SPAG9、NY-ESO-1、MAGEA4、GAGE7、EEF2、BRAF、CAGE、GBU4-5、SOX2
17)PLG、APEX1、PARP1、PGP9.5、TP53、MAGEA1、CDKN2A、SPAG9、NY-ESO-1、MAGEA4、GAGE7、EEF2、BRAF、CAGE、GBU4-5、SOX2、GAD2
18)PLG、APEX1、PARP1、PGP9.5、TP53、MAGEA1、CDKN2A、SPAG9、NY-ESO-1、MAGEA4、GAGE7、EEF2、BRAF、CAGE、GBU4-5、SOX2、GAD2、ELAVL3；
19)PLG、APEX1、PARP1、PGP9.5、TP53、MAGEA1、CDKN2A、SPAG9、NY-ESO-1、MAGEA4、GAGE7、EEF2、BRAF、CAGE、GBU4-5、SOX2、GAD2、ELAVL3、S100A10；
20)PLG、APEX1、PARP1、PGP9.5、TP53、MAGEA1、CDKN2A、SPAG9、NY-ESO-1、MAGEA4、GAGE7、EEF2、BRAF、CAGE、GBU4-5、SOX2、GAD2、ELAVL3、S100A10、HNRPA1；
21)PLG、APEX1、PARP1、PGP9.5、TP53、MAGEA1、CDKN2A、SPAG9、NY-ESO-1、MAGEA4、GAGE7、EEF2、BRAF、CAGE、GBU4-5、SOX2、GAD2、ELAVL3、S100A10、HNRPA1、MUC1；
22)PLG、APEX1、PARP1、PGP9.5、TP53、MAGEA1、CDKN2A、SPAG9、NY-ESO-1、MAGEA4、GAGE7、EEF2、BRAF、CAGE、GBU4-5、SOX2、GAD2、ELAVL3、S100A10、HNRPA1、MUC1、CRYAA；
23)PLG、APEX1、PARP1、PGP9.5、TP53、MAGEA1、CDKN2A、SPAG9、NY-ESO-1、MAGEA4、GAGE7、EEF2、BRAF、CAGE、GBU4-5、SOX2、GAD2、ELAVL3、S100A10、HNRPA1、MUC1、CRYAA、SOX1；
24)PLG、APEX1、PARP1、PGP9.5、TP53、MAGEA1、CDKN2A、SPAG9、NY-ESO-1、MAGEA4、GAGE7、EEF2、BRAF、CAGE、GBU4-5、SOX2、GAD2、ELAVL3、S100A10、HNRPA1、MUC1、CRYAA、SOX1、ANXA1
25)PLG、APEX1、PARP1、PGP9.5、TP53、MAGEA1、CDKN2A、SPAG9、NY-ESO-1、MAGEA4、GAGE7、EEF2、BRAF、CAGE、GBU4-5、SOX2、GAD2、ELAVL3、S100A10、HNRPA1、MUC1、CRYAA、SOX1、ANXA1、ENO1；
26)PLG、APEX1、PARP1、PGP9.5、TP53、MAGEA1、CDKN2A、SPAG9、NY-ESO-1、MAGEA4、GAGE7、EEF2、BRAF、CAGE、GBU4-5、SOX2、GAD2、ELAVL3、S100A10、HNRPA1、MUC1、CRYAA、SOX1、ANXA1、ENO1、BIRC7；
27)PLG、APEX1、PARP1、PGP9.5、TP53、MAGEA1、CDKN2A、SPAG9、NY-ESO-1、MAGEA4、GAGE7、EEF2、BRAF、CAGE、GBU4-5、SOX2、GAD2、ELAVL3、S100A10、HNRPA1、MUC1、CRYAA、SOX1、ANXA1、ENO1、BIRC7、ZIC2；
28)PLG、APEX1、PARP1、PGP9.5、TP53、MAGEA1...

【专利技术属性】
技术研发人员：胡海，赵峰，林当，黄朝远，王增松，陈嘉雯，赵文博，黄璐，
申请(专利权)人：广州市丹蓝生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44